微生物糖发酵（生化）试验

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一、单糖发酵试验 （一）、实验原理 单糖发酵是将葡萄糖，乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内，使其最终浓度为0.75~1％。并加入一定量酚红指示剂及小倒管，制成单糖发酵管，接种细菌经37℃培养18~24小时，若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄，若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成，小倒管内则聚集有气泡；不分解，则指示剂不变色。 (二)、实验材料 1．菌种：大肠杆菌，伤寒杆菌18~24小时琼脂 斜面培养物。 2．培养基：葡萄糖发酵管，乳糖发酵管等。 (三)实验方法1．将伤寒杆菌，大肠杆菌按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。 2．置37℃孵箱培养18~24小时。 3．观察结果：由于一些细菌能分解某种糖类产酸，所以培养基中PH下降到7.0以下，在酚红指示剂的显示下，培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示，如果同时产生气体，则培养基中小倒管内有气泡出现，此乃产酸又产气，以“⊕”表示，不分解，则指示剂不变色，用“-”表示。 (四)、实验结果 伤寒杆菌 大肠杆菌 葡萄糖 + ⊕ 乳 糖 - ⊕ 二、V-P(Voges-Proskauer)试验 （一）、实验原理有些细菌 如产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧，生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中被氧化为二乙酰，再与培养基内胍基结合，生成红色化合物，V—P试验阳性。 (二)、实验材料 1．菌种：大肠杆菌，产气杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。 2．培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 3．试剂：V-P试剂