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DNA标记

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【交流】blast结果分析

各位大侠帮忙分析下!谢谢!gb|ABO31000.1| tumor protein p53 Length=77 Sort alignments for this subject sequence by: E value Score Percent identity Query start position Subject start position Score = 91.3 bits (225),Expect = 1e-20, Method: Compositional matrix adjust. Identities = 43/44 (98%),Posi ...

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【共享】慢病毒载体

我们实验室有PLVX 和PCDF 两种慢病毒载体,前者没有其他的辅助质粒,不知道哪些大侠用过这种载体系统,能不能共享下辅助质粒呢。有的话尽快联系我哦,QQ869055498data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAh8AAAHVCAYAAABRxpmeAAAgAElEQVR4AeydBVhUXRPH/zSoGGCBqCCC3d3Y3d3dYuf32t0tFmKLL ...

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【转帖】无创产前诊断:迎来行业看好的最佳时机

无创产前检测技术起始于香港科学家卢煜明在孕妇血液中发现婴儿DNA的突破性研究,具有羊膜穿刺诊断无法竞争的技术优势。由于其在诊断领域的巨大前景,Illumina公司不愿放弃这一利润丰厚的领域而拒绝罗氏67亿美元的收购,更有专家学者从技术和行业上看好无创产前检测。无创产前检测技术建立在香港科学家卢煜明于1997年发现的孕妇血液中包含胎儿DNA碎片的突破性研究上,研究发现,母亲血液中游离的基因片段约15%来自胎 ...

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【转帖】Nat Methods: 2014年值得关注的技术

2014年首刊,《Nature Methods》杂志将2013年度技术(Method of the Year 2013)授予了单细胞测序(single-cell sequencing)。同时,杂志还介绍了2014年值得关注的技术,包括CRISPR和基因组编辑、原位测序、迷你胞内探针、单粒子低温电子显微镜等。单细胞测序近几年来,基于单细胞测序技术的科学研究取得了突飞猛进的发展,其成果有望为一些重要的医学问题提供新的解决方案。文章总结了201 ...

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【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料

EvaGreen qPCR 荧光染料一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料 EvaGreen®是一种用于实时定量 PCR(qPCR)的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I。除了有相似的光谱特性,EvaGreen 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I。首先,EvaGreen 对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I。因此,使用EvaGreen 进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤。同时,EvaGreen 在实验中可以使用较高的 ...

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【共享】dsDNA微阵列的原理

dsDNA 微阵列又叫蛋白质结合微阵列(Protein binding microarray, PBM), 由Bulyk等在1999 年首次提出。它的基本原理是在玻片上很小的面积内(约1 cm2)固定成千上万的dsDNA分子作为探针, 检测与大量DNA分子与DNA结合蛋白之间的相互作用。这种检测在原理上模拟的是DNA结合转录因子在体内与其DNA结合位点的相互作用。在基因组DNA中, 转录因子的DNA结合位点一般是一段很短(约5~20 bp)的序列, 如转 ...

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【medical-news】检测AML患者表观遗传学改变和预后相关基因信息对指导临床意义重大

PurposeMolecular risk stratification of acute myeloid leukemia (AML) is largely based on genetic markers. However, epigenetic changes, including DNA methylation, deregulate gene expression and may also have prognostic impact. We evaluatedthe clinical relevance of integra ...

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【原创】两步法高分辨溶解曲线(HRM)SNP分型

HRM 是SNP分型的手段之一,其特点为分型费用比较低廉,特别是应用小片段法,鄙人初次应用小片段法对10个SNP成功分型,现将实验的步骤分享,希望能给有需要的同道一点经验,同时希望能多交流,谢谢~~~两步法HRM不同于一般的HRM法在于PCR和HRM分开做,顾名思义:第一步:PCR,最好用预混的PCR试剂,我用的是宝生物的PCR Premix TaqTM,便宜又好用。第二步:HRM,将P好的产物分别加上LC Green及高低温内标, ...

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【公告】创英生物TaqMan-MGB双标记荧光探针合成 --VIP 客户专属

创英生物TaqMan-MGB双标记荧光探针合成--VIP 客户专属TaqMan-MGB 探针与传统的TaqMan-TAMRA探针比较具有以下优势:1. 提高TM值— 平均15bases可提高18℃,这样可以使探针的长度缩短,尤其对AT含量高的序列设计有很大的帮助,并且提高配对与非配对模板间的TM值差异。2. 提高信噪比— 由于在探针的3’端的淬灭基团为不发光的荧光基团,并且与报告基因在空间的位置更接近,实验结果更精确,分辨率更高。3. 更简化实验— ...

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【交流】exosome文献交流

RNA 分泌体可以通过召回RNA聚合酶II促进转录终止Nat Struct Mol Biol. 2014 Sep 21. doi: 10.1038/nsmb.2893. The RNA exosome promotes transcription termination of backtracked RNA polymerase II.Lemay JF1, Larochelle M1, Marguerat S2, Atkinson S3, B?hler J3, Bachand F4Author information

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TetraOne™ KO:基因敲除技术的重大突破

近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现,是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。基因组编辑的技术进展传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Ca ...

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DNA SMART技术让ChIPSeq研究更轻松

Clontech是cDNA合成技术的引领者,近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析,利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库,极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战,如何从染色质免疫共 ...

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叶酸利用能力遗传检测

叶酸是什么叶酸(Folic acid)维生素B复合体之一,是米切尔(H.K.Mitchell,1941)从菠菜叶中提取纯化的,故而命名为叶酸。是合成核酸所必须的元素,是细胞生长和组织修复所必需的物质,更是胚胎发育过程中不可缺少的营养素。有“优生优育的营养素”美誉,对孕妇尤其重要。叶酸利用能力遗传检测的意义1、叶酸缺乏是导致出生缺陷的重要原因2、叶酸补充过量危害对叶酸的增补剂量并非越多越好。大量研究发现,过量补充叶酸会导致 ...

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阅读质粒图谱的方法

载体主要有病毒和非病毒两大类其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 1 复制起始位点Ori 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 2 抗生素抗性基因 可以便于加以检测,如Amp+ Kan+ 3 多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段 4 P/E 启动子 ...

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基因敲除

基因敲除 - 概述 基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因的插入突变和RNAi技术,它们同样可以达到基因敲除的目的。 基因敲除 - 介绍 ...

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PEI 转染法

材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI (聚乙烯亚胺) 1×HBS (pH7.4) 配方: PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。 1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水,加入20 m ...

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染色体标本制备与观察实验操作规

染色体制片技术显示染色体一般的形态和结构成功的关键是获得大量染色体缩短适宜的分裂细胞。 1. 压片法 ① 取材:在适当的时间选取细胞分裂旺盛的组织。 ② 预处理:秋水仙素进行活体或离体处理。 ③ 固定:卡诺固定液固定,迅速杀死生活细胞使染色体的组成蛋白变性,保持染色体形态和结构。 ④ 解离:1mol/L HCl60℃进行酸解,不同的材料的酸解时间不同。 ⑤ 染色:改良石炭酸品红染色。 ⑥ 压片染 ...

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质粒稳定性测试

Immediately before indcution it is advisable to test the culture to determine the fraction of cells that still carry the target plasmid. This involves plating of cells on four different plates. ...

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诱发性肝癌动物模型的建立

二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌:取体重250g左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘。 按性别分笼饲养。除给普通食物外,饲以致癌物,即用0.25%DEN水溶液灌胃,剂量为10mg/kg,每周一次。其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。 4-2甲基氨基氮苯(DBA)诱发大鼠肝癌:用含0.06%DBA的饲料喂 ...

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引物合成常见问题解析

Q1.引物是如何合成的? 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。 (1) 去保护:加入Deblocking脱去碱基上5'- OH的保护基团DMT,获得游离的5'- OH; (2) 耦 ...

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