基础知识

为了响应ftp资源讨论版不再处理站友的上传申请而由各专业讨论版的版主负责的举措，现做出以下说明：1.有关蛋白质技术的资源希望通过ftp共享，请在本版 http://www.dxy.cn/bbs/post/page?bid=65&sty=1&age=0&s=493 发新帖申请，一般有五人以上需要后即发给上传密码。是否加分鼓励，由本版的版主根据情况决定。对于不易界定专业的资源，以及部分比较难得的精品，仍然在ftp资源讨论版发帖申请。2. ...

转自科学网论坛 Linxubo 点：free user 下载Molecular Biology Methods Bookshttp://rapidshare.com/files/58795488/201_Combinatorial_Library.pdfhttp://rapidshare.com/files/58796259/202_Thyroid_Hormone_Receptors.pdfhttp://rapidshare.com/files/587 ...

Proteomics in Practice: A Guide to Successful Experimental Design, 2nd, Completely Revised EditionShort descriptionStill the only concise practical guide, this edition combines the best features of a laboratory manual with a concise reference for successful experimental des ...

外源基因在宿主细胞中的高效表达1．有效的转录起始与基因的高效表达有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键性步骤之一，也可以说，转录起始的速率是基因表达的主要的限速步骤。因此，选择强的可调控的启动子及相关的调控序列，是组建一个高效表达载体首先要考虑的问题。最理想的强的可调控的启动子应该是：在发酵的早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏，这样可以避免出现表达载体不稳定，细胞生长缓慢或由于产物表达而引 ...

你注意过以下技巧吗?1. Milk-based blockers may contain IgG that can cross-react with anti-goat antibodies. This can significantly increase background and reduce antibody titer. Milk may also contain endogenous biotin or phospho- epitopes that can cause higher background.2.To stretch the O ...

想和大家讨论一下关于dominant negative的问题。首先，什么是dominant negative？在网上查到的解释多为：显性抑制---虽然多数的突变都隐性的，可是在遗传学的实验上，也曾观察到显性的突变，如果这突变会抑制或破坏某一正常的功能，就称之为“显性抑制”。在实验中给野生型表达或转入无功能的基因或目的蛋白无功能类似物，观察是否会影响原来也具有正常功能的基因或蛋白的作用。一般用于验证实验的准确性。就我的理解， ...

前两天在网上提问，有不少朋友回答，万分感谢，后来我的一位同学给我寄来了科学出版社的一本蛋白质预测的书的WORD版，放在这儿给需要的人看看。 涉及到的因特网资源物理性质预测： Compute PI/MW http://expaxy.hcuge.ch/ch2d/pi-tool.html Peptidemass http://expaxy.hcuge.ch/sprot/peptide-mass.html TGREASE ftp://ftp.virginia.edu ...

一、蛋白质数据库1.UniProt (The Universal Protein Resource)网址：http://www.uniprot.org/http://www.ebi.ac.uk/uniprot/简介：由EBI(欧洲生物信息研究所)、PIR(蛋白信息资源)和SIB(瑞士生物信息研究所)合作建立而成，提供详细的蛋白质序列、功能信息，如蛋白质功能描述、结构域结构、转录后修饰、修饰位点、变异度、二级结构、三级结构等，同时提供其他数据库，包括 ...

酪安酸差色光谱法1.打开分光光度剂，预热30分钟，是紫外灯处于稳定发光状态2.在2容积为1mlde 微量石英比色杯中分别加入900ulPH7.4,PH12.0的0.1mol/l磷酸缓冲液，把盛有PH12.0缓冲液的比色杯放入样品杯中放入支架上，把盛有PH7.4缓冲液的比色杯放入到参比杯的支架上，然后准确的测出295nm波长下的光吸收值，或用250－350nm扫描3.在上述的2个比色杯中分别加入100UL的待测样品液，小 ...

最近2个月都在做原核表达，刚开始什么都不会，连SDS-PAGE都跑成模糊的一片，其中的辛酸只有自己知道，现在实验慢慢上正轨了，自己也积累了一些经验。很怀恋之前探索的那段时光，现在把我做蛋白表达的过程和一些问题写出来，希望能够帮助开始做蛋白表达的人少走一些弯路。1、表达载体的构建构建表达载体是比较简单的，不过也是需要对你的蛋白还有所用的载体有一个详细的认识，对于比较大的蛋白最好选用能够助溶的标签，但是也不是固定的 ...

watermark分子生物学基础 4.46Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/DNAI.ppt蛋白质和DNA的关系 4.88Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/DNAIII.pptDNA复制（第一讲） 1.28Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/Replicatio ...

觉得这篇文章不错啊，贴出来与大家分享！恳请版主加分！真核表达系统的研究进展经络 陈勇自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就。在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟的表达系统。该项技术的主要方法是将已克隆入目的基因DNA片段的载体 (一般为质粒)转化细 ...

随着SELDI技术从美国的引进，有部分战友已经接触到了这个技术，现把园里有关的帖子总结于下。SELDI 芯片的再现性http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1115005&sty=3&keywords=SELDISELDI和飞行质谱所能检测的蛋白质的分子量范围是多少？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=749497&sty=3&keywords= ...

看到坛子里最近有好多朋友发贴问膜蛋白的相关问题，尤其是一些新手。其实坛子里以前就有过不少这方面的讨论，只有你搜索一下就会发现好多有用的信息，肯定比你在那焦虑的等待别人回帖效果好。而且好多新人常常迫不及待的就重复发贴，造成了一定程度的资源浪费，而且这也是版规所不容许的。正好本人最近也在准备这方面的课题，所以顺手总结一下过往的一些帖子，希望对大家有所帮助。（数字仅为标号，绝非排名:P）小弟抛砖引玉，冀望各位不吝拍玉:) 小 ...

做生物的出国特别容易，因为做生物的赚钱少；职位大把大把的，就看你找不找；PS. 不能长期做，当个跳板不错；另：加密10，挡住小马甲~~~1. Postdoctoral Research Fellow, University of Maryland, Rockville, Maryland Postdoctoral Research FellowUniversity of MarylandDepartment: Center for Advanced Research in Biotechno ...

前段时间，美国赠送给我一个质粒，经联邦快递到达深圳海关，公司通知我要根据货物情况到相关行政职能部门办理入境申请，或者是省卫生厅科学教育处办理《人体物质出入境申请表》或《科研样品出入境申请表》 和《医用特殊物品准出入境证明》，或者是农业厅检疫处办理相关入境申请，然后报送深圳海关，再由海关办理其他清关手续（海关还要请专家审查，非常麻烦）。听起来很简单，等我请本单位出函给卫生厅，卫生厅说不是医学用品不归他们管，到农业厅，农业厅 ...

实验过程：1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1：10，000开始，5倍稀释。点1ul到NC膜上，点完后迅速泡到PBS里。2. 配好发光底物后取出膜，将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后，在膜表面覆盖塑料膜。3. 照相4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗，然后加入TMB显色底物显色，看两膜显色深浅有无差别。结果：1. 发光情况30s结果1m30s5m30s20m30s从以上图片可以看出 ...

各位大侠，有个问题比较困惑，在Mascot上检索出来的蛋白并不是一一对应的，而是给出了几类蛋白，那么该如何选择呢？另外我的样本来自小鼠，如果检出的蛋白是（Rattus)的，是不是就不对呢？下面是一个例子，请各位百忙之中忙给予答复，谢谢。1. gi|27691060 Mass: 16225 Score: 67 Expect: 0.025 Queries matched: 7similar to tyrosine 3/tryptophan 5 -monooxygenase activ ...

原核表达将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性 ...

上周送了一个考染的蛋白质点做PMF质谱鉴定，我自认为点取准了，质谱的蛋白量足够，可公司的人说我送去的样品太少，PMF做不出来，但是可以做MALDI-TOF-TOF。没办法，做了一个月的实验不能白做吧！狠下心多加了200元做了MALDI-TOF-TOF。（鉴定一个蛋白质的钱可以买一台三星的17寸显示器了）结果如下：Accession Mass Score Description1. gi|34903780 51933 67 unnamed prot ...