相关专题 免疫-PCR技术结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高敏感性,是一种极为敏感的抗原检测技术,并适合于各种微量抗原的检测。 荧光标记、酶标记和放射性同位素标记这三大抗体标记技术是目前免疫化学、免疫学以及分子生物学中应用最广的常规抗原检测手段,具有很高的灵敏度。但在早期癌抗原及某些神经肽等极微量抗原检测上,荧光标记及酶标记技术还缺乏足 ...
相关专题 质粒 一.质粒DNA含量 质粒名称 质粒大小 拷贝数 DNA含量(每ml) PGEM PUC PBR322 2700bp ...
相关专题 摘 要采用紫外、荧光光谱的分析方法,研究了苯甲酸钠与小牛胸腺DNA的体外相互作用。实验结果没有发现苯甲酸钠和DNA之间存在能够明显影响两者各自的紫外光谱或荧光发射光谱性质的相互作用。表明在体外苯甲酸钠未对DNA的构象有明显的影响,也未对DNA中各种碱基有明显作用。关键词:DNA 苯甲酸钠 紫外光谱 荧光光谱 AbstractRese ...
相关专题 一、实验目的:学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。二、实验原理:要获得纯的DNA样品,必须考虑以下几点:¾如何选材,如何破碎组织细胞?¾如何除去蛋白质?在真核细胞内,DNA与蛋白质结合成核蛋白的形式存在。因此,分离DNA时必须使其与蛋白质解离,并除去蛋白质。¾设法除去RNA的污染;¾防止DNA酶的降解作用;(一)选材要提取 ...
相关专题 目的 对于许多重组DNA的实验,知道DNA的序列常是进一步操作所必备的。 本实验将定出你所选殖之cDNA的序列,并进行数据库比对分析。其目的在教导学生如何从事DNA定序分析及DNA序列的计算机分析。 原理 本实验所使用之方法为F. Sanger所发展之dideoxy定序法。 此法乃是将一引子黏合到欲定序之DNA模板上,再利用DNA聚 ...
相关专题 实验原理 利用液氮对植物组织进行研磨,从而破碎细胞。细胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液经乙醇沉淀。实验材料: 新鲜植物叶片1.取4g新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。2.转移至50ml离心管中,加入16ml ...
相关专题 (一)原理 组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。 在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。 分光光 ...
相关专题 一、小量酶解反应 主要应用于质粒的酶切鉴定。10ul反应体积中含1mg DNA,酶切反应体系如下: 质粒DNA 1mL 10×缓冲液 1mL 两种限制酶各 0.5mL +0.5mL 双蒸去离子水 7mL 总体积 10mL 按下 ...
相关专题 摘要: 功能基因的筛选研究可为深入了解疾病的发生和发展过程药物作用机制建立新的疾病诊断、预防、治疗策略奠定基础因而正在成为当今药物及药物靶点发现的重要途径。该领域的迅速发展很大程度上借助于技术方法的不断提高和发展。本文对功能基因筛选研究策略及主要技术方法如表达谱分析法、高通量细胞筛选技术、反义核酸技术、转基因/ 基因敲除技术等的研究 ...
相关专题 Gene-specific RT-PCR This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be aware that they will need to ta ...
相关专题 HelloI"m doing RT PCR and i"m stuck.here"s the thing... i"ve got two pairs of primers one pair for my gene and one pair for my control (cyclophylin). I took 1ug of RNA ...
相关专题 随着生命科学迅猛的发展,与之相适应的实验技术手段越来越复杂和专业化,对于科研人员实验技能要求也越来越高。由于生物学实验高度的复杂性、使得一个科研人员往往只能精通某一方向的实验。因此许多生物技术公司应孕而生,他们提供了许多专业的服务,其中最常规的技术服务包括核酸、蛋白测序、引物合成,SNP分型动物培养及转基因动物实验。 在国外,生命科 ...
相关专题 RACE技术的简介cDNA完整序列的获得对基因结构、蛋白质表达、基因功能的研究至关重要。完整的cDNA 序列可以通过文库的筛选和末端克隆技术获得。末端克隆技术是20世纪80年代发展起来的。RACE(rapid-amplification of cDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。RACE的优点与筛库法相比 ...
相关专题 Sequence Analysis. Automated (Semi-Automated) Sequencers generate a four-color chromatograms on the results of the sequencing gel as well as a text file of sequence da ...
相关专题 人类基因组计划的主要任务之一就是要从大片段基因组区域或整条染色体DNA 上鉴定出基因表达序列(gene expressed sequences)或转录单位(transcription units)。在人类基因组30亿个碱基对中,发生转录的表达序列(即基因)仅占总序列的3~5%。基因组中 绝大部分是基因间隔序列(intergenic ...
相关专题 质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌的培养、细菌的收集和裂解、质粒DNA的分离和纯化。本实验以碱裂解法为例,介绍质粒的抽提过程。 实验目的:掌握碱裂解法抽提质粒的原理、步骤及各试剂的作用。 实验材 ...
相关专题 董 云 洲 王 晓 峰 贾 士 荣 摘要:通过PCR,从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI 位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源 ...
相关专题 DNA是生物的主要遗传物质,因而DNA的制备是基因工程的基础。由于生物形式的多样性(细菌、植物、动物),以及DNA在生物体中存在形式的差异(染色体、线性DNA、质粒),因此,制备DNA的过程和方法也不相同。一、DNA在生物体中的存在形式1.染色体DNA 是生物体遗传信息的主要载体 _原核生物染色体:结构简单,储存的 ...
相关专题 分子杂交的概念及基本原理主要内容:一、分子杂交的概念 二、分子杂交基本原理 (一)DNA变性: 1、DNA变性的方法2、增色效应3、溶解曲线4、融解温度5、影响Tm值的因素。 (二)复性:退火一、分子杂交的概念: 分子杂交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),在一定条件 ...
相关专题 以下,你将看到的是基因工程中不可不知的知识点精简概要。基因重组学什么?我觉得吧,基本概念、实验方法、在基因工程中的位置、与其他实验的关联、用途等等要清楚。如果您对这一技术了解不太明晰,这里一点那里一点的,建议看看。一、重组DNA技术相关概念 (一)DNA克隆 克隆(clone):来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。 克隆化(clo ...