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        小鼠能量代谢(energy metabolism)的测定

        互联网

        15100

        【目的和原理】

        了解小动物测定能量代谢(energy metabolism)的方法。其原理是通过测量机体消耗一定量氧气所需要的时间,测出每小时的氧耗量(oxygen consumption),从而计算出能量代谢。

        【实验材料】

        小鼠;玻璃筒(或磨口瓶)、橡皮塞、 温度计 、10ml注射器、钠石灰(可用纱布包上)、水检压计、氧气囊、螺旋夹、弹簧夹;液体石腊。

        【实验步骤】

        1.实验装置,图中玻璃筒可用磨口瓶代替,注射器内涂少量液体石蜡,反复抽送几次,使液体石蜡在注射器内形成均匀的薄层,以防止液体逸出。

        2.检查管道系统有无漏气。方法是夹闭管夹使管道系统密闭,然后用注射器推进一定量气体,使水检压计接触大气侧的水柱液面上升,停置5~10分钟。如水柱高度不变,则表示该管道系统无漏气。

        3.将小鼠放入玻璃瓶内,头朝钠石灰侧,加塞密封。

        4.打开弹簧夹,然后松开氧气囊的螺旋夹,缓慢地送进氧气(不宜过快)。将注射器抽取氧气至略超出10ml的刻度处。

        5.旋紧氧气囊上的螺旋夹,不让空气进入。将注射器筒芯推到刻度10ml处,夹闭弹簧夹,同时记录时间和玻璃筒内的温度。

        6.将注射器筒芯向前推进2~3ml则水检压计与大气相通侧水柱液面上升。小鼠代谢不断消耗氧气,而产生的 CO 2 被钠石灰吸收,故玻璃筒内气体逐渐减少,水柱液面因而回降。待液面降至两液面高度相等时,再将注射器筒芯向前推进2~3ml,如此反复,直至共推进10ml为止。

        待水检压计两侧的水柱液面达到同一水平时,立即记下时间。从夹闭弹簧夹开始至此时的时间,即为消耗10mlO 2 所需的时间。据此可得每小时O 2 耗量。

        7.计算 首先根据公式V 0 =Vt×fSTPD将O 2 耗量换算为标准状态下的气体容量,假定小鼠呼吸商为0.82,氧热价为4.825千卡,则能量代谢=4.825×O 2 耗量千卡/小时/体表面积(米 2 ),小鼠的体表面积根据雷伯纳(Rupner)公式或查表21得出。

        表21 小鼠体表面积与体重的关系
        体 重 体表面积(m 2 )(Rupner公式)
        (kg)
        0.021 0.006948
        0.022 0.007167
        0.023 0.007386
        0.024 0.007596
        0.025 0.007806
        0.026 0.008016
        0.027 0.008217
        0.028 0.008400
        0.029 0.008582

        0.030 0.008856

        【注意事项】

        1.要尽量减少对动物的刺激,使动物保持安静。如不安静可将动物预先轻度麻醉,可用戊巴比妥钠按0.04mg/g体重剂量作腹腔注射。

        2.不要用手握玻璃筒或注射器,以免使管道系统的温度升高。

        3.选用新鲜干燥钠石灰。

        4.水检压计中的水染成红色,以便于观察。

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