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抗原设计

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玻片凝集试验(Slide agglutination test)

相关专题 【原理】 玻片凝集的原理与试管凝集相同,一般均用于诊断未知抗原,如用已知的免疫血清诊断未知的细菌和血型鉴定等。由于方法简便,并具有较高的敏感性和一定的特异性,故迄今仍为各实验室所应用。玻片凝集的反应时间短(应在2~5分钟左右出现凝集),因而对免疫血清的浓度应相应提高(如该免疫血清试管凝集效价在1:1280以上时,应做1:20 ...

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补体介导的细胞毒试验

相关专题 【原理】 补体介导的细胞毒试验(complement dependent cytotoxicity test)的原理是特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后,在补体的参与下,可产生细胞膜损伤,细胞死亡;不带相应抗原的细胞仍然存活。利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态,活细胞不着色,具有折光性,大小也正常。死细胞着色,体积增大。 ...

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淋巴细胞转化试验(Lymphocyte Transformation Test, LTT)

相关专题 T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如植物血凝素 Phytohemagglutimin,PHA)或特异性抗原刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加并能进行分裂,成为淋巴母细胞,即为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体细胞免疫水平。因此可作为测定机体免疫功能的指标之 一、形态学检测法 【原理】 ...

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免疫血清的鉴定、纯化和保存

相关专题 一、免疫球蛋白的提取与鉴定: 各类免疫球蛋白及其与其它血清蛋白间,根据它们的分子大小、电离密度、等电点以及在水溶液中的溶解度不同等,得以相互鉴别与分类。利用上述特性,还可以从液体中分离和提取各种免疫球蛋白。(一)免疫球蛋白的分离提取:1.盐析法(Salt fractionation):蛋白质在不同浓度的盐溶液中相对溶解度不同。 ...

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单向免疫扩散法(Single radil immunodiffusion)—正常人群IgG正常值检

相关专题 【原理】 在含有特异抗体的琼脂板中打孔,并在孔中加入定量的抗原,当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合,既形成白色沉淀环,其直径或面积与抗原浓度呈正相关。同时用标准抗原或国际参考蛋白制成标准曲线,即可用以定量检测未知标本的抗原浓度(mg/ml或IU/ml)。 应用这一实验方法可检测正常人群或患者血清中IgG、IgA及Ig ...

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总补体活性(CH50)的测定

相关专题 【原理】 补体能使溶血素(抗绵羊红细胞抗体)致敏的绵羊红细胞(SRBC)发生溶血,当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时,溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此,将新鲜待检血清做不同稀释后,与致敏红细胞反应,测定溶血程度,以50%溶血时的最小血清量判定终点,可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比100%溶血灵敏、准确。 【材料】 1 ...

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免疫血清的制备实验

相关专题 机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫(抗体)和细胞免疫(致敏的T淋巴细胞及其产物多种淋巴因子)的过程。一种抗原能否引起免疫反应,一方面取决于抗原分子表面有无特异性的抗原决定簇。另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。上述条件具备时,抗原经合适途径,选择合适剂量及次数,进入机体内,经过一段潜伏期,抗体水平就逐渐升 ...

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抗体制备技术

相关专题 抗体制备技术1、多克隆抗体(polyclonal antibody pAb):用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物~。2、单克隆抗体(monoclonal antibodies mAb):由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同 ...

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多克隆抗体的制备,纯化及免疫电泳

相关专题 【实验目的】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验原理】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗 ...

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免疫球蛋白提取技术(Immunoglobulin isolation technique)

相关专题 免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。 随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相结合的方法,特别 ...

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抗体的制备及应用

相关专题 一、抗体的一些基本概念单克隆抗体 (Monoclonal AntibodyMcAb):单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体多克隆抗体(Polyclonal Antibody):多个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体抗原(antigen ,Ag)表位,抗原结合位点,抗原决定簇(epitope)单克隆抗体 1、单克隆抗体的特点特异性强,具有抗原结合位 ...

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组织芯片制备方法和发展概况

相关专题 基因芯片技术在生命科学史上具有开拓性的意义,曾跻身年度自然科学领域10大进展之一,组织芯片是基因芯片的延伸,自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的制备方法、应用领域、以及目前的发展概况做简要的介绍。 组织芯片的制备技术: 制备组织芯片的两个关键步骤是制备受体蜡块和从供体石蜡块中精确采集微量样品。虽然至今仍然 ...

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如何长期保存石蜡组织切片?

相关专题 许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。 一些研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱,甚至阴性。因此,有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月、3个月、6个月、1年再与新切 ...

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抗血清的制备(Preparation of antiserum)

相关专题 一、目的:1、了解抗血清制备的基本过程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determin ...

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酶分子的改造技术相关知识

相关专题 由于酶具有反应专一性、催化效率高及反应条件温和等优点,因此在工业、农业、医药和环保等方面已经得到越来越多的应用。但总体还没有达到大规模应用的程度,其主要原因在于酶自身性质上的一些不足,如不稳定性、对pH的要求严格以及具有抗原性等等。因此,人们希望通过各种方法、按照需要定向地改造酶分子,甚至创造出自然界尚未发现的新酶,从而适合各行各 ...

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免疫电镜技术简介

相关专题 (一) 原理 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子显微镜下观察,由于标准物形成一定 ...

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非标记抗体免疫电镜实验技术

相关专题 (一) 原理 标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗 ...

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免疫组织化学技术

相关专题 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、 ...

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免疫酶细胞化学—固定和切片

相关专题 一、固定 若想得到理想的ICC染色结果、正确地判断抗原物质在组织细胞内的位置,除需有良好酶和抗体外,保持组织细胞内抗原物质的不动性(Immobility)和免疫活性也是至关重要的。换言之,如果抗原物质在组织细胞间弥散、丢失或失去免疫活性,无论如何努力染色都是徒劳的,所以说固定是ICC染色中非常重要的一环。 ICC与其它组织学技术不 ...

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如何选择单克隆抗体细胞

相关专题 (一)脾细胞 1.材料 (1) 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液 (3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1) 拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下轻轻洗去脾上的红 ...

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