DNA含量测定

向老外要质粒后的MTA写法向一个牛人要质粒，最后要MTA， 供大家参考：MATERIALS TRANSFER AGREEMENTApril 15, 2008××××× agrees to provide the Recipient Investigator and their Institution identified below (collectively referred to herein as "Recipient") with materials developed at ×××× by ×××× under the foll ...

目的将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒，除去蛋白质及其它成分，就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的步骤，DNA和RNA不溶于有机溶媒中，而溶于水层。另外，分子选殖(molecular cloning)常利用洋菜胶(agarose)来分离不同大小的DNA片段或用以纯化DNA。DNA经限制酶反应、自胶体中溶离或任何酵素反应后，常常 ...

核酸、核苷酸的基本换算DNA电泳基本参数Pfu DNA聚合酶BCIP/NBT & BCIP/INTHistoChoice MBHistoChoice Clearing Agent核酸、核苷酸的基本换算1．核酸的换算：(1)摩尔数与质量：1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmo ...

核酸定量检测核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。每种核酸的分子构成不一， 因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg / ml 的dsDNA，37μg / ml 的ssDNA， 40μg/ml的RNA，30μg/ml的寡核苷酸。测试后的吸光值经过上述系数的换算， 从而得出相应的样品浓度。测 ...

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础，核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素，也是下游分子生物学试验成败的关键。目前常见的核酸纯化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法，这几种方法各有其优势和劣势。一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白质有效的手段，但超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可彻底去除。且每次抽提都会损失部分核酸。另外，体系太粘稠的坏 ...

相关专题 分子生物学主要包含以下三部分研究内容： 1 核酸的分子生物学 核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递信息，因此分子遗传学(moleculargenetics)是其主要组成部分。由于50年代以来的迅速发展。该领域已形成了比较完整的理论体系和研究技术，是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核 ...

相关专题 (一)原理 组成核酸分子的碱基，均具有一定的吸收紫外线特性，最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。 在波长260nm紫外线下，1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度 ...

相关专题 　　DNA双链出现缺口被认为是发生癌症的一个重要原因。最近，美国密苏里州斯托瓦斯医学研究所的研究人员在研究DNA双链缺口修复中又有了新发现，他们提出尽管有机体内存在天然的检测和修复缺口的机制，但是与DNA损伤修复有关的因子必须首先绕过组蛋白。组蛋白既能保护DNA不受伤害但同时也阻碍了DNA的修复。这或促进科学家早日找到癌症治疗的新 ...

相关专题 选择BLOCK-iT™ Dicer RNAi试剂盒，利用RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）进行简单、快速的基因阻断，您不必再花费时间设计siRNA oligo序列及检测它们的效率，就可直接获得RANi结果。 功能基因阻断研究的简单、快速的方法RNA干扰（RNAi）正在成为一种最受欢迎的技术之一，用于在功能分 ...

相关专题 分子生物学的发展大致可分为三个阶段。 (一)准备和酝酿阶段 19世纪后期到20世纪50年代初，是现代分子生物学诞生的准备和酝酿阶段。在这一阶段产生了两点对生命本质的认识上的重大突破。 确定了蛋白质是生命的主要物质基础。 19世纪末Buchner兄弟证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生酒精，第一次提出酶(enzyme)的名称，酶是生物 ...

相关专题 实验原理：核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合，在细胞中进行稳定表达，基因转导的频率大约为10-4，这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性 ...

相关专题 Transformation-Competent E. coli preparation Rubidium chloride method Inoue "ultra-competent" method Cosmid packaging protocol DNA Ligation and Transformation Protocol ...

相关专题 随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问 世以后，各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage，RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Restriction Fragment Len ...

相关专题 DNA斑点印迹的制备 预备1．冰浴中以70W左右的超声波处理基因组DNA 1min，用琼脂糖凝胶电泳检测片段大小，这些片段大小均应为7～10kb。2．用TE缓冲液将DNA稀释至0.5μg/μl。 斑点印迹的制备1．加热5μg DNA（在10μl TE缓冲液中）至95℃ 10min，冰浴5min。用微量离心管短暂离心收集液滴，置冰浴。 ...

相关专题 1、提取DNA的简易方法:1)、从全血中提取DNA：取20μl抗凝血于0.5ml无菌管中，加500μl左右的ddH2O混匀后，12000rpm离心2分钟，弃上清，（若沉淀中仍 有红细胞需重复此操作1-2次）加入样品提取液20μl混匀100℃煮10分钟(可在扩增仪上进行)后12000rpm离心5分钟取上清2μl进行扩增。2)、从其它有 ...

相关专题 提取鸡血细胞的细胞核物质析出含DNA的黏稠物过滤含有DNA的氯化钠溶液DNA的鉴定 ...

相关专题 HHMI News-January 092004-New Insight into Control of Parental Gene Expression in Eggs 　　Researchers have identified a crucial step in a genetic process required for th ...

相关专题 越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA（small interfering RNAs，siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子，能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA，这个过程就是RNA干扰途径（RNA interference pathway）。RNAi的应用包括功 ...

相关专题 【1】．DEAE－葡聚糖法 一、实验材料： 1．50mg/ml DEAE-葡聚糖溶液（500mg DEAE-葡聚糖溶于10ml水，1ml分装，高压灭菌，储存于-20℃） （Sigma） 2．TBS溶液(PH 7.4) NaCL 8.0g/L KCL 0.2g/L Tris 3.0g/L 酚红 0.015g/L (HC ...

相关专题 实验原理：在去污剂SDS及EDTA存在下，通过蛋白酶K消化细胞蛋白质，RNA酶消化RNA获得细胞基因组DNA。本方法获得的DNA可用于Southern杂交及构建文库。 一、实验材料： 1．细胞消化缓冲液： 100mM NaCL 10mM Tris·CL (PH=8.0) 25mM EDTA (PH=8.0) 0.5% S ...