• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        免疫组化双染实验操作步骤

        互联网

        5511
        相关专题

        第一抗体的染色:

        1、 将切片浸在3%H2O2甲醇溶液(新鲜配制)中10分钟,PBS 冲洗2分钟×3次

        2、 加100ul(2滴)血清封闭溶液(试剂1)到切片上,室温孵育10分钟,倒掉(不能冲洗)

        3、 加入一抗(按照说明推荐浓度和孵育条件)

        4、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS),冲洗2分钟×3次

        5、 加入100ul(2滴)生物素化的二抗(试剂2),室温孵育10分钟

        6、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS)冲洗2分钟×3次

        7、 加入100ul(2滴)链霉亲和素-AP(试剂3)的二抗,室温孵育10分钟

        8、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS)冲洗2分钟×3次

        9、 准备底物溶液:将1滴试剂4A和4B加入到1ml去离子水 中,充分混匀;再加入1滴试剂4C,充分混匀

        10、 加100ul(2滴)配好的AP底物溶液,室温孵育(镜下检测孵育时间)

        11、 使用含有0.05%吐温20的去离子水冲洗终止反应

        第二抗体的染色:

        12、 加100ul(2滴)双染增强剂(试剂7),孵育

        13、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS),冲洗2分钟×3次

        14、 加100ul(2滴)血清封闭溶液(试剂1)到切片上,室温孵育10分钟,倒掉(不能冲洗)

        15、 加入稀释好的一抗(按照说明推荐浓度和孵育条件)

        16、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS),冲洗2分钟×3次

        17、 加入100ul(2滴)生物素化的二抗(试剂2),室温孵育10分钟

        18、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS)冲洗2分钟×3次

        19、 加入100ul(2滴)链霉亲和素-HRP(试剂5)的二抗,室温孵育10分钟

        20、 使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS)冲洗2分钟×3次

        21、 准备底物溶液:将1滴试剂6A和6B加入到1ml去离子水中,充分混匀;再加入1滴试剂6C,充分混匀:

        22、 加100ul(2滴)配好的HRP底物溶液,室温孵育(镜下检测孵育时间)

        23、 使用含有0.05%吐温20的去离子水冲洗终止反应

        24、 使用复染试剂染色(根据需要选择)

        25、 封片剂(试剂8)封片,显微镜观察结果 免疫学 免疫组织化学

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序