DNA含量测定

相关专题 1868年，瑞士的内科医生Friedrich Miescher从外科医院包扎伤口的绷带上的脓细胞核中提取到一种富含磷元素的酸性化合物，将其称为核质(nuclein);后来他又从鲭鱼精子中分离出类似的物质，并指出它是由一种碱性蛋白质与一种酸性物质组成的，此酸性物质即是现在所知的核酸(nucleic acid)。 1944年Oswal ...

相关专题 质粒 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为目前最常用的基因克隆的载体分子，重 ...

相关专题 核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子，原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子；有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子，RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子，不同类型的RNA分子可以具有不同的结构特点，如真核mRNA分子多数在3’端带有poly ...

相关专题 【基本原理】 利用DNA连接酶把目的DNA片段和载体DNA连接在一起，成为一个新的重组分子。目的DNA片段被限制酶消化后其末端只可能有3种形式： (1)带有相同的粘性末端：用同一种酶或同尾酶处理可得这样的末端。由于质粒载体也必须用同样的酶消化，亦得两个相同的粘性末端，因此在连接反应中，外源目的基因片段和质粒载体DNA均可能发生自身 ...

相关专题 1.5×CTAB CTAB 15 g 1 M Tris·Cl (pH 8.0) 75 ml 0.5 M EDTA 30 ml NaCl 61.4 g add ddH2O to 1000 ml 0.5 M EDTA (pH 8.0) EDTA-Na·2H2O 186.1 g NaOH ~20 g Adjust to pH 8.0 d ...

相关专题 一、试剂 1 、 10 × TBE ( pH 8.3 )： 2 、 46% 尿素溶液： 3 、 20% 聚丙烯酰胺溶液 4 、 10% 过硫酸胺 5 、引物 6 、模板 7 、 DNA 聚合酶 8 、放射性标记的 dNTP 和 ddNTP 贮存液 9、TEMED 二、操作方法 (一)由双链质粒制备单链DNA膜板 取质粒 DNA ( ...

相关专题 QPCR 亮点速读： ● GoTaq® qPCR Master Mix 介绍：染 料法qPCR 的明智选择 ● 使用PureYieldTM RNA 中量纯化系统 纯化体外转录的RNA ● ReliaPrepTM 血液基因组DNA 小提系 统，一种新型的基于离心柱的全血基 因组DNA 纯化方法 ● RT-qPCR 新选择：强荧光、 ...

相关专题 20世纪已经结束，回顾20世纪的科学发展史，不难看出，上半个世纪，科学发展主要在物理学，爱因斯坦的相对论将现代物理学推到了光辉的顶峰;但在下半个世纪，科学的重心显然偏向生命科学。自1953年，克里克和沃森发现DNA 双螺旋结构以来，生命科学成果迭出。截止1989年，已有22位科学家共9 次在此领域获得诺贝尔奖。1989年～1997 ...

相关专题 总有一种转染方法适合你 Clontech，曾经是华人的骄傲，其开发的产品曾多次获得R&D 100大奖。虽说几经沉浮，但如今Takara旗下的Clontech仍在基因表达领域默默耕耘，不断开发新产品。对于从事基因表达的研究人员来说，Smart Race、酵母双杂交系统、慢病毒与腺病毒载体、多色荧光蛋白载体这些产品大家都不会陌生。近几年 ...

相关专题 引物设计操作流程：序列下载——同源性比较——引物设计筛选 1.序列查找 根据所需检测的病原体或者待检特定基因，在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/网址查询有关序列。 2、同源性比较 主要有两种方法 A、在www.NCBI.nlm.nih.gov/Blast/blast.cgi 网址进行在线的两两比较。 B、采 ...

相关专题 引物设计 Primer-Blast介绍 Primer-BLAST，在线设计用于聚合酶链反应(PCR)的特异性寡核苷酸引物。Primer-BLAST可以直接从Blast主页(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/)找到，或是直接用下面的链接进入： http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools ...

相关专题 引物设计 知道了基因名(即Symbol)，怎样在NCBI上查找该基因的序列。Symbol是基因的名称，在文献是可以经常看到的，经常会提到某个基因的基因名。我们就可以用Symbol在NCBI的Gene数据库搜索。但有一点需注意，Symbol是经常会改变的，就是说随着序列的升级，对该基因的研究更加深入，Symbol会改变。但这个基本上不 ...

相关专题 引物设计 测定了引物的OD值后发现A260/A280 由于核酸在260nm附近有强吸收，而蛋白质在280nm附近有强吸收，从生物体内提取核酸时，常用A260/A280比值来评价核酸纯度(比值在1.8～2.0之间)，这一判断是基于序列中A、G、C、T所占比例大致相同时的结果。而合成的DNA/RNA则不同，序列很短 (通常在20～30个 ...

相关专题 引物设计 合成的引物进行PCR反应时无目的条带，怎么办? PCR反应失败的原因很多，可以从以下几个方面考虑。 1) 引物和模板是否配对，同源性有多大? 2) 引物本身是否有立体结构. 3) PCR反应用试剂是否能正常工作? 4) PCR仪是否工作正常? 5) PCR反应条件是否合适? 如果一切正常，还无法解决问题时，我们可以免费重新 ...

相关专题 引物设计 如何根据引物来反查DNA序列 可以上NCBI用BLAST对引物进行比对，会给出你引物所在的DNA序列。 1.登陆NCBI网站 2.在上排找到BLAST点击进入我只用过Old blast你可以点击Old blast的连接进入。 3.找到Search for short nearly exact matches，点击进入。 4 ...

相关专题 引物设计 电泳中的引物问题 1) 使用3%的Agarose凝胶电泳分析合成的引物，发现有很多条泳带，为什么? 对引物进行电泳一定要使用变性PAGE电泳。由于引物是单链DNA，容易形成复杂的立体结构，因此进行Agarose电泳时，容易出现多条泳带，更无法用Agarose电泳进行定量了。 2)能否根据引物电泳后EB染色后条带的亮度对合成 ...

相关专题 DNA连接与转化 实验目的： 1.掌握限制性核酸内切酶消化DNA的原理。 2.掌握重组质粒DNA的酶切鉴定方法。 3.掌握琼脂糖凝胶电泳分析酶切结果。 基本原理 限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA中特定碱基顺序的核酸水解酶(水解磷酸二酯键)。根据酶的识别切割特性、催化条件及是否具有修饰酶活性，可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三大类。通常所指的 ...

相关专题 RNA干扰技术 RNAi实验设计的常见问题及其解答 如何检测荧光标记的siRNA? 荧光标记双链是最常用的优化转染条件的方法。可以用流式细胞仪或者荧光共聚焦显微镜检测标记的siRNA。但是如果siRNA没有针对特定的抗核酸酶进行修饰，荧光可能不会反映siRNA的基因沉默效率。 如何分析带有二级结构的RNA寡核苷酸链? 在90℃下加热 ...

相关专题 RNA干扰技术 几十年来生物学上最重要的进展，也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象，是在线虫中发现的，在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。 此后，科学家们明白，RNAi还有其他形式，它既是一种了解基因功能的强大工具，又是很多生物的基因组所采用的一种在演化 ...

相关专题 RNA干扰技术 RNAi实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程，本实验方法来自于加州大学Jim教授实验的，很权威。 Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi 1. Design polymerase chain reaction (PCR) primers that ...