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        【专题讨论】蛋白表达专题讨论

        丁香园论坛

        1404
        近来看到好多“熟悉”的问题,不断的被询问。猜测是因为丁香园不断的壮大,好多新的战友
        不断加入。但是可能大家一时并没有养成搜索的好习惯,于是许多问题不断的被翻出。其中蛋白表达问题是问的最多的,虽然关于这个问题的帖子园子里是汗牛充栋了。建议
        大家在询问之前能养成搜索的好习惯,毕竟高手们并不是时时都在的。在这里我把关于蛋白表达问题做一个总结。这里的帖子都是含有加分的回答,很有参考价值。普通的帖子没有整理。

        一、原核蛋白表达问题

        1、基础表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/218210_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6958804_1.html
        2、蛋白共表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4212701_1.html
        3、分泌表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1699666_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/209005_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/209005_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1864512_1.html
        4、信号肽与抗体:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1440659_1.html
        5、载体的选择:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/74626_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1176713_1.html
        6、包含体与抗体:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/182714_1.html
        7、膜蛋白的表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1146938_1.html
        8、克隆宿主和表达宿主:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5261089_1.html
        9、原核蛋白用于结构计算:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/948309_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=8221112&sty=1&tpg=1&age=0
        以及蛋白质结构/功能及等电点和分子量的预测
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=750664&sty=3
        10、糖基化修饰:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3373638_1.html
        11、蛋白不表达或者表达量低的原因:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1691236_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3018297_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3874055_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5025971_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1341869_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5724744_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6189131_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=8465426&sty=1&tpg=1&age=0
        12、蛋白修饰:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5674431_1.html
        13、操作问题:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1714340_1.html
        14、蛋白纯化:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4343469_1.html
        15、毒性蛋白:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5002192_1.html
        16、宿主的选择:
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6274668&sty=3&keywords=%D4%AD%BA%CB%B1%ED%B4%EF
        17、质粒的转化:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1148486_1.html
        18、提高表达量:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2714450_1.html
        19、遇到噬菌体
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8442466
        20、一个载体同时表达两个蛋白
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8410151
        21、蛋白质保存整理
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=8970007&sty=1&tpg=1&age=0
        22、关于PMSF以及其他蛋白抑制剂
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/9035107
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=9022067&sty=1&tpg=2&age=0
        二、真核表达问题

        1 真核表达系统表达蛋白诱导
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4550293&sty=3&keywords=%B1%ED%B4%EF
        2 检测不到:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1625118_1.html
        3 昆虫表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1420245_1.html
        4 毕赤表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6475920_1.html
        5 真核转染:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1765115_1.html
        6 高表达得真核表达载体:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6309480_1.html
        7 真核还是原核表达:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2483041_1.html
        8 真核表达系统的优点和缺点:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/639061_1.html
        9 真核中蛋白提纯:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3086397_1.html
        10 原核表达真核蛋白:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6544800_1.html
        11 Pichia酵母表达系统讨论专区:
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2485735&sty=1&tpg=1&age=0

        三、融合蛋白表达问题

        1 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4683631_1.html
        2关于GST:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/7011303_1.html
        提纯:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3160089_1.html
        3 GST没有挂柱:
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8255214
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1879748_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2833202_1.html
        4 GST自身的分子量:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1333039_1.html
        5 GST-pulldown:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5666566_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1317523_1.html
        6 GST与包含体:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/786932_1.html
        7 GST融合蛋白存在表达终止:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6391863_1.html

        四、蛋白检测和跑胶问题

        1.看不到条带:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/957346_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3093703_1.html
        2、检测:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5912367_1.html
        3.大小不对:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1068615_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6096950_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/623669_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1430501_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/949015_1.html
        4、样品的处理:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1411277_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1326105_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5157816_1.html

        五、精华帖和综述帖
        1、基本步骤:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1084933_1.html
        2 原核表达条件优化!
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/252999
        3 问题总结
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=792324&sty=3&keywords=%B1%ED%B4%EF
        4 NOVAGEN原核表达宝典英文版
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5212258&sty=3&keywords=%D4%AD%BA%CB%B1%ED%B4%EF
        5 影响蛋白质原核表达的三个因素
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2240079&sty=3&keywords=%D4%AD%BA%CB%B1%ED%B4%EF
        6 原核表达研究者关心的10个问题
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/1300910
        7 PET系统原核表达优化-扫盲版
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=881247&sty=3&keywords=%D4%AD%BA%CB%B1%ED%B4%EF
        8 pET原核表达手册中文版.pdf
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5634248&sty=3&keywords=%D4%AD%BA%CB%B1%ED%B4%EF
        9 问题整理
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4175881_1.html
        10 经典文献:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3473364_1.html
        11 资源:
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1312771_1.html
        12 pET手册中文版及其它蛋白表达手册
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6615117&sty=1&tpg=1&age=0
        13 amberly战友总结的原核表达的步骤和心得,新手一定要看
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8402127
        14 pet质粒图谱全收录
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3089611&sty=1&tpg=2&age=0

        六、质粒资源和表达菌种资源

        1 《丁香园质粒图谱库》
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=133&id=1149636&sty=1&tpg=1&age=0
        2 丁香园质粒库 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=133&id=864801&sty=1&tpg=1&age=0
        3 向老外索要质粒,菌种等的英文信范文 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=133&id=3341844&sty=1&tpg=1&age=0
        4 一个资源比较全的战友
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=8380431&sty=1&tpg=1&age=0
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