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DNA标记

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大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列二

一篇详细的介绍细菌基因型符号的含义的文章。

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大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列一

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DNA的定量

核酸分子(DNA或RNA)由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键,在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰,其吸收强度与核酸的浓度成正比,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml,ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。

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杆状病毒滴度检测

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临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病诊断的首选工具。下面我们将从探针的设计,样本的制备,原位杂交和检测结果的观察等几个方面简单介绍FIS ...

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一种快速提取细菌和酵母染色体DNA的方法

快速获取微生物基因组DNA在基因克隆、重组子的筛选以及分类学中十分必需。来自ABGENT的技术人员向您介绍一种简易快速提取细菌(含革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌)和酵母染色体DNA的方法。

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小鼠基因组DNA抽提操作规程

先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解,然后用蛋白酶去除其中的蛋白,再用氯仿一次抽提(无需用酚抽提)、预备液沉淀、RNase去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。

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免疫细胞化学常用试剂

目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。

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流感病毒实验室检查技术

详细的有关禽流感病毒实验室分离及各项实验方案,包括标本的采集与处理、病毒分离、病毒鉴定三大部分。

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血球计数板细胞计数法

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。 一、步骤 1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。 1)、 ...

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激光共聚焦扫描显微镜在生物学上的应用

激光共聚焦显微镜适用于细胞生物学、细胞生理学、神经生物学和神经生理学等几乎所有涉及细胞研究的医学和生物研究领域。 在生物学上应用的最大特点是对活细胞进行无损伤性的实时观察分析。能对活细胞,组织进行形态和功能相结合的研究,包括细胞、组织结构的精确描绘、定位(二维和三维)和上述结构的动态变化,进行准确的定性、定量、定时和定位分布观察,细胞生物物质、离子的准确定性、定量、定时和定位分布检测,细胞离子通道 ...

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流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,然后进行电子存储,以后数据可以调出显示和进行分析。其优点如下: 1、具有操作简便,只 ...

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IVC和超净工作台的使用方法

【目的与要求】 了解IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 【仪器与材料】 IVC、超净工作台、一次性手套、口罩。 【步骤】 一、师讲述IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。  二、学生在教师指导下进行各项基本操作。 【内容】 一、原理和结构 IVC笼盒由耐高温(至少能耐150~160℃高温以上)的透明塑料材料制成,一套笼盒由上盖、底盒、食槽、水槽、锁紧 ...

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化学发光免疫分析测定EB病毒衣壳抗原IgM抗体的方法学评价

【摘要】目的 对化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay ,CLIA)测定 EB 病毒衣壳抗原的 IgM抗体( EBV2VCA IgM)进行方法学评价 ,同时将其对儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)的诊断准确性与传统的 ELISA测定相比较。方法 在全自动 CLIA仪上测定88例血清标本,同时用 ELISA法测定。 ...

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核磁共振(NMR)测试技术进展及应用

摘要: 介绍了核磁共振(NMR)测试技术进展,着重介绍固体高分辨核磁共振和二维核磁共振技术的进展及它们在高分子材料领域的主要应用举例。 引言 核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)现象是1946年由哈佛大学的E.M.Purcell和斯坦福大学的F.Bloch所领导的两个小组,用不同的方法观察到的。他们二人由于这项重大发现,共同分享了1952年诺贝尔物理学奖。 最初 ...

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化学发光底物

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物 ...

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LC-10AD岛津高效液相色谱仪使用故障及排除

高效液相色谱作为一种高效、快速的分离分析技术,具有灵敏度高、选择性好的特点,能解决医药分析领域中的诸多复杂问题。如何正确使用及排除故障,将直接影响整个高效液相色谱仪的质量和分析结果的可靠性。 本公司使用的LC-10AD岛津高效液相色谱仪,其主要由LC-10AD泵、SPD-10A紫外检测器、N2000色谱工作站组成。而故障常发生于泵和紫外检测器。 一、泵的故障及排除方法 1、泵压力变化较大或没有流动 ...

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骨髓基质细胞的原代培养

材料方法 1.材料: 1.1材料来源:取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。 1.2主要试剂: DMEM培养基 胎牛血清(FBS) β-甘油磷酸钠(β-GP) 维生素C 青链霉素 胰蛋白酶(1:250)-EDTA 1.3主要仪器设备 双人超净台 Farma Scientific美国 单人超净台 Farma Scientific美国 二氧化碳孵箱 Far ...

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ICP的工作原理、检出限、校正方法、使用和维护

ICP的工作原理: 感耦等离子体原子发射光谱分析是以射频发生器提供的高频能量加到感应耦合线圈上,并将等离子炬管置于该线圈中心,因而在炬管中产生高频电磁场,用微电火花引燃,使通入炬管中的氩气电离,产生电子和离子而导电,导电的气体受高频电磁场作用,形成与耦合线圈同心的涡流区,强大的电流产生的高热,从而形成火炬形状的并可以自持的等离子体,由于高频电流的趋肤效应及内管载气的作用,使等离子体呈环状结构。 ...

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EDTA-胰蛋白酶的配制

问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢! 答:1、胰酶是0.25%这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。 2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在 ...

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