DNA重组

Material100% ethanol (for analysis) sodium acetate -20°C freezer Optional: you can use linear polyacrylamide glycogen or tRNA as precipitation carrier --zurdo 03:45 9 October 2009 (EDT) tabletop centr ...

PREPARE SOLUTIONS 1. 10X Dephosphorylation buffer:0.5 M Tris-HCl pH 8.5 1 mM EDTA PROCEDURENOTE: 1 unit of Alkaline Phosphatase (AP) can hydrolyze 50 pmol of 5'' terminal phosphorylated DNA fragment ...

INTRODUCTION High-throughput whole-genome analysis has become a practical and important technique to understand nuclear processes such as transcription replication and genome structure. Though microar ...

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1.直接研磨法（推荐）:a. 新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵 ...

DL5000 DNA Marker.doc

The protocol for LIC by Exonuclease III梁耀极1. Design the primers with 15-bp overlap;2. Digest the vector by proper restriction enzyme;For getting high quality vectors there are some good advices as fol ...

PEI 转染法材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI （聚乙烯亚胺）1×HBS （pH7.4）配方：PEI 储存液（100 μM）：称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS （pH7.4）： 将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水，加入20 ml 1 M 的HEPES，调pH 值到7.4，定容 ...

DNA以核蛋白形式存在于细胞核中，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K及链霉蛋白酶E的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K或链霉蛋白酶E均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在SDS和EDTA存在下保持很高的活性。在匀浆后提取DNA的反应体系中，SDS可破坏细咆膜、核膜，并使组织蛋白与 DNA分子分离，EDTA抑制细胞中DNase活性，蛋白酶K或链霉 ...

（一）原理DNA 在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质，在595nm 波长处有最大吸收。DNA 在40-400μg 范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。（二）试剂及器材1. DNA标准溶液准确称取小牛胸腺的DN ...

一、原理： 在浓氯化钠（1�2mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。将抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸钠）处理，DNA或（RNA）即与蛋白质分开，可用氯仿� ...

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