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        琼脂糖凝胶电泳技术

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        相关专题

        1、实验目的:
        学习与掌握DNA电泳的技术方法,利用琼脂 糖凝胶电
        泳检测DNA纯度、含量以及分子 量,及分离不同大小
        DNA片段。
        2、实验原理:
        电泳概念及种类~K~Hstrong~M~Kbr_~H~M~2~1~0~0• 电泳: 是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象

        电泳基本原理
        迁移率(或泳动度)是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度,可用下列公式计算:
        U =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/Vt
        U为迁移率(cm2·V-1·min-1);υ为颗粒泳动速度(cm·s-1);E 为电场强度( V·cm-1);d 为颗粒泳动的距离(cm);l为滤纸有效长度(cm);V为实际电压(V);t为通电时间(s或min)。通过测量d, l, V, t, 即可计算出被分离物质的迁移率。

        1迁移率单位= 10-5 cm2·V-1·min-1在确定的条件下,某物质的迁移率为常数,是该物质的化学特征常数

        颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则泳动速度慢。

        迁移率还与分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,迁移率与颗表面电荷成正比,与介质粘度及颗粒半径成反比。

        影响琼脂糖电泳迁移的主要因素~K~Hstrong~M~Kbr_~H~M~2~1~0~0电场强度
        溶液的pH值
        溶液的离子强度
        电渗现象
        温度的影响
        支持物的影响

        电泳的分类
        按分离原理分类:
        1.区带电泳
        2.移界电泳
        3.等速电泳
        4.聚焦电泳
        按有无固体支持物分类

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