胆红素双试剂全自动分析测定

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为了解决胆红素试剂的稳定性，尽量排除基质效应对测定的影响，本科采用了双试剂方法测定。现报告如下。

 

1 材料与方法

 

1.1 试剂组成 Trace试剂。总胆红素试剂A:盐酸0.1mol/L，对氨基苯磺酶0.050mol/L，表面活性剂1%;试剂B:亚硝酸0.072mol/L;直接胆红素试剂A:盐酸0.165mol/L，对氨基苯磺酶0.029mol/L;试剂B:亚硝酸0.072mol/L。

1.2 试剂配制

1.2.1 TBil单试剂法（TB 1 ） 试剂A:试剂B=50:1，使用前混合。

1.2.2 TBil双试剂法（TB 2 ） 第一试剂R 1 为A;第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水50:1配制使用。

1.2.3 DBil单试剂法（DB 1 ） 试剂A:试剂B=100:1，使用前混合。

1.2.4 DBil双试剂（DB 2 ） 第一试剂R 1 为A:第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水100:1配制使用。

 

1.3 仪器 美国康宁560生化分析仪。

1.4 测定主要参数 见表1。

 

2 结果

 

 

2.1 方法比较 本方法与改良J-G法比较，改良J-G法（见全国临床检验操作规程第二版）为手工操作，设为Y，n=40，TB浓度2.76～456.3μmol/L，Y TB =0.995X TB +1.680，r=0.999，DB浓度0.89～402.8μmol/L，Y DB =1.011X DB +1.612，r=0.9984。

 

 

 

 

2.2 重复性试验 总胆红素批内n=10，ˉx 低 =34.3±0.46，CV%=1.34%;ˉx 高 =376.7±2.54，CV%=1.37%;直接胆红素批内n=10，ˉx 低 =11.9±0.14，CV%=1.42%，ˉx 高 =169.3±2.54，CV%=1.50%;总胆红素批间n=10（天），ˉx 低 =34.8±1.12，CV%=3.22%;ˉx 高=376.7±5.12，CV%=3.34%，直接胆红素批间n=10（天），ˉx 低 =22.5±0.79，CV%=3.51%;ˉx 高 =167.9±5.23，CV%=3.62%。

2.3 回收试验 取已知定值血清加入一定量标准品，测定其回收率，总胆红素回收率96.8%～102.7%，平均为99.5%;直接胆红素回收率为96.6%～103.2%，平均为98.8%。

 

表1 康宁560主要参数

注:ˇλ1为主波长，λ2为副波长，双试剂第一时间点为样品空白读数