酶学实验技术

问：请教肝酯酶的生理功能及其测定方法？ 答：肝脂酶（hepaticlipase或hepatiltriglyceridase或hepaticendothelaillipase，HL或HTGL）属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一，与LPL在功能上有相似之处，然而却是两种不同性质的酶。 其特点是：①HL活性不需要ApoCⅡ作为激活剂；②SDS可抑制HL活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；③主要 ...

问：磷酸二酯酶（phosphodiesterase，PDE）。请教：目前发现的PDE有多少个类型，共多少个亚型。其中阴茎海绵体组织中的PDE主要存在那几种类型及亚型。各种类型主要参与调节cGMP还是cAMP含量？（并给出出处－参考文献） 答：目前磷酸二酯酶可分类为11型，PDE1至PDE11。具体请参考下面文献： ...

问：本人想写一篇关于有机磷中毒的文章，可是胆碱酯酶的测定是用KU/ml来表达，而有机磷中毒的分级却用百分比来表示，其中有换算公式吗？ 答：中毒分级 a. 轻度中毒: 有头晕、头痛、恶心、呕吐、多汗、胸闷、视物模糊、无力等症状瞳孔可能缩小。全血胆碱酯酶活性一般为50%～70% 。 b. 中度中毒: 上述症状加重尚有肌束颤动、瞳孔缩小、轻度呼吸困难、流涎、腹痛、腹泻、步态蹒跚、意识清或模糊。全血胆碱酯 ...

一般也称rennin，因为容易与血管紧张肽原酶（renin）混淆，国际酶学委员会推荐使用此名，即chymosin，亦称rennet，Chymogen，Lab（德语），remnase。是一种蛋白酶，EC3．4．23．4。存在于幼龄的反刍动物的胃液中，很类似胃蛋白酶，但凝乳作用（即酪蛋白→衍酪蛋白的转变作用）远比胃蛋白酶强。分解血红蛋白的最适pH约3.5。随着动物的生长，胃中的凝乳酶减少，为 ...

一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个 50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选 ...