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        人类X染色质的检测

        互联网

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        一、实验目的
        1、了解X染色体失活假设及剂量补偿效应的机制。          
        2、学习人类X染色质的检查方法。
        二、实验原理
        在雌性哺乳动物和人类女性细胞的间期核中有一个深染的小体,称为X染色质(巴氏小体)。它是两个X染色体   在间期时发生异固缩而形成的,而且通常为失活状态,使得雌性个体两个X染色体所携带的两份基因的遗传效应与雄性个体一个X染色体所具有的一份基因的遗传效应基本相当,达到一种剂量补偿效应,从而维持雌雄两性 生物 基因表达的一致性。
        三、实验材料
        人类口腔黏膜细胞, 毛根鞘细胞
        四、器具及药品
            显微镜,牙签,解剖器,载玻片及盖玻片,生理盐水,盐酸,乙醇,醋酸,甲醇,醋酸洋红。
        五、实验步骤
        1、口腔黏膜细胞
        ⑴取材:漱口后用无菌牙签刮取受检者口腔颊部黏膜细胞(第一次刮取物弃去),涂在干净载玻片上。
        ⑵固定:加一滴60%的醋酸固定5min。
        ⑶染色:用吸水纸吸去多余醋酸,滴加醋酸洋红染色10分钟。
        ⑷压片:盖上盖玻片,覆以吸水纸用大拇指均匀加压,并吸去多余染料。
        ⑸镜检
        2、毛根鞘细胞
        ⑴取材及制片 :取受检者带毛根鞘的毛发一根,放在玻片上。
        ⑵软化:在根部加一滴60%醋酸溶液,静置5min ,待毛发软化后,剥下毛囊,吸去多余醋酸。
        ⑶染色与压片:加一滴石炭酸品红染色2--3    min,盖上盖玻片,用拇指压片。
        ⑷镜检。
        选择细胞核较大、染色清晰、轮廓清楚的细胞100个,统计X染色质的出现频率。
        六、作业
        1、在女性中为什么不是所有细胞均能观察到X染色质?你统计的X染色质的频率为多少?   
        2、填写表格。
        X小体数目 性别表现 性染色体的组成情况 体细胞中的染色体总数
        0 正常男人    
        0 有缺陷的女人    
        1 有缺陷的男人    
        1 正常女人    
        2 有缺陷的男人    
        2 有缺陷的女人    
        3 有缺陷的男人    
        3 有缺陷的女人    
         
         
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