时间分辨免疫荧光（IFA）

目的 　研制人C肽（C-peptide）时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）试剂盒。方法 　采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒，对试剂盒的各项指标进行评价。结果 　试剂盒的可测范围为0.5～22ng/ml，灵敏度为0.045ng/ml，批内、批间的变异系数（CV）分别为4.1%～6.7%和5.4%～6.8%；与胰岛素无交叉反应，与胰岛素原的交叉反应率为9.0%。30份血样用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测，其相关系数为 0.992。结论 　试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。

目的　利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立人血清促卵泡激素（hFSH）的检测试剂。方法　采用双抗体技术建立hFSH- TRFIA的检测试剂，对试剂的各项指标进行评价。结果 hFSH- TRFIA检测试剂的测量范围为1～256U/L，灵敏度为0.08U/L，分析内和分析间的精密度分别为26%～42%，6.1%～8.6%，与人黄体生成素（hLH）、人促甲状腺素（hTSH） 和人绒毛膜促性腺激素（hCG）的交叉率分别为0.14%，0.08%和0.01%。30份异常血样用该试剂同类试剂同时检测，其相关系数为0.993。结论　试剂各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品。

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)技术建立人生长激素（human growth hormone, hGH）的快速检测方法并研制其诊断试剂。方法 采用双抗体夹心法（一株抗GH的单抗用于包被微孔板，另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记）建立hCG-TRFIA。结果hCG-TRFIA的线性测量范围为0.1×10 ～100×10 U/L 0.036×10 U/L 5.3%～8.6% 和7.6%～12.8%，与促甲状腺激（TSH）、卵泡生成素（FSH）、人胎盘催乳素（LH）和黄体生成素（HPL）均无交叉反应，将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数（r）为0.957。 结论hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法 用于临床GH水平的测定。

对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原（CEA）试剂盒进行临床应用研究，为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法　收集血清标本326份，用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定，并以化学发光法（Roche）为对照方法，WALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒（AutoDELFATM hCEA）作为复核试验，获取相关目标实验数据，并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果　以化学发光法为对照试验，其阳性符合率为95.83%，阴性符合率为98.73%，检验无显著性差异；自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致，相关系数达0.93，相关性好。结论　试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿，能满足临床应用的需要。

时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物，标记蛋白质、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞，待反应体系（如: 抗原抗体免疫反应、生物素亲合反应、核酸探针杂交反应、靶细胞与效应细胞的杀伤反应等）发生后，用时间分辨荧光技术测定反应体系中分析物的浓度，达到定量分析的目的。它之所以能够继放射性同位素标记、酶标记、化学发光、电化学发光后成为一种更新、更灵敏的检测方法，主要取决于它所用标记物三价稀土离子螯合物独一无二的物理及化学性质。主要报导了对使用的长寿命荧光团Eu3+螯合物的光谱研究结果，时间分辨技术及荧光增强技术的原理。实验表明: 选择336～337nm的激发波长，有利于Eu3+的配位二酮体的激发及能量转移。

目的: 制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4,7-二 氯磺酸基苯基-1,10-菲咯啉-2,9-二羧酸（BCPDA）。方法: 合成物的结构由熔点、元素分析、红外光谱和核磁共振谱确证；采用标记曲线法测定标记物中蛋白质的含量；应用荧光分光光度计测定Eu3+-BCPDA的荧光强度; 采用放免法测定标记蛋白质的活性。结果: BCPDA与Eu3+结合后可测量到的最低浓度为1×10-15Mmol•L-1 标记蛋白质的相对生物活性高于80%。结论: 成功地制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂，并建立 Eu3+-BCPDA-蛋白质标记物中蛋白质浓度的测定方法。

时间分辨荧光免疫分析是一种新型的体外超微量分析技术。它具有高精度、自动化、大样本快速测定（1～2就能出结果）等技术优点。其在灵敏度和准确性方面明显高于ELISA，特异性又明显高于聚合酶链反应（PCR） 。因而，其应用已不再局限于临床诊断，已渗透入生物学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及应用做一简要综述。

本文对荧光偏振免疫分析技术的研究进展作了详细的评述。介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理和研究热点，评述了它在临床检验、环境与食品监测和农药残留量分析等领域中的应用，对荧光偏振免疫分析方法的优缺点作了总结，引文献45篇。

时间分辨荧光免疫法与化学发光酶免疫法测定人血浆茶碱浓度，均准确、灵敏、稳定，且均具特异性，但从经济学角度考虑，化学发光酶免疫法更适用于茶碱的临床血药尝试监测。

本文介绍了时间分辨荧光免疫分析法的检测原理、检测方法，分析了时间分辨荧光免疫分析仪的结构并介绍了其在临床检测方面的应用。

目的：利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立人血清 CB-MB的快速定量检测方法- 方法：采用双抗体夹心法（1株抗CB-MB的单抗用于包被微孔板，另1株抗CB-MB的单抗用于铕标记）建立CB-MB TRFIA。结果：CB-MB TRFIA的线性测量范围为5~400µg，分析的灵敏度为0.24µg/L，批内和批间的变异系数分别为4.9%~7.3%和8.4%~11.7%，与CK-MM和CK-BB均无交叉反应。将82份血清标本用本法与化学发光试剂盒同时检测，其相关系数为0.895。结论：CB-MB TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求，可用于临床血清CB-MB水平的测定。

目的 研制成镧系元素发光时间分辨荧光分析中的关键试剂。方法 用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶标记链霉亲和素和用化学合成法研制成 5 - 氟水杨酸磷酸酯等关键试剂。结果 HRP 标记 SA 总蛋白回收率为29.8% ,纯度为 97% 。ALP 标记 SA 的总蛋白回收率为 56% ,纯度为98% ,分子量为159kD,其中 ALP 分子量为 94kD, 生物活性良好。5 - 氟水杨酸磷酸酯, 测得熔点为 157℃ ～159℃、纯度为 99.43% ～100% 、红外吸收光谱、紫外吸收光谱及核磁共振谱等特性鉴定与文献记载一致。结论 研制成的各种关键试剂质量良好,已成功地应用于科研中。

时间分辨荧光免疫分析技术是一种建立在免疫吸附分离和时间分辨荧光技术基础上的超灵敏检测方法。这项技术发展迅速，已广泛地应用于诸如临床检测、食品安全快速检测等领域。本文旨在全面地介绍时间分辨免疫荧光分析技术的原理和优点，并对这项技术的研究进展和在食品安全领域的应用作一综述。

目的：比较TRFIA与ELISA两种方法对HBVM检测的结果，并对其进行分析，了解TRFIA法测定HBVM的准确性及可行性。方法：对102例就诊患者的血清标本同时采用TRFIA和ELISA两种方法检测乙肝标志物。结果：两种检测方法对HBVM的结果比较差异无显著性(P>0．05)。但就乙肝患者检测的医学模式来讲，以TRFIA法的结果为标准，与ELISA法比较有所差别，其中HBsAgHBcAb阳性模式者有显著差异(P<0．05)，其他医学模式均无差异。结论：TRFIA对HBVM的检出率高于ELISA，能够弥补ELISA法因灵敏度相对较低所引起的假阴性，TRFIA作为一种高灵敏度的方法，可为临床诊断、疗效观察、及乙肝疫苗的接种提供依据。

信号放大时间分辨荧光分析技术是一种新型的超微量的标记分析技术。它是以生物信号放大为基础，以镧系元素螯合物为标记物，以时间分辨和波长分辨为测量方法，充分利用了酶标记分析和PCR扩增等分析技术优点的技术。它的独特优点是非同位素和超灵敏度。本综述介绍了TRFA的特点以及酶放大、二次酶放大、铕纳米颗粒、滚动循环放大、免疫PCR和荧光淬灭分析等信号放大时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用。信号放大时间分辨荧光分析技术在生物分析中极其广泛的应用，显示出具有很好的发展前景。

荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，FPIA)是一种定量免疫分析技术，其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后，吸收光能跃入激发态，随后回复至基态，并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关，与其(受激发时)转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质，常用于药物、激素 ...

本文介绍了均相荧光免疫测定的原理及方法。

本文系统介绍了 时间分辨荧光分析法（TRFIA）的优点、标记物、检测原理及参数。

本文对近年来发展起来的时间分辨免疫荧光技术作了一个扼要的介绍。内容包括该技术的原理、测定方法以及应用情况，并对该技术今后的发展作了展望。