快速方便的病毒RNA/DNA提取系统

病毒核酸提取试剂盒提供一种快速方便的病毒RNA/DNA提取系统，无需酚仿抽提，可迅速从血清、血浆、尿液、脑脊液或其他无细胞体液、病毒培养上清液和鼻咽拭子等样本中进行病毒RNA/DNA纯化，纯化后的核酸可用于病毒基因分型研究、病毒流行病学研究和传染病研究等。

实验操作：

1、试剂耗材的准备：

（1） 试剂：无水乙醇

（2） RNase 去除的耗材：用0.01% （v/v） DEPC 溶液完全浸泡过夜，高压灭菌后烘干。

2、实验步骤：

1． 取200μl 样品（如血清、病毒培养液、鼻咽拭子等）于1.5ml 离心管中，加入400μl Lysis Buffer，振荡混匀，室温孵育10分钟。

2． 加入450μl Binding Buffer（已加无水乙醇），振荡混匀。

3． 将600μl混合液转移到吸附柱中，12,000 rpm 离心1分钟。弃掉废液，将吸附柱放入同一收集管中。

4． 将剩余的混合液转移到吸附柱中，12,000 rpm 离心1分钟。将吸附柱放入新的收集管中。

5． 加入400μl WB1，12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液，将吸附柱放入同一收集管中。

6． 加入600μl WB2（已加无水乙醇），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液，将吸附柱放入同一收集管中。

7． 12,000 rpm 空柱离心3分钟。

8． 将吸附柱放入一个干净的1.5ml 离心管中，在吸附柱的膜中央小心加入50μl Elution Buffer，室温静置2-5 分钟。12,000 rpm 离心1分钟收获纯化的核酸溶液，-20℃保存备用。

该产品的特点：

♦ 30分钟内快速纯化高品质DNA或者RNA

♦ 无需酚/氯仿抽提，无需乙醇沉淀

♦ 重复性强，产量高，洗脱体积50-200 µl

♦ 纯化灵敏度高，含有carrier RNA组份，>80%回收率

♦ 完全去除污染物和抑制剂，适用于各种下游应用\

左图为肠道病毒EV71型提取核酸RNA后进行荧光定量PCR的检测结果，样本为肠道病毒EV71型灭活病毒培养液，病毒含量分别为5×10⁶copies/ml、5×10⁵copies/ml、5×10⁴copies/ml、5×10³copies/ml、5×10²copies/ml，采用硕世生物病毒核酸提取试剂盒进行病毒核酸RNA提取并进行荧光定量PCR分析。实验结果显示，使用硕世生物病毒核酸提取试剂盒纯化病毒RNA限度可达5×10²copies/ml，可以稳定扩增5×10²copies/ml病毒RNA。