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        正相硅胶反相洗脱色谱仪固定相和流动相简介

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        正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理,不需反相高效液相色谱仪中复杂的处理手段,碱性药物保留时间大大缩短,拖尾改善,峰形对称,能同时分析极性范围很大的一类药物。

        一、固定相:

        采用未改性的原形硅胶为固定相。

        以普通硅胶作固定相简单方便,不需 HPLC 众多的键合相就能达到满意的分离效果。在高 PH 值(PH>8)的水-有机溶剂混合液中,固定相稳定,硅胶不溶于高浓度极性有机溶剂和高pH值的流动相中,可使用数月不影响柱效。

        二、流动相:

        以水性溶液作流动相。

        常用的流动相为甲醇-水相缓冲液和乙腈-水相缓冲液。合适的缓冲剂有三乙胺、甲酸铵-氨水、高氯酸铵-氨水、醋酸铵-氨水和磷酸氢二铵-磷酸等。

        由于正相硅胶反相洗脱色谱仪利用被测组分与硅醇基相互作用,因此不需要加硅醇基掩蔽剂等特殊添加剂,仅用一两种洗脱液就能对大范围内的碱性药物进行分离分析。

        由于流动相中含的三乙胺会吸附在硅醇基上,很难用甲醇清洗,所以每次做完样品,先用 0.1% 冰乙酸冲洗 15~20 min,洗去三乙胺,然后再用甲醇冲洗 20min。经这样处理后,柱压可长期保持不变,达到保护色谱柱的目的。
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