Liquid-overlay培养

陈文庆 王建超 刘华杰 高飞 张韧 （北京清大天一科技有限公司 102200 ） （《中国兽药杂志》 2010.44 （ 10 ）： 37-41 ） 【摘要】采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析，比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示，与转瓶培养工 ...

【摘要】采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析，比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示，与转瓶培养工艺相比，反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高，生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺，适宜于国内生物制品工业化生产的升 ...

细胞培养已广泛应用于医学的各个领域，通过体外培养，可以获得单一种类的细胞，在此基础上，可以进一步施行定性或定量的分析，进行形态学以及生物化学、免疫学、分子生物学等方面的观察，因此，细胞培养是医学科学研究中非常重要的实验技术之一。 为了能够顺利进行体外的细胞培养，除了要具有一定必要的基本设备以外，还需要了解体外培养细胞的各种生长条件，其中环境条件对细胞的体外培养尤其重要，环境条件有无 ...

原来是担心细胞状态不好，所以是分别从两个地方要来的细胞，做这个细胞的分化做了小半年，一直在换各种诱导方法，怎么都诱导不起来，细胞只是一个劲儿疯长，怎么都不分化，诱导方法和细胞密度都做出个矩阵来，都找不到合适的条件。 后来一咬牙直接去购买了一株，做了两次就做出来了。 总体来说： 1. 定要用代数低的细胞，有条件就购买好了，几百一株，不贵； 2. 是诱导密度最好 ...

一、常见的污染如下： 1. 细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗 ...

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

除了大多数日常工作场所共有的一些安全风险例如电击和火灾之外，细胞培养实验室由于要操作和处理人或动物细胞和组织以及一些有毒、有腐蚀性或者有致突变性的溶剂和试剂，因而还具有一些特殊的危险。其中，最常见的一些危险包括：注射器针头或者其他污染锐器刺伤、液体泼溅到皮肤和粘膜上、经口吞入毒物以及吸入感染性气体挥发。任何生物安全程序的基本目的都是为了减少或避免实验室工作人员和外部环境与潜在危害性生物物质的接触 ...

一、常用设备 1. 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品柜（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 2. 培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实 ...

按现代的观念，凡是混入培养环境中对细胞生存产生有害的成分和造成细胞不纯的异物都应该视为污染。根据这一概念，组织培养污染物应包括生物（真菌、细菌、病毒和支原体）、化学物质（影响细胞生存、非细胞所需的化学成分）、细胞（非同种的其他细胞）。其中一微生物最为多见。另外，随着使用细胞种类增多，不同细胞交叉污染，尤其是Hela细胞的污染也时有发生，从而造成细胞不纯。 1. 污染途径 ...

1. 材料与方法 1.1 实验动物及试剂 出生7-9d大鼠幼仔、手术器械、DMEM培养基和胎牛血清FBS、0.125%胰蛋白酶、PBS等包被：Poly-L-Lysine多聚赖氨酸，储存液浓度为4mg/ml，超纯水稀释（1:300）。使用时浓度为13.3ug/ml。24孔板每孔加50ul室温孵育1h后吸去，超纯水清洗后吹干。 DMEM培养基10ml，添加剂：谷氨酰胺(146.15)2 ...

一、 神经干细胞的分离和传代 无菌条件下取新生SD大鼠(出生48h内)脑组织，D-Hanks液充分漂洗后，在解剖显微镜下剥离脑膜，准确分离海马，用眼科剪将海马剪碎后，再转移到DMEM/F12(1:1)加B27 和bFGF(20ng/ml)的无血清培养基，吸管吹打机械分离制作单细胞悬液，台盼蓝染色后细胞计数，调整细胞浓度为5×104~5个/ml，置于24孔培养板中培养，每孔 ...

1 材料 1.1 动物 出生后1-4天的Wistar乳鼠1只。 1.2 试剂 PBS、培养液(低糖DMEM，新生牛血清、青链霉素、1%明胶PBS、0.25%胰酶)，碘酒和酒精绵球。 1.3 手术器械 眼科直剪2把、眼科弯剪2把、眼科直镊2把、眼科弯镊2把、玻璃平皿3套，25cm2 ...

一、 实验材料： 6-8周龄大小鼠；剪刀，镊子，灌流用针头，连接管，玻璃平皿，细胞筛，冰盒 二、实验方法： 1. 培养用液 洗涤培养基：DMEM 基础培养基：DMEM/F12 2. 消化用液 前灌流液T1 ;后灌流液T2 3. 培养基本操作方法 a. 将小/ ...

细胞培养是指从体内组织取出细胞，模拟体内环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。动物细胞体外培养主要用来获得细胞群或得到其次生代谢产物，如人造皮肤、人造耳朵、克隆抗体，或者进行药物药效、有毒物质鉴定等。动物细胞培养需要严格的条件：A) 无菌无毒培养环境—保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防 ...

PriCells:小鼠乳腺上皮细胞培养实验材料：1.10-12周龄妊娠小鼠乳腺组织2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.43.FBS、含5%牛血清白蛋白（BSA）的PBS液或DMEM4.0.05%Ⅰ型胶原酶50ml、0.05%蛋白酶50ml、0.1%DNaseⅠ型、结晶紫（0.1%）/枸橼酸（0. ...

Step 1: Take an 100 mL aliquot of frozen cells from the -80oC and innoculate about 500 ml to 1 L sterile LB broth. DO NOT ADD antibiotic since these cells do not have an plasmid in them. Work as steri ...

问：我的细胞缺氧达到12 h后，观察细胞形态还是很好，24h好像还不明显，48h好像都坏死了。正常不应该要这么长时间吧，是不是混合气有氧还是密闭容器不够密？ 答：我们实验室在做缺氧时用的是1%的氧气，这样的情况下细胞需要持续缺氧48h以上才可见损伤的。对于细胞缺氧而言，单纯的缺氧一般达不到很好的损伤目的，所以现在多做的是缺氧和缺糖同时处理，因为细胞只有在缺糖的条件下才对缺氧损伤敏感，建议可以试试。 ...

一、培养基的历史 体外培养（in vitro culture）包括：组织培养（tissue culture）、细胞培养（cell culture）、器官培养（organ culture）。顾名思义，就是将活体结构成分（如活体组织、活体细胞或者活体器官等）从体内或其寄生体内取出，放在类似于体内生存环境的体外环境中，让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。 体外培养已经历了约一百年的发展历史， ...

在人体发育过程中，γδΤ细胞先于αβΤ细胞出现，γδΤ细胞 主要分布于皮肤，小肠、食道、肺和生殖器官等上皮组织内，而在外周血中淋巴细胞仅占0.5%-5%。外周血中γδΤ细胞主要为Vγ9Vδ2、δ1Τ细胞，它在抗感染、抗肿瘤和免疫监 ...