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        淀粉的提取及性质实验

        互联网

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        一、实验目的
        1.掌握淀粉的提取方法,
        2.熟悉淀粉跟碘的反应和淀粉水解生成葡萄糖的反应。
        二、实验原理
        淀粉主要由直链淀粉(约占20%)和支链淀粉(约占80%)组成。直链淀粉能溶于热水,跟碘作用显现蓝色。支链淀粉不溶于水,但能在水中胀大而润湿、跟碘作用显现紫红色。酸性氯化钙溶液与磨细的含淀粉样品共煮,可使淀粉轻度水解。同时钙离子与淀粉分子上的羟基络合,这就使得淀粉分子充分地分散到溶液中,成为淀粉溶液。淀粉在稀酸作用下能发生水解,生成一系列产物,最后得到葡萄糖。
        三、 仪器 和试剂
        仪器
        植物样品粉碎机、离心机、分析天平、粗天平、量筒、三角瓶;分样筛(100目)、布氏漏斗、抽滤瓶及真空泵、离心管、小电炉;烧杯、三脚架、石棉网、滴管。
        试剂
        1 .乙醚
        2. 80%的乙醇
        3. 含有氯化汞的乙醇溶液
        4. 醋酸氯化钙溶液
        5. 30%ZnSO 4
        6. 15%K 4 Fe(CN)
        7. 95%乙醇
        8. 淀粉
        9. 碘溶液(碘酒或碘化钾的碘溶液)
        10. 稀硫酸(1:5)
        11. 碳酸钠
        12. 红色石蕊试纸
        13. 氢氧化钠溶液(5%)
        14. 硫酸铜溶液(2%)
        15. 斐林 试剂
        四、操作步骤
        (一)淀粉的提取
        1.样品准备
        (1)称取样品:将样品风干、研磨、通过100目筛,精确称取约2.5g 样品细粉(要求含淀粉约2g,请参考附注估计),置于 离心管 内。
        (2)脱脂:加乙醚数mL 到 离心管 内,用细玻棒充分搅拌,然后离心。倾出上清液并收集以备回收乙醚。重复脱脂数次,以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在会使以后淀粉溶液的过滤困难。大多数谷物样品含脂肪较少,可免去这个脱脂手续。
        (3)抑制酶活性:加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到离心管内,充分搅拌,然后离心,倾去上清液,得到残余物。
        (4)脱糖:加80%乙醇10mL 到离心管中,充分搅拌以洗涤残余物(每次都用同一玻棒),离心,倾去下清液。重复洗涤数次以去除可溶性糖分。
        2.溶提淀粉
        (1)加醋酸-氯化钙:先用醋酸氯化钙溶液约10mL 加到离心管中,搅拌后全部倾入250mL 三角瓶内,再用醋酸氯化钙溶液50mL 分数次洗涤离心管,洗涤液并入三角瓶内,搅拌玻棒也转移到三角瓶内。
        (2)煮沸溶解:先用蜡笔标记液面高度,直接置于加有石棉网的小电炉上,在4min~5min 内迅速煮沸,保持沸腾15min~17min,立即将三角瓶取下,置流水中冷却。煮沸过程中要时加搅拌,勿令烧焦;要调节温度,勿使泡沫涌出瓶外;常用玻璃将瓶侧的细粒擦下;并加水保持液面高度。
        3.沉淀杂质和定容
        (1)加沉淀剂:将三角瓶内的水解液转入100mL 容量瓶,用醋酸氯化钙溶液充分洗涤三角瓶瓶,并入容量内,加30%ZnSO 4 1mL 混合后,再加15%K 4 Fe(CN)61mL,用水稀释至接近刻度时,加95%乙醇一滴以破坏泡沫,然后稀释到刻度,充分混合,静置,以使蛋白充分沉淀。
        (2)滤清:用布氏漏斗(加一层滤纸)吸气过滤。先倾清溶液约10mL 于此滤纸上,使其完全湿润,
        让溶液流干,弃去滤液,再倾清溶液进行过滤,用干燥的容器接受此滤液,收集约50mL,即可供测定之用。
        (二)淀粉性质的测定
        1.淀粉跟碘的反应: 在一个 试管 里加入1mL 制备好的淀粉溶液,然后加如1滴碘液,淀粉溶液立即会显深蓝色。加热,颜色褪去,冷却,蓝色又出现。
        2.淀粉的水解:加 40mL 淀粉溶液于烧杯中,再加稀硫酸 1mL,煮沸5分钟,取出1mL 热溶液放在 试管 里,使其迅速冷却,滴入1滴碘溶液,出现蓝紫色。以后每隔2min 取一次试样检验,共计五次,可以看到不同大小的糊精颗粒对碘溶液显现紫红色、橙红色、橙黄色及黄色。
        3.把已经水解的淀粉溶液用碳酸钠中和硫酸,使溶液略显碱性。取出1mL,加入盛有斐林试剂的(甲和乙各3mL 的混和液) 试管 里,摇和均匀,加热煮沸,即有红色氧化亚铜沉淀生。
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