【求助】有关U0126
丁香园论坛
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园子里的各位战友及版主：
本人在做抑制ＭＡＰＫ通道，对甲状腺癌细胞分化的影响。使用的抑制剂是U0126，按照文献报道，浓度是10um。但在加药后24h,可见细胞大量的漂浮（已排除污染），而国外文献报道，U0126要持续作用5天，且每天更换新液。
请问，U0126对细胞有无毒性？为何我的细胞在作用24h后就见大量死亡？
各位战友及版主能帮我分析分析吗？
本人在做抑制ＭＡＰＫ通道，对甲状腺癌细胞分化的影响。使用的抑制剂是U0126，按照文献报道，浓度是10um。但在加药后24h,可见细胞大量的漂浮（已排除污染），而国外文献报道，U0126要持续作用5天，且每天更换新液。
请问，U0126对细胞有无毒性？为何我的细胞在作用24h后就见大量死亡？
各位战友及版主能帮我分析分析吗？
当然有毒，
要做一剂量效应实验， dose-dependent effect, 逐渐增加剂量，观察并检测细胞的生长，以及MAPK 通路的活化情况，选择一合适剂量，在抑制MAPK同时又不太影响细胞生长。
另外，如能查到相关文献中U0126对你的甲状腺细胞的作用浓度，多查几篇，尤其是高水平文章中的剂量，那就是你的好运，可以作为参考。这也是你动手开始做实验前的准备工作，你导师应跟你讲的。
要做一剂量效应实验， dose-dependent effect, 逐渐增加剂量，观察并检测细胞的生长，以及MAPK 通路的活化情况，选择一合适剂量，在抑制MAPK同时又不太影响细胞生长。
另外，如能查到相关文献中U0126对你的甲状腺细胞的作用浓度，多查几篇，尤其是高水平文章中的剂量，那就是你的好运，可以作为参考。这也是你动手开始做实验前的准备工作，你导师应跟你讲的。
LS正解，另外不同的细胞系使用的浓度未必相同，另外加药后的作用时间未必要用5天，文献人家用5天可能有别的目的，所以如LS所言，要多看几篇相关文献，然后再重新精心设计实验，在上述基本问题搞清之前，最好不要硬上实验，那样，很可能是费时、费钱。
谢谢 你们的帮助！
我会按照你们的指引 前进的！！！
我会按照你们的指引 前进的！！！
你好，我也使用u0126，出现这样的问题，想请教一下各位。
我买的u0126是cst公司的粉剂，一种抑制剂，用DMSO配置的，使用后发现这样情况：
1.有的组细胞出现黑色细长型结晶，会不会是我没有用滤膜过滤，？
2.细胞碎裂坏死，是dmso对细胞作用还是u0126本身的问题（我在dmso的低浓度组，在安全范围内（小于0.1%）也出现这样问题）
我买的u0126是cst公司的粉剂，一种抑制剂，用DMSO配置的，使用后发现这样情况：
1.有的组细胞出现黑色细长型结晶，会不会是我没有用滤膜过滤，？
2.细胞碎裂坏死，是dmso对细胞作用还是u0126本身的问题（我在dmso的低浓度组，在安全范围内（小于0.1%）也出现这样问题）
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