细胞功能测定

相关专题 本篇文章主要介绍了采用苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法对细胞染色的实验原理、实验用品和具体实验步骤。 HE染色法 一、原理 苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法，简称HE染色法。 HE染色法采用两种染料即碱性染料苏木素和酸性染料伊红分别于细胞核和细胞质发生作用，使细胞的微细结构 ...

相关专题 细菌是一种形态小、数量多的生物。在微生物实验中，我们经常需要对细菌进行计数，想必大家都数得很不耐烦吧。今天小编将为大家介绍几种细菌计数的实验方法。 细菌计数 1、计数器测定法 即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数 ...

相关专题 本月21日，首个“世界第一批经大规模平行测序技术的胚胎植入前胚胎遗传学诊断/筛查试管婴儿”现身长沙。此次科研成果的主要贡献者为人类干细胞国家工程研究中心主任、中南大学生殖与干细胞工程研究所所长卢光琇。 卢光琇 这成为人类辅助生殖技术领域新的里程碑——积极性优生领域获重大突破，试管婴儿成功率将进一步提高，而婴儿出生缺陷可得到有 ...

相关专题 中国科学院青岛生物能源与过程研究所能源藻类资源团队在研究布朗葡萄藻培养效率方法上获得新进展，研究结果发现基于光能稀释的反应器结构并以生物膜形式贴壁培养将是解决布朗葡萄藻培养效率的重要手段。研究结果发表在"Bioresource Technology"期刊上。 布朗葡萄藻因可合成长链烃，且大部分分布在细胞外壁而易于提取等优点，被认为 ...

细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下：1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素 ...

一、实验准备(一) 实验器械准备1． 玻璃器皿(1) 清洗：新领用的玻璃器皿（包括平皿，玻璃培养瓶，刻度吸管，滴管，离心管等）应先用自来水冲洗后，放入肥皂水中浸泡20分钟，再用柔软的试管刷轻轻刷洗，流水冲净后，晾干后备用。实验用后的玻璃器皿应去除器皿上的胶布，棉花，及时用自来水冲洗，并浸入水中，待进一步清洗（同上步骤）。(2) 泡酸：清洗晾干的玻璃器皿需放入清洁液中浸泡，以去除刷洗不掉的极微量杂质 ...

一．细胞培养技术细胞周期的测定一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法等，这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为 ...

概述细胞培养技术自1907年开创以来，历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的令天，细胞株的冷冻保存和解冻复苏这一基础技术日益得到重视。低温保存是活体组织保存最常用的方法之一。冷冻保存一般是指在0— 196 oC进行保存，就是将体外培养物悬浮在加有或不加冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。主要有- ...

M110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生damdcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响 ...

动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。 批式操作是动物细胞规模培养进程中较早期采用的方式，也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器，将细胞扩大培养后，一次性转入生物反应器内进行培养，在培 ...

物理方法电穿孔(electroporition)显微注射(microinjection)化学方法磷酸钙转染(calcium phosphate transfection)脂质体转染(lipofectin transfection)DEAE葡聚糖介导转染(DEAE dextran-mediated transfection)目前比较常用的方法是脂质体转染，以下我简单介绍一下：转染试剂：Lipofec ...

植物组织培养（ Plant tissue culture ）技术，是 20 世纪兴起的一项植物细胞工程技术。它的基本内容是：从外界植物体上取下任意的一个到几个细胞或者一块组织在全人工的离体条件下进行培养，经过细胞或者组织的分裂、分化及几何增殖达到植株的形态重建和快速繁殖的目的。植物细胞具有全能性，即任何一个植物细胞都具有形成该植物体的能力。换言之，任何一个高度分化的细胞都具有回复到原始未分化细胞的 ...

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测 　　根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。　　1 ...

一、细胞培养基础问答 1.BHK细胞就是指BHK21吗？答：BHK细胞是指幼年叙利亚地鼠肾细胞（Baby Hamster Syrian Kidney），1961年建株。原始的细胞株是成纤维细胞，贴壁依赖性。1963年获得单细胞克隆细胞。后经无数次传代后细胞可悬浮生长，它广泛用于增殖各种病毒，生产兽用疫苗。 最常用的是BHK21的一个亚克隆细胞，即克隆13或C13 。2.二倍体细胞有什么特点？答：二 ...

3.2 加温对支原体污染的治疗效果:经观察发现加温8h后荧光小点开始变少。16h细胞周围支原体几乎消失。进入24h开始细胞周围的荧光小点完全消失但细胞开始逐渐变圆。脱落飞48h大部分细胞已完全变圆细胞正常形态消失培养基中出现飘浮死亡细胞。 　　 　　3.3 多西环素、环丙沙星联合治疗支原体的效果:30μg/ml组和50μg/ml组多西环素和环丙沙星作用细胞24h开始荧光开始减少36h仅 ...

1.固定化动物细胞大规模培养技术2.动物细胞的灌注养方法3.动物细胞无血清培养技术4.动物细胞培养生物反应器前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年其规模开始扩大发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50%。动物细胞大 ...

一、在细胞生物学方面的应用通过细胞培养，可使离体组织细胞在体外能以单细胞和细胞群体的形式进行生长繁殖，这不仅有利于在比较简单的容易观察的条件下研究细胞的形态结构和生理功能，而且可以采用特殊的培养方法和观察手段研究不同细胞特有的功能和生命现象，如细胞转化、诱导分化、细胞融合杂交，细胞对不同病毒、不同药物和不同理化因素的敏感性，不同细胞在不同环境中所表现出的不同功能，如细胞因子分泌、吞噬和杀伤效应，这 ...

磷酸钙转染磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被转染的DNA可以整合到靶细胞的染色体中从而产生有不同基因型和表型的稳定克隆。这种方法首先由Graham和van der Ebb使用，后由Wigler修改而成。可广泛用于转染许多不同类型的细胞，不但适用于 ...

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE ...

1．挑取-20℃保存的DH5а单菌落接种于3ml的LB液体培养基中，37℃160r/min培养过夜（此为一级培养）2．将一级培养菌液接2%的量接种于5ml新鲜LB液体培养基中，37℃，200r/min培养2.5~3.0h，使细菌进入对数生长期。（OD600=0.6左右）3．将二级培养产物分装到1.5ml离心管，冰浴30min.4. 4000r/min离心10min弃上清。5．加750ul0 ...