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        总氮含量的测定

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        一、目的
        加深理解蛋白质是生命物质基础;掌握半微量凯氏定氮法测定总氮含量原理和方法。
        二、原理
        蛋白质是生命的物质基础,是构成生物体细胞组织的重要成分,蛋白质是含氮的有机化合物,是有机态氮的表现形式。样品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵,然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即得蛋白质含量。用反应式表示如下:

        三、实验材料、主要仪器和试剂
        1.实验材料
        植物 、动物组织及食品
        2.主要仪器
        (1)自动回流消化仪
        (2)凯氏定氮仪

        图2 微量凯氏定氮蒸馏装置

        3.试剂
        (1)0.1%甲基红乙醇液:称取0.1g 甲基红溶于100mL 60%乙醇中。
        (2)0.1%溴甲酚绿乙醇溶液:称取0.1g 溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中。
        (3)0.2%溴甲酚绿乙醇溶液:称取0.2g 溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中。
        (4)40%氢氧化钠:称取40gNaOH 溶于水中,定容至100mL。
        (5)2%硼酸:称取2g 硼酸用水溶解并定容至100mL。
        (6)0.05mol/L 盐酸标准溶液配制:量取4.5mL 盐酸,加水稀释至1 000mL。
        (7)溴甲酚绿-甲基红混合指示剂制备:量取30mL 0.2%溴甲酚绿乙醇溶液加入20mL0.1%甲基红乙醇溶液,混匀。
        (8)甲基红-溴甲酚绿混合指示剂:1 份(5mL)0.1%甲基红乙醇溶液与5 份(25mL)0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
        (9)其他试剂:无水碳酸钠、硫酸、硫酸铜,硫酸钾均为分析纯

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