目前,开发出一种芯片为基础的细胞三维培养的方法,该芯片通常是非生物降解的聚合物,如聚碳酸酯或聚微注塑成型,微热压或微热成型丙烯酸甲酯。
美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统,有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。
1、弃去培养基废液。2、消化:加入1ml 0.125%胰酶溶液,转动培养瓶使酶液浸没瓶底,温浴消化2-3分钟。 3、终止:用无血清培养基终止酶反应。4、离心:收集中和了的培养液,于15ml 的离心管中 1000rmp 离心10分钟。5、细胞重悬:弃去上清,加入1ml 无血清培养基用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液。6、细胞计数:血球计数板计数细胞,并换算出细胞数量。7、接种分瓶: 将细胞接种到含4ml无 ...
无血清培养基(serum free medium SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清,称为无血清细胞培养基。无血清培养基的基本配方是基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。大多数的无血清培养基含有必须的向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如纤连蛋白、球蛋白、细胞 ...
无血清培养基一些基本配方
正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养实验材料:1.实验动物:5月龄兔;2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.完全培养液:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml;4.化学限定性培养液:基础培养基为DMEM培养基,添加胰岛素6.25μg/ml、转铁蛋白 ...
体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。
以色列耶路撒冷哈达萨大学的研究人员近日开发出一种新的干细胞培养基,能让干细胞在更长时间内不分化。这项研究是由哈达萨人类胚胎干细胞研究中心的主管Benjamin Reubinoff领导的,发表在近期的Nature Biotechnology上。作者们相信这项技术将对临床应用所需的大量hESC特别有用。
本文简要介绍了外周血培养基配制方法。
丁香园网友yflfen的问题为: 1. 配制培养基时碳酸氢钠和hepes添加量之间有没有什么必然的联系?我已经的做法对培养基的质量有没有影响,影响有多大?我可否按DMEM的说明书添加3.7g/L的碳酸氢钠,此外再自己再另行添加20mM的hepes。 我参考其他文献上的做法时,就有疑问,但后来还是“根据文献介绍(但文献中用的是Hyclone的DMEM)只添加了1.97g/L的碳酸氢钠,同 ...
细胞培养基 培养基是既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。培养基的种类很多,按其物质状态分为半固体培养基和液体培养基两类;按其来源分为合成培养基和天然培养基。 (1)合成培养基:合成培养基是根据细胞所需物质的种类和数量严格配制而成的。内含碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量无素和细胞生长因子等。单独使用细胞虽有生存但不能很好的生长增殖。 ...
一、培养基的历史 体外培养(in vitro culture)包括:组织培养(tissue culture)、细胞培养(cell culture)、器官培养(organ culture)。顾名思义,就是将活体结构成分(如活体组织、活体细胞或者活体器官等)从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。 体外培养已经历了约一百年的发展历史, ...
常用设备 准备室的设备: 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。 培养室的设备: 液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)。必须放在 ...
无菌操作基本技术 1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作 ...
1.建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 2.其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 3.根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 4.用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁 ...
1.干粉,买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。 2.配好的无血清培养基一定保存在4度,保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。 3.加入血清的培养基,最好保存在4度不要超过1个月,从时间太长,活性下降。当然稍微长点也不一定出问题。但是根据细胞而定;如果原代培养,最好新鲜,如果是肿瘤细胞,或仅维持传代就不太要紧。但是原则是越新越好。 ...
注意事项 1.认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。 2.配制是要保证充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。 3.配制所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。 4.所用器皿应严格消毒。 5.配制好的培养基应马上过滤,无菌保存 ...
1.MEM细胞培养基系列 2.DMEM细胞培养基系列 3.RPMI-1640细胞培养基系列 4.199细胞培养基系列 5.水解乳蛋白细胞培养基 6.欧氏平衡盐 7.F-10F-12细胞培养基系列 8.其它类型细胞培养基 ...
无蛋白培养基(protein free midiumPFM):即不含有动物蛋白的培养基。无血清培养基仍含有较多的动物蛋白,如胰岛素,转铁蛋白、牛血清白蛋白等。从生物技术发展的趋势来看,不含动物蛋白的培养基又广泛的应用前景,许多利用基因工程技术重组的蛋白质最终要应用于人体,如果再生长过程中使用了含有动物蛋白质的培养基,纯化过程就比较复杂,最终要达到一定的质量标准也有一定的难度。无蛋白培养基就是为了适 ...