酶免疫技术

以已知抗体(抗HBs)包被载体，然后将含有抗原的待检标本加入，共同孵育后，抗原结合于包被抗体上，再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs)，酶标抗体连接到抗原上，最后加入底物溶液，根据颜色反应来判定抗原含量。 一、材料 HBsAg试剂盒，本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 ...

可溶性白细胞介素2受体SIL-2R存在于人的血清、尿液及脑脊液中，其浓度的高低与许多疾病的发生、发展、治疗效果及预后有密切联系，如成人T淋巴细胞白血病(ATL)艾滋病、B细胞慢淋、毛细胞白血病，以及肾移植后发生急性排斥反应时或异基因骨髓移植发生移植物抗宿主时，患者血清中SIL-2R水平明显升高。SIL-2R的检测多采用酶联免疫吸附技术，其中夹心法ELISA是一种较简单的检测方法，国外已广泛应用于临 ...

Il-8是一种分子量为8～10kD的多肽，对嗜中性粒细胞，T淋巴细胞、嗜硷性粒细胞具有趋化作用，并可激活嗜中性粒细胞，是一种重要的炎症介质。在严重感染病人的血清中、炎症局部渗出液中都可检测到高水平的IL-8.此外，近年来的研究表明，IL-8可能与各种组织缺血后再灌注损伤的发生有关。我们采用两株自制的单克隆抗体建立了夹心法ELISA用于检测IL-8，敏感性可达156Pg/ml，操作简单，重复性良好， ...

重组人α2a/α2b干扰素(rHuIFN-α2a、rHuIFN-α2b)生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而不够稳定，且检测周期较长。我们用自制的2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b的单克隆抗体(McA ...

【摘要】：影响ELISA中非特异性显色的原因很多，如试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物，操作过程中的问题。本文就这一原因作一简要分析，以便可以通过以上措施把非特异显色降至最低限度，从而提高检测的特异性，并得到更准确、可靠的实验结果。 【关键词】ELISA非特异性显色 酶联免疫吸附试验（ELISA）自1971年自问世以来，以其敏感性 ...

竞争抑制ELISA方法的建立 1 抗体的酶标记及质量鉴定 本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上，标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化，洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS，流速为15ml/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度计测A280吸光度值，以洗脱体积为横坐标，吸光值为纵坐标做图，收集第一峰即为酶标抗体峰。 标记完后用紫外分光光度计在分别在2 ...

朱阳泉徐长根戴瑞娣 胡乔 作者单位：212001 江苏省镇江市中心血站 作者简介：朱阳泉(1967-)，男，江苏镇江人，主管技师，本科， 主要从事输血传播疾病和血型研究。电话：0511-5021106，E-mail：yangquanzhu@yahoo.com。 【摘要】 目的探讨3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素，提高EI ISA法检测结果的准确性。方法(1)随机选择对照组和实验组各4 ...

张化涛，段延安。 (1．胜利石油管理局临盘医院，山东德州251507；2．胜利石油管理局卫生处，山东东营257003) 影响；检测；酶联免疫 R446B1671-5098(2006)20-3708-01 酶联免疫(EIJISA)是目前检验科常用的免疫学检测方法之一，其操作简单，无须特殊设备，使其在各级医院都有应用。 但是，如果忽视了影响其结果的因素，难免会造成假 ...

临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。现分述如下。 一、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪 ...

两对半使用ELISA方法，其中HBsAg、HBsAb、HBeAg使用双抗原/抗体夹心法检测，而HBcAb、HBeAb使用竞争抑制法检测。 而竞争抑制法的原理：酶标抗体与样本抗体在同样的体系中，与固相抗原竞争结合是等比关系。原论上讲，应该先将样本与酶标抗体先行混匀，然后加入反应也进行。但实际工作中并非如此，都是分开加入反应孔。这样会造成先加入的先结合，与后加入者并不是公平的关系，因而也不符合等比原则 ...

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。 下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂 ...

ELISA试剂的评价（evaluation）分两个方面：一是试剂本身的质量评价，符合一定要求后才能生产供应；一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA诊断试剂为例，首先必须通过中国药品生物制品检定，以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外，对试剂的性能，如特异性、灵敏度、精密度和线性等均需逐项检定，通过对一系列参比品的检测，结果符合要求者才为合格。ELISA试剂的临床质量评价是用该试剂 ...

从1949年美国College of American Pathologists（简称CAP）首先开始研究临床实验室室内质量控制（简称质控）问题，美国学者Levery和Jenning于1950年发表第一篇关于使用质控图的实验室室内质控，临床检验实验室的室内质控工作正式拉序幕。 到70年代，实验室质量控制进入一个新的阶段--全面质量管理，推行Good Laboratory Parctice（简称GL ...

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。 4.1 标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清 ...

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文（2.2）已述，ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分： （1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）； （2）酶标记的抗原或抗体（结合物）； （3）酶的底物； （4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；&n ...

一、ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应 ...

抗体 1.2.1 抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulinIg)。Ig 分五类，即IgG、IgA 、IgM、IgD 和IgE.与免疫测定有关的Ig 主要为 IgG 和IgM.Ig 由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig 的轻链是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda ）两种型别。五类Ig 的重链结构不同，这决定了 ...