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        细菌污染细胞是否会影响质粒的转染

        互联网

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        独1无2:我用带GFP的质粒转染到Ca Ski 细胞可见GFP的表达,但是一天后用同样的质粒转染到BJ 细胞23小时却没有看到任何荧光,在细胞周围看见疑似细菌污染,请问细菌污染会影响质粒的转染吗?

        丁香园网友爱吃葡萄的猫认为:

        我觉得应该会,因为我觉得转染对细胞也是一种损伤,所以要求转染前细胞要处于对数生长期,也就是最好的状态,但是细菌污染就会影象细胞的生长状态。但是我觉得你这次没有成功也有可能还要考虑以下2方面原因:

        1.质粒和脂质体的比例是不是不适合,因为以前看到有些资料说每种细胞的比例会不一样,脂质体的说明书上也有说要摸一下比例。

        2.还有就是有时候换液换太早的话也会降低转染效率,如果转染后6小时没有见到大量细胞死亡或者明显的形态改变,可以适当延长换液时间,我曾经12小时以后换液,细胞状态仍然很好,而且转染效率也很高。其实换液就是去除脂质体对细胞的毒性作用,如果细胞耐受能力好,完全可以延长时间换液。

        以上是个人的看法,期待高手指点!

        丁香园网友jiankekill认为:

        污染肯定会影响细胞转染的。

        首先,有的细胞污染会引起细胞破裂,细胞破裂了肯定转染就没有办法进行下去了。

        其次,细胞污染以后,细菌大量繁殖,培养基营养都被细菌消耗,细胞没有可以生长的营养,无法维持生长,更无法分裂,所以被污染的细胞往往生长非常缓慢,所以转染也会跟着受影响。

        总结以上两点,我考虑污染了的细胞,是非常不适合转染的。

        提出一点想法,供参考!

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