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        【求助】有关U0126

        丁香园论坛

        1507
        园子里的各位战友及版主:
        本人在做抑制MAPK通道,对甲状腺癌细胞分化的影响。使用的抑制剂是U0126,按照文献报道,浓度是10um。但在加药后24h,可见细胞大量的漂浮(已排除污染),而国外文献报道,U0126要持续作用5天,且每天更换新液。
        请问,U0126对细胞有无毒性?为何我的细胞在作用24h后就见大量死亡?
        各位战友及版主能帮我分析分析吗?
        当然有毒,

        要做一剂量效应实验, dose-dependent effect, 逐渐增加剂量,观察并检测细胞的生长,以及MAPK 通路的活化情况,选择一合适剂量,在抑制MAPK同时又不太影响细胞生长。

        另外,如能查到相关文献中U0126对你的甲状腺细胞的作用浓度,多查几篇,尤其是高水平文章中的剂量,那就是你的好运,可以作为参考。这也是你动手开始做实验前的准备工作,你导师应跟你讲的。
        LS正解,另外不同的细胞系使用的浓度未必相同,另外加药后的作用时间未必要用5天,文献人家用5天可能有别的目的,所以如LS所言,要多看几篇相关文献,然后再重新精心设计实验,在上述基本问题搞清之前,最好不要硬上实验,那样,很可能是费时、费钱。
        谢谢 你们的帮助!
        我会按照你们的指引 前进的!!!
        你好,我也使用u0126,出现这样的问题,想请教一下各位。

        我买的u0126是cst公司的粉剂,一种抑制剂,用DMSO配置的,使用后发现这样情况:
        1.有的组细胞出现黑色细长型结晶,会不会是我没有用滤膜过滤,?
        2.细胞碎裂坏死,是dmso对细胞作用还是u0126本身的问题(我在dmso的低浓度组,在安全范围内(小于0.1%)也出现这样问题)

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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