染色体免疫共沉淀（chip）

亚硫酸氢盐修饰DNA步骤一、内切酶作用体系：（自建立，试过，效果很好）EcoRⅠ TaKaRa 消化DNA 37℃ 3hddH2O 11ulH溶液 2ulEcoRⅠ 1ulDNA 6ul37℃ 孵育 3h二、亚硫酸氢盐修饰过程：（翻译稿）1.用适合的内切酶消化大分子量的DNA（避免目的基因被切割），或者通过把DNA悬于蛋白酶k/SDS缓冲液，通过26 gauge needle 5次，37℃孵育30min（降低DNA大小，利于充分变性）2.加2.2ul新鲜配制的3M NaOH 到18 ...

【转帖】染色质免疫沉淀（ChIP）技术的难点及应用本文转自密理博中国博客，转载请注明出处作者：柴晶晶序言随着人类基因组测序工作的基本完成，功能基因组学的研究逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域。研究某个蛋白因子的调控功能，可以通过对蛋白活性（激活或抑制其活性），蛋白数量（过表达Overexpression或基因缺陷型Knockout）, 以及蛋白功能（功能缺陷型蛋白Dominant- ...

一、《Molecular Cloning 3》英文版，主要介绍分子克隆的基本实验技术操作，新手如果看不明白此版，可以自己买一本军科院翻译的中文版。Table of ContentsChapter 1: Plasmids and Their Usefulness in Molecular CloningChapter 2: Bacteriophage and Its VectorsChapter 3: Working with Bacteriophage M13 VectorsChapter 4: Work ...

染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecitation,ChIP)是研究体内ＤＮＡ与蛋白质相互作用的重要工具.它可以灵敏地检测目标蛋白与特异ＤＮＡ片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系.核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等,这些共价修饰与真核基因的表达密切相关.根据“组蛋白密码”假说,组蛋白的各种共价修饰的组合,会以协同或拮抗的方式诱导特异的下游 ...

最近有不少战友在做ChIP实验，希望我的一点经验对大家有帮助（本贴不谈实验步骤，最后我会附件一份说明书，有详细步骤，另外建议像我一样的新手用试剂盒，避免不必要的麻烦）一、原理转录从基因的启动子区开始，由一系列的转录因子结合到基因的启动子区，通用转录因子结合在基本启动子区起始转录，而这个过程对基因的转录是必需的，但不是充分的，通常需要一些特异的转录因子结合在上游调节序列，使基因特异表达并维持的合适水平，ChIP主 ...

自己做ChIP有一段时间了，将一些经验教训写上来，给自己作个总结，备个份。 重要的地方，可以决定结果的好坏 1、cross-link：甲醛浓度、胶联时间一般都使用1%formaldehyde，但也有人用浓度偏高的，比如：add 10 ml of Fresh PBS and add 270 ul of 37% formaldehyde, swirl gently to mix, and place at room temp 10 min.胶联时间很是关键：The duration of formaldehyde treatment is a ...

1. 染色质免疫沉淀Input对照：在进行免疫沉淀前，需要取一部分断裂后的染色质做Input对照。Input是断裂后的基因组DNA，需要与沉淀后的样品DNA一起经过逆转交联，DNA纯化，以及最后的PCR或其他方法检测。Input对照不仅可以验证染色质断裂的效果，还可以根据Input中的靶序列的含量以及染色质沉淀中的靶序列的含量，按照取样比例换算出ChIP的效率，所以Input对照是ChIP实验必不可少的步骤。Be ...

DNA合成公司的尴尬和困惑DNA合成的价格降到这个份上，恐怕每家合成公司都在暗自掂量：还值不值得在DNA合成上继续投资？眼看人家国外的DNA合成公司已经把毛细管电泳、质谱分析等先进手段用在了Oligo DNA的质量监控，而我们还停留在PAGE检测上，条件稍好一点的，也就是再做一下HPLC分析。赛百盛近期与美国一家顶尖的DNA合成公司合作，对国内的DNA合成质量进行了一番分析研究。说是合作，是人家客气，其实是向人家 ...

作为遗传信息中心法则的三大掌门人，搞不清楚他们之间的那些纷争，怎么在江湖上混呢？

正文1.如何提高中文论文的阅读效率（前提：已找到相关中文文献+先阅读中文文献后阅读英文文献）？a.在阅读开始前先“打开”并“保存”一个Word文档，并且通过“工具”中的“自定义工具栏”将其中的“替换”拖到工具栏（这样有利于养成良好的“流程”习惯，可以大幅度提高后续的查找、文献再阅读、文献应用等工作，而且也便于以下的“复制”工作进行）；b.快速概览文献，并且注意所读文献的题目、摘要、关键字（尤其是中文文献的英文关键字，它可以成为你查 ...

1. The preparation of native chromatin from cultured human cells1.1.Cultured cells (e.g. HL-60 or lymphoblastoids) are grown to a density of approximately 1 x 106 cells/ml until they are inlog phase.1.2.Harvest cells: centrifuge samples (7,000 g, 10 min, 4°C) and wash the cell pellet 3 x ice cold PBS (Pho ...

　　【疑问】检验技士的考试和护士的一样吗？限2年内累计通过？比如今年这次过2科，明年再过2科就发证了？谢谢！　　【版主回复】检验资格考试和护士资格考试都统一归于全国的卫生资格考试的，所以成绩也是两年内有效。你今年这次过两科，明年把剩下那两门通过了就可以了。但是要提醒的是，你要注意保留今年的成绩单啊，不然明年发证会有麻烦的医学教.育网原创。

　　考试是紧张、激烈的脑力劳动，特别是检验技士，这期间需要考生全身心投入，且处于最佳状态，以保证每分钟都能积极思维。考试开始前，考生应像运动员比赛前先做准备活动一样，摒弃与考试无关的一切杂念，排除种种可能在考场中分散注意力的因素，适当热身，提前进入“角色”。考试中要克服六种不良心态。　　1、偏急心态　　考试时，有些考生为了抢时间，刚拿到试题，情绪急躁，没有审清题设条件，慌忙答题，这种心态称作偏急心态。正确的做法是：拿到试题，先大致浏览一下 ...

1、规定黑色水笔答题外，建议检验技士考生再多准备一支笔。2、不要让考场中可能出现的情况影响自己。原因：你在考场中可能会碰到非常紧张焦躁、情况不断的考生，这时，一定要把握住自己，千万不要浪费时间在和考试无关的事物上。3、考场突遇好久未见的朋友，不要出现情绪波动。原因：考场按学科分，考生很有可能遇到自己的朋友、同事，谈起自己现在工作、生活情况等等，不要因此而影响自己的情绪。毕竟马上要进考场了，心理上的波动都可能会影响正常发 ...

　　红细胞大小改变-临床检验技士考试辅导：　　1.小红细胞　　直径小于6μm者称为小红细胞，正常人遇见。如果血涂片中出现较多染色过浅的小红细胞，提示血红蛋白合成障碍，可能由于缺铁引起；或者是珠蛋白代谢异常引起的血红蛋白病。而遗传性球形细胞增多症的小红细胞，其血红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区消失。　　2.大红细胞　　直径大于10μm.见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血。　　3.巨红细胞　　直径大于15μm.最常见于缺乏叶酸及难生素B12所致的巨幼细胞性贫血。其 ...

尿检常规检查是医学检验技士考试中需要了解的内容，医学教育网小编整理了相关知识点，以便大家方便复习。1、标本的采集：用清洁容器随时留取新鲜尿液100～200毫升，最好以清晨第一次尿液。成人女性留取标本时，应避免月经与白带混入尿内。不能立即送检则应先贮存于冰箱中。2、尿常规检查包括尿液的一般性状、化学成分及沉淀检查。正常尿液成人每日约1500～2000毫升，颜色呈淡黄色、透明、少许氨臭味，尿比重约为1.010～1.025. ...

红细胞的储存损伤是医学检验技士考试需要了解的知识点，医学教育网小编搜集整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。把血液储存在液体基质中时，红细胞会发生一毓生物化学与结构上的改变，这些变化统称这为红细胞储存损伤。这些损伤是影响输血后红细胞生存与功能改变的主要原因。储存血液中发生了致死性伤害的红细胞在输入后很快被受体清除。通常衡量血液是否合格的标准是看血液输入24小时，后其存活的红细胞能否达到输入量的 ...

嗜碱性点彩红细胞是医学检验技士考试需要了解的知识点，医学教育网小编搜集整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。瑞氏染色后，胞质内出现形态不一的蓝色颗粒（RNA），属于未完全成熟红细胞，颗粒大小不一、多少不等，原因为重金属损伤细胞膜，使嗜碱性物质凝集，或嗜碱性物质变性，或血红蛋白合成中阻断原卟啉与铁结合。见于铅中毒医学教|育网搜集整理。正常人血涂片中很少见到嗜碱性点彩红细胞（约占1/10000）。其他各类贫血 ...

痰液的理学检查是医学检验技士考试需要了解的知识点，医学教育网小编搜集整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。1.量：正常人无痰或仅有少量泡沫样或粘液样痰。痰量增多常见于支气管扩张、肺脓肿、肺水肿和慢性支气管炎，有时甚至超过100ml/24h.在疾病治疗过程中，如痰量减少，一般表示病情好转；但若发生支气管阻塞而使痰液不能排出时可见痰量减少，反而表明病情加重。2.颜色与形状：正常人仅有少量白色或灰白色粘液痰，医 ...

培养基的制备程序是临床检验技士考试复习需要了解的知识。医学|教育网搜索整理了以下内容供考生了解。培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为：配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。（一）配料 按培养基处方准确称取各种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入各种成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。（二）溶化 将各种成分混匀于水中，最好以流通蒸气溶化 ...