TG-Ab测定操作规程SOP

一原理

利用人血清中TG抗体与其示踪物125I-TG进行特异结合反应，形成125I-TG-A复合物，然后加入免疫分离剂。复合物被沉淀下来，而游离的示踪物留在上清液中，离心弃上清液，测定沉淀物放射性，即能反映出血清中TG抗体的含量。

二标本采集与处理:样本采集后，应尽快分离血清。

三仪器设备和试剂

1适用仪器：上海核所日环光电仪器有限公司的SN-695型智能放免r测量仪。

2试剂：北京北方生物技术研究所

3测定步骤：

取3聚苯乙烯试管若干，用记号笔编号，然后用微量加样器按下表加样。加样前所有的试剂要平衡到室温并混匀（包括待测样品）。

试剂管别

阴性管

阳性管

待测管

TG抗体阴性血清

10

TG抗体混合阳性血清

10

待测样品

10

TG抗体缓冲液

200

200

200

125I-TG

100

100

100

混匀，任取三管测总T，取均值，37°C温育45分钟。

TG抗体羊抗人免疫分离剂

100

100

100

充分摇匀后，室温放置5-10分钟，3500转/分钟，吸弃上清液，测各沉淀管的放射性计数（p）。

四．结果分析

1．参考值：TG抗体B/T≥30%为阳性。

2．临床意义：可用于自身免疫疾病的诊断。

五注意事项

1收到试剂盒后，尽快存放在2-8°C冰箱中。

2阴性对照管在数据处理时非常重要，要做复管。

3分离剂加前一定要摇匀。

4加样时应避免血清样品间的交叉污染。

5加样前试剂要平衡到室温并摇匀。

六质量控制

1每批测定都使用北京北方生物技术研究所提供的制品做质量控制。

2阳性对照B/N≥35时药盒有效。