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        【Jounal club】生命科学领域中的成像术

        丁香园论坛

        1097
        说是成像术,其实就是拍照,从最常规的简单的EB染色,CBB染色,到荧光成像,化学发光,再到最危险的同位素成像等,原理都是差不多,即条带和背景之间信号的差异,只是过程和要求不同而已

        从灵敏程度来划分
        常规染色 ug-ng级
        荧光 ng-pg级
        化学发光 pg级
        同位素 pg-fg级

        做科研过程中,如果没有其他因素的限制,每人都希望检测灵敏度越高越好,这样真实程度也就越高,越不容易出现漏检的情况,能决定科研项目是否有必要进行下去的可能等等,所以我们开始就从同位素成像说起。

        放射性同位素的特点
        放射性同位素(radioisotope)是不稳定的,它会“变”, 这就是所谓“核衰变”。放射性同位素在进行核衰变的时候,可放射出α射线、 β射线、γ射线和电子俘获等。
        核衰变的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受元素所处状态的影响,只和时间有关。放射性同位素衰变的快慢,通常用“半衰期”来表示。半衰期(half-life)即一定数量放射性同位素原子数目减少到其初始值一半时所需要的时间。

        常用同位素的特征常数
        同位素 符号 半衰期 β射线能量(MeV)
        氢-3 3H 12.3年 0.018
        碳- 14 14C 5720年 0.156
        磷-32 32P 14.3天 1.71
        硫-35 35 S 87.1天 0.167
        碘-131 131I 8.05天 0.605

        放射性强度及其度量单位
        1Ci (居里)=3.7×1010dps    
        1uCi=每秒钟发生3万7千次衰变
        射线与物质的相互作用
        1兆电子伏在空气中射程 阻挡物 吸收效果
        α射线 1.0厘米 一张普通纸 完全
        β射线 10米 有机玻璃板 产生轫致辐射
        γ射线 1千米 铅 不能被完全吸收
        使底片感光;
        使一些物质产生荧光;
        可穿透一定厚度的物质,可能使一些物质的分子发生电离;
        当射线辐照到人、动物和植物体时,会使生物体发生生理变化
        同位素的优点
        1、灵敏度高
        ---放射性示踪法可测到10-14-10-18克水平、Southern blot可达pg以内
        2、测量方法简便易行
        ---X底片曝光、扫磷屏
        3、能准确地定量、定位
        ---射线与物质含量呈线性关系
        同位素示踪法基本原理:性质相同,可被跟踪
        同位素示踪法特点:灵敏、简便、定量、定位
        同位素示踪法在分子生物学中的应用:杂交、酶反应、蛋白DNA结合实验等。
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