【求助】关于培养中细胞的基质金属蛋白酶(MMPs)的检测问题
丁香园论坛
3200
逼人行将做一个关于基质金属蛋白酶(MMPs)的实验,阅读了一些文献,发现MMPs的功能较多,其中一个重要的作用就是在恶性肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。此外MMPs的多水平调节也相当复杂,但是,目前已有的研究表明激素、生长因子、癌基因和细胞周期素均可影响MMPs的转录,其中IL-1、IL-12、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)均能上调MMPs的表达,而转化生长因子β(TGF-β)、类固醇激素和视黄醛则下调MMPs的表达。我现在做的实验大致是这样的,就是在培养的细胞中,加入生长因子,诱导MMPs的表达,我弱弱的问:在不知道细胞表达MMPs的具体类型时,我怎么去检测MMPs的表达水平,我想应该可以用western blotting检测MMPs的表达,但是一抗怎么确定,还有我可以用PCR检测转录水平的MMPs表达,但是不知道怎么操作,实验新手,请园里高手指点迷津!谢过先!
gelatin zymography: detect the activity of MMPs
谢谢chuckdouble,查了一些文献,还有丁香园里其他战友的经验,似乎单纯用明胶酶谱法只能检测部分MMPs类型,比如MMP2,MMP9吗?不知道明胶酶谱法还能不能检测培养中细胞所分泌的全部类型MMPs。
topicare wrote:
细胞所分泌的全部类型MMPs。
NSM: no such method
chuckdouble wrote:
NSM: no such method
那么明胶酶谱法能检测基质金属蛋白酶——8的活性或者半胱氨酸组织蛋白酶的活性吗
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming