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        家兔离体小肠平滑肌生理特性

        互联网

        10900

        [目的要求]

        1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。

        2、了解肠段平滑肌的生理特性。

        [基本原理]

        哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。

        [动物与器材]

        兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、 生物 机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。

        [方法与步骤]

        1、装好实验装置,平滑肌槽恒温调至37℃。

        2、制备离体兔肠段

        用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线, 取出十二指肠、空肠 、放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约 1.5cm长的小肠段 (每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。 将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中 ,并调整好台式液充气量(小气泡接连不断)。

        3、开启 生物 机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。

        4、实验观察

        (1)记录对照肠段运动曲线后,停止供气1分钟并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后,立即恢复供气。用新鲜37℃台式液冲洗,待恢复正常(注意作好标记)。

        (2)记录对照肠段运动曲线后,加入25℃台式液,并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。同法,当出现明显变化后,立即用37℃台式液冲洗,待恢复正常。

        (3)同法加入45℃台式液并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后,立即用新鲜37℃台式液冲洗并待恢复。

        由于以上流出液中未加入药物,可以回收使用。以下加入药物的流出也不可再用。
        (4)同法,加入2滴肾上腺素(1:10000),观察并记录曲线变化。

        (5)同法加入1~2滴乙酰胆碱(1:10000),观察并记录曲线变化。

        (6)加入3滴阿托品后立即加入于(5)同样剂量的乙酰胆碱,记录并观察曲线变化。同(5)比较曲线有何不同。

        注意:
        1.加药前必须准备好更换用的37℃台式液。上述药物剂量只是参考,效果不明显可补加,每次加药出现效果后,必须立即更换浴槽内的台式液并冲洗3次,待肠肌恢复正常后在观察下一项目。浴槽内台式液要保持一定温度。
        2.游离及取出肠段时,动作要快,取兔肠及兔肠穿线时尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性,可先预冷充氧的营养液,游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。实验中始终通气。

        [思考题]

        1、本实验是否可用麻醉动物的肠段?为什么?
        2、进行哺乳动物离体组织器官实验时,需控制哪些条件?
        3、为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?
        4、加入阿托品后再加入乙酰胆碱,肠段活动受到抑制,为什么?
        5、根据实验结果,说明平滑肌的生理特性。

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