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时间分辨免疫荧光(IFA)

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【讨论】时间分辨荧光免疫技术

大伙都来讨论下稀土元素在时间分辨荧光免疫技术的应用原理我先说说时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发 ...

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【交流】时间分辨荧光免疫分析技术

时间分辨荧光免疫分析技术前景看好  时间分辨荧光免疫分析技术的进展,将会带动相关新产业结构的企业形成。国内外高度重视其科研与应用。我国科学家领先一步的这项科研成果,将进一步促进该技术产品全面国产化,进一步提高我国临床诊断及研究的整体水平。  15年的艰苦攻关,终于取得丰硕成果。2月20日,我国多位专家联合攻关的课题“镧系元素时间分辨荧光分析技术及仪器的配套研究”,荣获2003年度国家科技进步二等奖。这个课题是由第二军医大 ...

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【整理】FISH(荧光原位杂交)技术全攻略

荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示核酸序列位置的方法。该技术问世与70年代中期左右,其曾多于与染色体异常的研究,近年来随着FISH探针种类的不断增多,使得该技术逐步应用于各种领域。该技术具有快速,安全,灵敏度高以及探针可长期保存等特点,目前已广泛应用于细胞遗传学,肿瘤生物学,基因定位,基因作图, ...

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间接免疫荧光法判读自动化进展

间接免疫荧光法是自身抗体等免疫学指标检测的重要手段,是抗核抗体(ANA)检测的“金标准”。为了更好的发挥“金标准”的作用,为临床诊断提供有力的支持,保证间接免疫荧光法检测的准确性和时效性,就显得尤为重要。 为保证检测结果的准确性,荧光结果的判读是至关重要的一个环节。荧光检测结果的获取,需要通过人工观察荧光显微镜。目前常见的荧光核 ...

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比较间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测

比较间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测血清中抗ds-DNA抗体在系统红斑狼疮中的诊断价值 俞颖 范永升 温成平 王新苍 抗双链DNA (double-st randed DNA ,ds-DNA) 抗体主要见于系统性红斑狼疮( systemic lup userythe-matosus ,SLE) ,对诊断SLE有 ...

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荧光标记果蝇心脏组织

本实验主要包括果蝇幼虫和半完整成年果蝇心脏的解剖,装片,以及固定和荧光标记特定的心肌组分。该实验可以用来详细分析心脏的结构特征。

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荧光激活分选仪(FACS)分选植物原生质体

视频主要示范如何从植物组织中分离表达荧光标记蛋白的特定类型细胞,然后利用荧光激活分选术收集足量的原料用于RNA提取、cDNA合成/扩增以及微阵列分析。

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应用高级荧光显微镜观察单分子复合物

采用先进的光学显微镜和图像分析工具,我们可以监测单个活细菌内某特定单分子蛋白质的活动情况,我们也可以用机能生物学机器观察分子复合物的动力学特征。

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荧光素酶免疫沉淀系统描述抗体应答反应

视频讲述的定量荧光素酶免疫沉淀系统,主要是用来描绘病人血清抗体对自身抗原和病原体感染相关抗原的应答反应。

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影响免疫印迹的背景问题

本底高和非特异性条带可能是由于抗体制剂中存在与印迹膜上其它蛋白质结合的抗体(非特异性抗体)。对于免疫印迹来说,理想的抗体应是仅能特异性识别待测抗原,但实情并非如此,印迹膜上总会出现一些额外的条带。这些条带的来源一般有两种:一种是由于制剂中存在的非特异性抗体产生的背景条带,另一种则是由于特异性抗体与含有与待测抗原类似表位的多肽发生的交叉反应。 动物抗血清中含有 ...

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促甲状腺激素标记免疫分析技术检测方法的研究进展

垂体前叶分泌的促甲状腺激素(Thyroid Stimulating Hormone TSH)的相对分子质量约为25000–28000,与腺垂体分泌的卵泡刺激激素(Follicle Stimulating Hormone FSH)、黄体生成素(Luteinizing Hormone LH)以及胎盘分泌的人绒毛膜促性腺激素(human Chorionic Gonadotropin hCG) ...

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时间分辨荧光免疫定量分析简介

时间分辨荧光免疫分析(Timeresolved FluoroimmunoassayTRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。 解离增强镧系元素荧光免疫分析 解离增强镧系元素荧光免疫分析(Dissociation Enhance ...

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CA50时间分辨荧光分析法的方法学评估

目的 评估所建立的CA50时间分辨免疫分析法(CA50 TRFIA)的技术指标及应用价值。方法 建立CA50时间分辨荧光免疫分析法,分析其曲线的性质参数,研究该方法的特异性、精密度和回收率、灵敏度、稳定性、平等性,以及和免疫放射分析方法(IRMA)法间的相关性。结果 10批标准曲线拟合相关系数均值R为0.9978±0.0022,最大结合比Bm/Bo为127.26±9.85,批内和批间变异分别为2.6%和3.5%,平均回收率为108.61%,灵敏度为1.08U/mL,测定结果与进口CA50 IRMA药盒测定值比较相关系数为0.94,其他肿瘤标志物无明显干扰,同批试剂连续6个月应用分析结果稳定。结论 CA50 TRFIA本底低于干扰小,特异性强、稳定性好,灵敏度高,无放射性污染,是一种非放射性的标记免疫新访求,值得推广应用。

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时间分辨荧光免疫分析——原理与实践

本文探讨了时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的背景、不同模式优缺点以及新配基设计原则,并讨论了TRFIA的未来研究方向。

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时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

研制CA125时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价。结果 该试剂盒的工作范围为10~600U/mL,分析灵敏度为1.07U/mL,批内、批间的精密度分别为4.5%~8.1%,V6.9%~11.5%。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~37U/mL。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测其相关系数为0.939。结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。

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β2微球蛋白时间分辨荧光免疫检测法的建立及初步应用

β2为了建立β2微球蛋白(β2-m)时间分辨荧光免疫分析。以羊抗兔抗体包被板条,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺五乙酸络合Eu3+及标记β2-m,发光增强系统为以β二酮体为主的增强液。采用竞争法建立β2-m时间分辨荧光免疫分析,数据采用双对数法函数和四参数logistic函数数据处理程序处理。结果此法的批内和批间CV分别为2.25%和2.91%平均回收率为101.06%,灵敏度为0.06%mg/L,可测范围为0.06~12mg/L。本方法与白蛋白、肌红蛋白均无交叉反应。溶血对本法无临床初步应用所检测结果与放免法吻合。试验结果表明,β2-m-TRFIA法的敏感度、特异性、准确度等指标符合临床诊断要求。

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丙型肝炎病毒抗体时间分辨免疫荧光分析及应用评价

为建立抗-HCV的时间分辨免疫荧光分析法IFMA,以HCV抗原包被微孔板,样品中的抗-HCV、Eu3+标记羊抗人IgG形成夹心,以β-二酮体为增强液,数据采用Log-Logit函数和四参数Logistc函数数据处理程序处理。结果表明,方法的批内和批间CV分别为3.64%和4.39%,平均回收率105.58%,可测范围为1.01—17.34NCU/mL,灵敏度为0.03NCU/mL。本法与HB-sAg有0.23%的交叉,与 HBeAg有0.04%的交叉。278例正常对照组血清抗-HCV浓度均小于1NCU/mL。结果提示,高度灵敏、稳定的抗-HCV IFMA方法的建立为临床和科研工作提供了一种非放射性标记定量检测分析的方法。

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固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂(Ⅰ)中间体-4,4'-二溴-6,6'-二甲基2,2'-联吡啶的合成

目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4'-二溴-6,6'-二甲基2,2'-联吡啶。方法:根据自行设计的合成路线,以2-氨基6-甲基吡啶为原料,经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6'-二甲基-2,2-二吡啶,再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合成4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2-二吡啶。结果:经元素分析、红外光谱 ,核磁共振波谱等方法证明,成功的合成了4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2'-二吡啶。结论:通过自行设计路线完成了4,4'-二溴-6,6'-二甲基-2,2'-二吡啶的合成,为固相时间分辨荧光免疫分析的应用提供了有价值的中间体和制备方法。

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固相时间分辨荧光免疫标记技术研究

通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂4,7-二氯磺基苯-1,10菲罗啉-2,9-二羧酸标记抗-乙型肝炎表面抗体(HBsAb)IgG实验,对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明:BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应,反应后蛋白质的相对生物活性高于78%,标记比为 23~55,蛋白回收率达60%以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA-Eu3+-(HBsAb)IgG标记物。利用自建的分析方法,测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。

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抗HBc时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的  用竞争法建立抗HBc时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法。方法  以基因重组HBcAg包被板,Eu3+.异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 (Eu3+-DTTA)标记抗 HBc-IgG单克隆抗体,建立抗HBcTRFIA方法。数据采用Log2Logit函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。结果  方法的批内和批间变异系数分别为2.30%和6.30%,回收率为96.72%,灵敏度为0.2NCU/ml。本方法与抗HBs和抗HBe无交叉反应,Eu3+标记物稳定6个月以上。结论  TRFIA是一种新的抗HBc免疫检测技术,具有灵敏度高和稳定性好等优点,能够用于定量测定抗HBc-IgG。

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