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        【求助】全血标本提RNA保存方法

        丁香园论坛

        5963
        我现在搜集全血标本,想要提取RNA,但是由于临床标本搜集较难,所以想要先保存然后一起提。请教各位高手应该怎么保存血标本呢?
        如果标本放在4°后多长时间就必须放在零下八十保存。
        如果我先前用triton处理过细胞,是不是就提不出RNA了?
        谢谢各位指导。
        前一段时间提过全血,是用tirzol提的,但是效果不是很好,
        一种方法是采血后直接-80冻存,提的时候加trizol
        另外一种是用淋巴分离液分离后提的,效果还不错,
        谢谢,非常有用
        最好是用淋巴分离液分离后保留的有核细胞加入trizol再放入-80度保存。
        应楼主要求,我再详细说一下,我们实验室现在抽提血液RNA是专门用的ABI的抽提试剂盒,采血时候就用ABI专用的真空管对人血样进行抽血,然后充分混匀,冻存于-20度。后续抽提直接是获得纯化好的mRNA,而且得率高。而且比常规方法来说可能相对减少了对血液的应激过程造成的一些mRNA表达的改变。
        以前用的是trizol的方法,临床上采集的抗凝血样我们不建议直接放于-80度保存,因为后续拿出来进行抽提时候已经造成细胞溶血发生。抗凝血可以放于4度2-5天,我们建议最好是尽快用淋巴分离液分离,充分去除红细胞,保留有核细胞,然后加入trizol放入-80度保存。而且临床血样最好采集两管,每管3ml,因为血样样品的RNA抽提万一有样品不行,还有备份。
        祝楼主实验顺利!
        非常感谢!
        建议qiangen 的paxgene提取试剂盒,网上查说明书吧,我们实验室就用这个,效果很好

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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