• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        siRNA对照

        互联网

        17235

         

        1, 普通阴性对照

        siRNA实验应该有阴性对照;
        通用阴性对照为与目的基因的序列无同源性的普通阴性对照;
        Scrambled阴性对照和选中的siRNA序列有相同的组成,但是和mRNA没有明显的同源性;
        阴性对照需要确定和目的靶细胞中其它基因同源性很低。
         

        2, 荧光标记阴性对照

        RNAi negative control与哺乳动物基因无同源性;
        通过标记荧光,可以方便地在荧光显微镜下观察转染情况;
        可用于优化转染条件和评价转染效率;
        具备很好的pH耐受性,在活细胞中更稳定。
         

        3, siRNA阳性对照

        阳性对照作为一个实验系统检查是很重要的。
        可以利用阳性对照来确认RNAi实验中转染、RNA提取和基因表达检测方法是可靠的。
        siRNA阳性对照较为常用的如下:
        LaminA/C,GFP22,Luciferase GL2, MAPK1, Beta-Actin,Vimentin, P53, GAPDH, Cyclophilin B

         

        4, ­转染试剂对照

        对于一个完善的对照系统,转染试剂对照(Mock transfection )是不可缺的。
        转染试剂对照可以检测转染试剂对细胞的毒性、细胞的成活率等细胞转染的各个因素影响。

         

        5, 避免Off-target对照

        对于RNAi研究来说,在哺乳动物中,off-target效应是一个十分关注的问题。
        有大量的报道,一个siRNA影响多个基因的表达。
        因此,大量研究关注于用针对同一个基因的不同区域的多个siRNA进行实验,
        然后分析各自对基因表达效果的影响。理想的结果是针对不同区域的siRNA对同一个靶基因产生相似的干扰效果。 

        (责任编辑:大汉昆仑王)
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序