细胞功能测定

方法1、抗体测定：研究对象取200μl新鲜抗凝全血，每管100μl加入流式细胞仪检测管中，再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心，弃上清液，磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline PBS)洗细胞两次，其中反应管加入鼠抗人HLA-undefined02抗体××μl（达科为公司），4℃ 30min孵育后，PBS再次洗细胞，每管加入PE标记羊抗鼠免疫球蛋白2μl ...

配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride 10x Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl 80 gb) KHCO3 10 gc) Na2EDTA 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中;2. 加去离子水定容到10 ...

（1）组织准备：大鼠以10%水合氯醛（0.3ml/100g 体重），或1%戊巴比妥钠约1ml（3～4mg/100g体重）腹腔内注射麻醉，用100ml生理盐水冲洗和150ml 4%多聚甲醛主动脉灌注固定。固定半小时后〕鲎橹椋萌?%多聚甲醛液中后固定4～6h，4℃。　　如要取脑组织，可于灌注后置4℃冰箱内过夜，次晨取脑组织，后固定4℃4h左右。　　（2）组织切片/培养细胞在经过处理，抹以粘附剂的 ...

progress on Study of Techniques for Expansion of Human Hematopoietic Stem Cells　　chem Yongle1Ling Weijun2Peng Dongxian 1(1.Zhujiang Hospital The First Military Military medical Uniuersity.Guangzhou 51 ...

基金项目:本课题受国家“九五”重点攻关课题（96-960A-01-20）和黑龙江省重点攻关课题（G00C190401）资助【摘要】 目的 研究多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外细胞因子激活的NK细胞的支持作用。方法 分别用AIMV及完全培养基培养粘附NK细胞（A-NK）和非粘附NK细胞（NA-NK），比较细胞的增殖能力、杀伤肿瘤细胞的能力、表达粘附分子CD11 c 的能力，并通过电镜 ...

序号 化合物名称 含量 (mg/L) 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 1 ...

美国佛罗里达中央大学的微生物学教授KeithIreton的科研小组发现了致死性食源性细菌一个先前未被了解的的传播机制。 李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）是一种细菌。它会导致怀孕妇女流产，在老年人和免疫系统损伤人群中引起脑膜炎。2002年在美国多个州就爆发了利斯特氏菌病。 ...

1、细胞(cell)细胞是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成 是生物体的结构和功能的基本单位 也是生命活动的基本单位。细胞能够通过分裂而增殖，是生物体个体发育和系统发育的基础。细胞或是独立的作为生命单位 或是多个细胞组成细胞群体或组织、或器官和机体；细胞还能够进行分裂和繁殖；细胞是遗传的基本单位，并具有遗传的全能性。2、细胞质(cell plasma)是细胞内除核以外的原生质 即细胞中细 ...

1. 宿主范围广 对人致病性低 腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞，因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮细胞性，而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外，腺病毒的复制基因和致病基因均已相当清楚，在人群中早已流行（70-80%成人体内都有腺病毒的中和抗体存在）。人类感染野生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症 ...

1. 细胞内同源重组这种方法需要在两个DNA分子之间进行重组，第一个DNA分子(即所谓穿梭载体，shuttle vector)含有腺病毒左侧的反向末端重复序列（LITR）、腺病毒包装信号（ψ）等顺式作用元件以及目的基因表达盒和腺病毒基因组的左端一段序列；另一个DNA分子（即骨架载体，backbone vector）与第一个DNA分子的3′端略微重叠，然后继续向右，包含有大部分的 ...

腺病毒感染细胞的过程是从腺病毒纤毛的头节区粘附到细胞表面的特异性受体开始的。因为人腺病毒主要与柯萨奇B病毒共用一种受体，因此这种受体被称为柯萨奇/腺病毒受体即CAR（coxsackie/adenovirus receptor）。接下来病毒纤毛基底部五邻体表面的三肽RGD与细胞表面的αvβ3和αvβ5整合素结合，通过内吞作用将腺病毒内化到细胞中并进入溶酶体 ...

哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的最佳宿主其优势在于能正确有效地识别真核蛋白的合成、加工和分泌信号，识别和去除基因中的内含子，再经剪切加工成为成熟的mRNA，能准确地完成糖基化、磷酸化，形成链内和链间二硫键及蛋白水解等翻译后加工过程，因而产生的完整抗体和天然抗体一样，具有生物学活性，既可识别抗原又可激活补体系统。哺乳动物细胞易被重组的DNA转染，经过筛选可得到转化的细胞，具有遗传稳定性和可重复性 ...

1从微量培养基平皿中挑取单个菌落，接种于5ml 2×YT培养基(17g蛋白胨，10g Bactoyeast5g NaCl，加水至1 000ml)中，37℃振荡培养过夜。2取上述过夜菌1∶100稀释接种入500ml新鲜的2×YT培养液中，37℃振荡培养至OD=05~07，约25~3h。3将上述带有菌液的三角瓶置冰浴15~30min。4 000r/min 4℃离心20min。4去上清，用500ml预冷 ...

　　测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的，采用不同方法，考虑(1)细胞纯度；(2)细胞获得量；(3)细胞活力；(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。　　(一)　原理:　　常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.0 ...

Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低( 粘度也很小，可形成高达1.3g／ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。不同浓度 ...

大鼠骨髓间质干细胞的分离和培养：取3－4周龄SD大鼠断颈处死，75％酒精浸泡5分钟，无菌条件下取双侧股骨，彻底清除附着其上的肌肉组织，去除两端骨骺，暴露骨髓腔，PBS液反复冲洗骨髓腔至骨髓腔变白，吹打离散细胞，将冲洗液收集于离心管中，1100r/min离心4min，弃去上清及脂肪，加入DMEM培养液6－7ml，重悬细胞种植于25cm2培养瓶中，37℃、5℅CO2饱和湿度下培养，3d后更换培养液，去 ...

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE ...

DH5αF- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169 hsdR17(rk- mk) λ–1. An Hoffman-Berling 1100 strain derivative (Meselson68) 2. nalidi ...

1.从你叙述的情况我分析是percoll的问题，只有分离效果不好时才会出现中间层红细胞的残留。当然你可以全骨髓培养一下，以证明细胞活力的好坏2.我用的percoll的配方：percoll原液：8.5％ NaCl 9：1 －－－percoll稀释液percoll稀释液：0.85％ NaCl 14：11 －－－percoll工作液（可用于分离）注意：两次稀释都要注意混匀，这很关键3.percoll工作 ...

站长注：关于MTT实验的方案已在“MTT配制、原理、操作步骤、结果分析、注意事项等全面指南（配图片）”一文中做了详细说明，为了保证连贯性，这里再将MTT一并简述一下：1、MTT法 MTT：化学名： 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细 ...