DNA标记

luoqq1985 这里做基因调控区的前辈一定不少，希望能给点意见，我在研究一个基因的5‘非翻译区是否含有低氧转录因子的结合位点，前期的工作是通过软件分析该区域是否存在这个结合位点的疑似序列，然后将这疑似的序列构人到PGL-3sv40中，转染细胞，经过低氧处理（低氧转录因子会增加）检测双萤光素酶的表达变化。如果有，还可以通过突变碱基进一步确定，但是如果不存在这样的结合位点，那我构出来的这个调控区质粒，不知道还可以做 ...

shenqi0622 请问，抑制DNA的合成分为哪些方式啊，例如抑制DNA合成的相关酶类，还有什么别的方式吗freecell 经过下述途径可达到此目的：1、使合成DNA所需的4种脱氧核苷酸形成障碍2、酶活力受抑制3、使DNA模板损伤4、使启动和调控DNA合成的复制子减少5、使DNA合成所需的能量供应障碍shenqi0622 非常感谢，总结的好！shiwei0708 影响因素就可作为抑制因素吧sanshenglou 学习啦hyj ...

无痕风 求助基因芯片如何分析 各位大虾谁有经验 或知道哪里可以做相关的培训 请告诉小妹啊 呵呵谢了freecell http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060905/544223/wangke80 看你是坐哪方面的芯片了，表达谱？CNV？microRNA？还是其它？不同的芯片有自己一些特殊的分析方法。基础了解的话一方面是看文献了，在dxy里面查一查一些基本概念，和一些简单的分析介绍，另外david是 ...

zhenyuyll194 在这请教各位大侠，若想找到一个疾病的基因缺陷比如某个先天性疾病，应该如何着手？请多指点！多谢！lqz816 是医学吗？是植物的话就好办，图位克隆就成。我是搞植物的，对人体外行，瞎说说啊：1、先要调查遗传规律吧，2、先检查染色体形态有没有巨大的缺失等变异，如果没有差异就下一步3、如果病是由于基因不表达或表达失控引起：做芯片，看表达差异，则可能发现候选基因。4、如果基因表达没有差异，就看序列差异，如果病是 ...

小猪默默 请教高人：我现在想用GFP做报告基因，在大肠杆菌中表达蛋白，想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗？有没有人对GFP基因进行过改造？让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光？Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白，那么转化含GFP基因的表达载体即行。2、如果你想表达GFP融合蛋白，那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意的。3、有人改造GFP基 ...

pumcliu 关于基因芯片结果分析方面，请高手帮忙，多谢！小长 QT (Quality Threshold) Clustering Clustering是聚类的意思。基因芯片研究中，也许可以译为“共表达分析”。基因的共表达分析（QT Clustering）下图是使用QT clustering方法对一个时间系列实验进行聚类，每一类的基因具有相似的表达谱，QT clustering方法并不一定要把所有的基因都进行分类，它根据您规定的最小相关性和最小 ...

th_chen 基因转录调控中，存在大量的活化子和抑制子。通常人们会把他们区别对待，活化子如Gal4，行使转录激活功能；抑制子如HDAC，行使转录抑制功能。但是，目前越来越多的实验表明，很多活化子能同时作为抑制子存在。如Oct4是干细胞中一种相当重要的调控因子。它与启动子的结合激活了多潜能基因的表达，却抑制了发育基因的表达。现在的问题是：在同样的细胞环境中，作为抑制子，它募集的是沉默复合物，而作为活化子，它最终募集的是 ...

feiyu1024 在看一篇文献 看到-344 T allele and -344 CT/TT genotype 请问 这几个是什么区别 请高人指点Fasta921 gene polymorphism个人觉得：某对等位基因344位所对应的碱基为CT或TT。344 CT/TT genotype 作为载体包含T allele 。feiyu1024 在文章中 好像二者是有区别的 就是没看明白本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

jellyfish102 Tenascin和Aggrecan与VEGF之间是什么关系，Tenascin和Aggrecan是VEGF的下游基因吗，课题需要，请专家答疑，谢谢。chuckdouble 不是专家的个人意见首先, 是否**因子是**因子的上游或下游 这种问题, 需要具体到哪种模型, 哪种细胞, 哪种亚型. 不然一般不存在答案.tenascin 是个家族, 有 TNC, TNR, TNX 等等. 已有的报道是TNX会和VEGF结合, 诱导其VEGF的活性(293T cells). ...

zlacrobat 这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位基因的序列有差异，那么DNA的互补配对是怎么实现的呢？DNA的2条链并不是完全相同么？Fasta921 zlacrobat wrote:这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位 ...

xfnidage 我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！freecell 什么叫“负面影响”？Fasta921 xfnidage wrote:我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！针对蛋白表达量而言不会产生负面影响。CaMV35S双启动子 ...

dm0920 我有一篇文章修回。审稿人怀疑我结果的可靠性。其中一个结果是将细胞在缺氧的条件下培养4小时后，检测两个目的基因的转录和表达，RT-PCR以及细胞免疫化学染色都提示该目的基因发生了转录并表达。但是，审稿人认为仅仅4个小时这些基因（CD31和CD34）还不能转录和表达，因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。因此，审稿人怀疑我的结果。我想请教各位大侠，是否能帮忙查找一些文献表明很多基因的转录/表达可以 ...

cuixueying531 首次来请教，请大家多多帮忙，谢谢Fasta921 那你为什么选择这样的基因？说出你选择的理由，也许我们大家可以给点建议。呵呵是你发现的新基因？为什么下这样结论：在正常组织及癌组织都不表达的基因？各种组织细胞类型你都检测了或者你都有文献可供参考了？呵呵PS：我也好奇，跟贴学习！落梅风 我也好奇，正常组织和癌组织都不表达，怎么研究？sleepyabby LZ为什么要研究这个基因呢?从哪里得到它的?zfv2 ...

chacha2118 各位大侠：我想问一个问题，我做的课题的一个基因，用到它的其中一个外显子的序列，参考外国文献都说这个外显子是第四外显子，外国文献都是参考的Gene Bank的同一个登录号的序列，可是我去Gene Bank查这个序列却发现老外们说的第四外显子的序列前面标记的却是number5,这是怎么回事？谁能帮我解答一下。谢谢lalala_2004 查到的能确定是同一个基因吗。给个登录号看看。chacha2118 是NM-0 ...

00501101 NF-kB在不同的情况下，作用不一样。NF-kB不同的功能是因为什么原因，现在有没有报道？NF-kB可以对于基因的转录是一个充分条件，还是一个必要条件？NF-kB在不同的情况下，转录的基因不同吗,机制是什么呢？有没有几个特定的功能区，分别起到不同的转录作用？不同亚基或者和不同的辅助转录因子结合，或者磷酸化的位点不同等等可能性，而引起转录的不同，导致NF-kB的功能不同？这些问题还是至今没有解决？如果上述 ...

zhaomingong 本人正在进行一种物质的研究，该物质可以进入作用于特定基因的启动子序列，抑制顺式或反式作用因子与启动子序列的结合，从而影响该基因的表达。现在两个问题请教各位大侠：1、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）的同一种基因的启动子序列是不是同样的结构，即一、二、三级结构是不是都是一样的？2、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）应该有着同样的核染色体，那么为什么在同样的刺激因素作用下（ ...

zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。谢谢。daidaiyidaidai 好像现在比较常用的是双报告基因检测吧， ...

yaoliduli82 本人是个新手，不知核转录调控因子有哪些，抑或哪位高手能否介绍篇文献参考下，敝人将感激不尽～◎！freecell 此帖可以转到生化版。:Dcatonetwo 好像有个FOXP3，我老板研究这个 幸亏没有要我搞catonetwo 你可以自己去查查文献 。。。不过既然是新手 应该先学学如何查阅文献资料 把这本领掌握了 其他手到擒来yaoliduli82 谢谢大家。yaoliduli82 catonetwo wrote:好像有个FOXP3，我 ...

wanglingyun1981 :)各位大虾帮帮忙，用绿色荧光蛋白以及neo构建载体，转染牛成纤维细胞后，开始是绿色荧光还很亮，可是G418筛选一段时间后，会荧光会越来越弱，到最后筛出单克隆，也几乎没有有荧光的单克隆了。原因是什么？有好的解决办法吗？谢谢各位 ！！绿色荧光蛋白用的cmv启动子。slytjiaofei 1.开始时的荧光很强，这个很好解释，因为开始时未进行G418筛选，所以发绿色荧光的细胞有两部分，一是未稳定整合的 ...

gn0301 某一基因由DNA转录为mRNA，再由mRNA翻译为蛋白质，最后蛋白质经修饰变成有功能的蛋白，有诸多的调控因素参与其中。我曾听说：蛋白表达的增加，需要基因启动子的活化，或者在转录后水平存在调控，增加mRNA的翻译，总之，可能存在多个水平参与蛋白的合成。想请学基础的战友帮个忙，我急需这方面的权威文献，哪位战友可以奉献在下一篇。非常感谢！邮箱：bai_qx@126.com细胞因子 已发，不知道能不能解决你的疑问。gn ...