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DNA含量测定

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植物microRNAs合成过程

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MicroRNAs can function as tumour suppressors and oncogenes

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限制性内切酶的质量控制鉴定

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如何使用合适的寡核苷酸?三大准则

相关专题 QPCR 在不少生命科学重点实验中,我们都需用到寡核苷酸,因此,使用合适的寡核苷酸对整个实验的重要性不言而喻。那么,怎样才能做到这一点呢?以下是网友总结的实验心得,走过的最好看一下哦。 怎样优化设计寡核苷酸呢?至少有下列几个方面的问题需要考虑。 1. 估测可能形成的DNA或RNA双链的稳定性 寡核苷酸,无论是DNA的或者RNA的,都 ...

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DNA的重组连接实验原理和详细步骤

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA的重组连接实验原理和步骤 发布: 2010-03-29 来自: 易生物实验 一、实验目的 用T4DNA连接酶将载体pBR322 EcoR Ⅰ-CIP处理的DNA片段,与目的基因5.4KbEcoR Ⅰ片段连接起来,构建体外重组DNA分子,同时学习几种DNA连接的方法。 二、实验原理 重组的DNA分子是在T4 ...

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DNA连接实验原理与步骤

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA分子的体外连接就是在一定条件下, 由DNA连接酶催化两个双链DNA片段组邻的5’端磷酸与3’端羟基之间形成磷酸酸脂键的生物化学过程, DNA分子的连接是在酶切反应获得同种酶互补序列基础上进行的。 带有相同末端(平端或粘端)的外源DNA必须克隆到具有匹配末端的线性质粒载体中,但是在连接反应时,外源DNA和质 ...

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DNA的复制——DNA连接酶性质与作用机制

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷 ...

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几种基因操作的工具酶

相关专题 重组DNA技术工具酶 一、 限制性核酸内切酶及其应用 (一)限制性核酸内切酶的发现 当λ(k)噬菌体侵染E.coliB时,由于其DNA中有EcoB核酸酶特异识别的碱基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中虽然也存在这种特异序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)将甲基转移给限制酶识别序列 ...

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如何理解DNA连接酶的作用特点

相关专题 重组DNA技术工具酶 1、如何理解DNA连接酶的作用特点? 教科书的观点:DNA连接酶无特异性,其催化DNA片段末端连接的情况分两种:(1)催化相同或互补的黏性末端连接;(2)催化同一种限制酶切割产生的平末端连接。两种情况下,末端的“拼接”都会形成“回文序列”。 然而,在基因工程的实际操作中,催化DNA片段末端连接的方法是非常灵活的 ...

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DNA连接酶和DNA聚合酶异同点

相关专题 重组DNA技术工具酶 问题来源:DNA连接酶作用后生成磷酸二酯键,而DNA分子复制过程中,DNA聚合酶所起的作用也是形成磷酸二酯键,形成化学键的部位、名称均相同,DNA连接酶和DNA聚合酶是否为同一种酶? 1 DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口的酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-P与另一DNA链的3& ...

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DNA聚合酶与DNA连接酶等作用如何区别

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA聚合酶与DNA连接酶的作用如何区别 DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起做用;DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起连接作用.在基因工程中起作用,同时DNA连接酶在DNA复制中也起作用,比如岗琦片段的连接! 复习资料:几种酶的比较 限制性核酸内切酶 ...

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平端DNA连接的优缺点、要求条件、实验步骤和注意事项

相关专题 重组DNA技术工具酶 T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶,它可以催化平端DNA片段的连接(Sgaramella和 Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlich,1978),由于DNA很容易成为平端,所以这是一个极为有用的酶学物性。有了这样的物性,才能使任何DNA分子彼此相连。 优点: 1、没有连不上的 ...

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DNA连接酶概述

相关专题 重组DNA技术工具酶 连接酶旧称“合成酶”。DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外), ...

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DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求么

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 一、矛盾之处: (一)DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列不具有专一性要求 支持这一观点的是2008年江苏高考32题,请看具体内容及图示,如下: 32.(8分)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是 ...

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重组DNA技术常用的10种工具酶

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关于DNA 连接酶的分类

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶有两种,一种是从大肠杆菌中分离得到的,称为E.coliDNA连接酶,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间连接起来。 另一种是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶,它既可以缝合双链DNA片段互补的黏性末端又可以缝合双链DNA片段的平末端。我们通常使用 ...

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聚合酶综述

相关专题 重组DNA技术工具酶 聚合酶-简介 1957年,美国科学家阿瑟·科恩伯格(Arthur Kornberg)首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶,这种酶被称为DNA聚合酶I(DNA polymerase I,简称:Pol I)。1970年,德国科学家罗尔夫·克尼佩尔斯(Rolf Knippers)发现DNA聚合酶II(Pol II)。随后 ...

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DNA聚合酶综述

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S1核酸酶简介

相关专题 S1核酸酶 S1核酸酶来源于稻谷曲霉(Aspergillusoryzae),是一种高度单链特异的核酸内切酶,在最适的酶催反应条件下,降解单链DNA或RNA,产生带5,-磷酸的单核苷酸或寡核苷酸。对双链DNA、双链RNA和DNA-RNA杂交体相对不敏感。通常水解单链DNA的速率要比水解双链DNA快75000倍。这种酶需要低水平的zn ...

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RNA聚合酶综述

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