化学生物学实验技术

相关专题 摘要： 琼脂糖凝胶电泳是核酸分析常用的实验技术。虽然很多参考书上均有该方法的介绍El’ ，但实际操作中的一些技巧是无法从书本上获得的，本文介绍r琼脂糖凝胶电泳的实验技巧，这些经验源自多年的研究生教学实践，对初涉分子生物学实验者有一定的指导意义。关键词： 琼脂糖凝胶；电泳；技巧实用预防医学2006年8月 第13卷第4期Practica ...

相关专题 电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（ ...

相关专题 SDS-Page PROTOCOLAdapted from Current Protocols Ch. 10Veena MandavaMaterialsTo Pour Gels:30% acrylamide10% SDS10% APS (make fresh each time)TEMED1.5 M Tris pH 8.8 (res ...

相关专题 一、实验目的1．掌握电泳法分离血清蛋白质的原理。2. 掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。3．测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。二、实验原理带电粒子在电场中向与其电性相反的电极方向泳动的现象称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0～7.3之间，在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷，在电场中向正极泳动。血清中各种蛋白质的 ...

相关专题 【原　理】琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术，可用于分离，鉴定和纯化DNA片段。不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在相同的电泳条件下（如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等），有不同的迁移率，所以可通过电泳使其分离。凝胶中的DNA可与荧光染料溴化乙锭（EB）结合，在紫外灯下可看到荧光条带，籍此可分析实验结果。【操作步骤】1、 ...

相关专题 实验目的：淀粉酶几乎存在于所有植物中，其中以禾谷类种子的淀粉酶活性较强。水稻萌发时淀粉酶活性最强。水稻萌发时淀粉活性的大小与种子萌发力有关。过氧化氢酶也普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定联系。本实验通过对水稻萌发期淀粉酶活性测定以及对幼苗期过氧化氢酶活性的测定，学习和掌握淀粉酶和过氧化氢酶的测定 ...

相关专题 一 、目的：糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件，不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定，可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。二、原理糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物，反应如下：糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质，其在可见光区6 ...

相关专题 目的意义：水稻是重要的粮食作物之一，其品质优劣是值得人们重视的问题。一个高产水稻品种，往往由于食味差、或营养不丰富，而不受大众的欢迎。因此，在保证高产的同时，还要改善稻米的品质。本实验将测定大米品质的几个重要生化指标，为水稻育种提供理论依据。Ⅰ 大米蛋白质含量的测定——考马斯亮兰G—250法一、原理考马斯亮G—250是一种染料，在游 ...

相关专题 一、原理SDS 是一种阴离子表面激活剂，在蛋白质溶液里加入 SDS 和巯基乙醇后，巯基乙醇能使蛋白质分子中的二硫键还原； SDS 能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上，形成蛋白质 -SDS 复合物。在一定条件下，SDS 与大多数蛋白质的结合比例为 1.4g SDS/1g 蛋白质。由于十二烷基硫酸根带负电，使各种蛋白质的 ...

相关专题 一、目的加深理解蛋白质是生命物质基础；掌握半微量凯氏定氮法测定总氮含量原理和方法。二、原理蛋白质是生命的物质基础，是构成生物体细胞组织的重要成分，蛋白质是含氮的有机化合物，是有机态氮的表现形式。样品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的 ...

相关专题 【原理】 对流免疫电泳（counter immunoelectrophoresis，CIEP）是指在适宜缓冲液和电场条件下，抗原和相应抗体在琼脂凝胶中，由于电泳和电渗作用抗原，抗原向正极移动，抗体向负极移动。将抗原放负极端，抗体放正极端，则抗原抗体相向移动，在两孔之间相遇，在比例合适时形成沉淀线。以Sm和RNP（核糖核蛋白）等可提取 ...

相关专题 【原理】 免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带，然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽，将抗体加入沟槽内，使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状，以分析标本中所含组分的性质，本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊断。 【材料】 ...

相关专题 一、目的脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。通过本实验的学 ...

相关专题 一、目的要求1. 了解薄层层析分离和鉴定有机物的原理和方法；2. 掌握薄层层析分离和鉴定有机物的操作步骤。二、基本原理薄层色谱具有设备简单、速度快、分离效果好、灵敏度高以及能使用腐蚀性显色剂等优点，是一种微量的分离分析方法。它可以与光谱或质谱结合起来，是一种很有发展前途的分析技术。薄层色谱是把吸附剂或支持物（如氧化铝、硅胶和纤维素粉 ...

相关专题 一、目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。二、原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还 ...

相关专题 一、目的学习和掌握用26-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。二、原理维生素C 是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。维生素C 能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C 时则会出现坏血病，因而维生素C 又称为抗坏血酸。水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来 ...

相关专题 一、目的植物体内的还原糖主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的分布，不仅反映植物体内碳水化合物的运转情况，而且也是合成其它成分碳架来源和呼吸作用的基质。此外，水果、蔬菜中含糖量的多少，也是鉴定其品质的重要指标。其它碳水化合物，如淀粉、蔗糖等，经水解也生成还原糖。因此，测定还原糖的方法在研究植物体内生理生化变化和测定植物体内碳水 ...

相关专题 IntroductionLuciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters and/or the transfection efficiency.AimsYou will be provided with the HEK293/ ...

相关专题 一、目的学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法，熟悉紫外分光光度计的基本原理和使用方法。二、原理核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（－C＝C一C＝C 一），能够强烈吸收250~280nm 波长的紫外光。核酸（DNA，RNA）的最大紫外吸收值在260nm 处。遵照Lambert-Beer 定律， ...

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