TIMP-1透射比浊检测试剂盒标准操作规程(SOP)

操作步骤
1. 样本处理
血清样本处理：将血清样本10倍稀释（取新鲜血清10μl加入0.5ml离心管内,再加入TIMP-1稀释液90μl），用移液器充分混匀，待测。
2．标准品稀释
将标准品（8.0μg/ml）4000rpm离心10秒后，10倍稀释（取10μl加入0.5ml离心管内，再加入TIMP-1稀释液90μl），用移液器充分混匀，标记为“原管”。另取4支0.5ml离心管，分别加入TIMP-1稀释液20μl，依次标记为“1/2”、“1/4”、“1/8”、“1/16”。吸取“原管”20μl至“1/2”管内，用移液器充分混匀，然后吸取20μl至“1/4”管内，充分混匀，依此方法稀释得到以下标准品稀释液，并标出浓度。另取TIMP-1稀释液20μl做为零点。（见表1）(此稀释方法适用于全自动生化仪或分光光度计，其它 仪器 按 仪器 用量作等比例的增减后再稀释)
表1
原管（A） 1/2 1/4 1/8 1/16 零点
浓度 0.8μg/ml 0.4μg/ml 0.2μg/ml 0.1μg/ml l 0.05μg/ml 0.0μg/ml
3. 基本参数：
方法：比浊法
波长：340nm
温度：37℃
标本：血清
线形：可达0.8 ug /ml, 标本超过0.8 ug /ml请用生理盐水 1:2 (1份样本: 2份生理盐水)稀释, 结果乘以稀释因子3
空白: 用R1调零后空白不大于0.1
4. 操作: (不同的仪器可将 试剂 用量作等比例的增减)
适用于半自动生化仪 适用于全自动生化仪、分光光度计
试剂 空白 标准 样品 试剂空白 标准 样品
R1试剂 560ul 560ul 560ul 37℃下反应5 min R1试剂 175ul 175ul 175ul 37℃下反应5 min
标准 10ul ---- 标准 3ul ----
血样 ---- 10ul 血样 ---- 3ul
然后加入 然后加入
R2试剂 80ul 80ul 80ul 37℃下反应5 min R2试剂 25ul 25ul 25ul 37℃下反应5 min
5．结果计算
血清样本：血清中TIMP-1浓度＝标准曲线计算所得的浓度
四、参考值范围
正常成人：0.07～0.14μg/ml（0.07~0.14mg/L）
五、检测范围及灵敏度
检测范围：0.05～0.8μg/ml 检测灵敏度：0.05μg/ml
六、贮存条件
2℃～8℃下贮存。
七、规格
R1 1×17.5ml R2 1×2.5ml
八、有效期
10个月
九、注意事项
1．样本应避免交叉污染。
2．所有的试验废弃物均应作为传染物对待。
3．根据不同仪器的要求，试剂和样本用量可按比例放大或缩小。
4．所有 移液器 及仪器需校准后使用。