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细胞功能测定

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基因导入细胞的常用方法

相关专题 目的基因序列与载体连接后,要导入细胞中才能繁殖扩增,再经过筛选,才能获得重组DNA分子克隆,不同的载体在不同的宿主细胞中繁殖,导入细胞的方法也不相同。一、转化  由于外源DNA的进入而使细胞遗传性改变称为转化,早在1943年,Avery等就发现有毒肺炎双球菌的DNA与无毒肺炎双球菌共培养后产生有毒性的肺炎双球菌后代的转化现象。但DN ...

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目的基因克隆的筛选与鉴定

相关专题 目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的,因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA,一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体(recombinant)。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的 ...

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细胞培养污染对策及预防方法

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm概论 §污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。 §一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。 ...

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细胞荧光化学实验

相关专题 一、实验目的1、进—步熟悉荧光显微镜的使用方法。2、初步了解几种常用的荧光染色方法。二、实验用品荧光显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、消毒牙签三、实验原理荧光法较一般光学方法具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,因此近年来荧光组织化学特别是免疫荧光技术有了很大的发展。利用荧光技术可研究细胞内化学成分的分布与定位,研究细胞与组织 ...

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原代细胞培养实验

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm实验目的和要求:掌握无菌操作技术。了解小鼠解剖操作技术。了解原代细胞培养的一般方法与步骤了解培养细胞的消化分散。了解细胞计数方法。了解倒置显微镜的使用。实验原理:原代细胞培养是将机体 ...

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成人骨髓基质细胞体外培养及鉴定

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm王振斌1 艾合麦提·玉素甫1 邹林樾2 刘大鹏1 新医大一附院 1骨科专科医院创二科;2 中心实验室,乌鲁木齐 830054 关键词:骨髓基质细胞 细胞培养 成骨 ...

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乳鼠心肌细胞培养方法详述

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.ht一.材料所需液体:Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液。试剂 Trypsin SDS DMEM 均购于 Sigma Chemical C ...

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细胞培养用液的配制与消毒

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm一、器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤: (1)水的制备: 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他 ...

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神经细胞培养基质总结

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 基础培养基 绝 ...

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培养细胞的冷冻保存与复苏

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm概述 SPallanzani(1776)最早发表了冷“处理”对“细胞”生命活动影响的报道,他用雪冷冻玻璃瓶中的马精子10多分钟之后,再将玻璃瓶放回室温下,发现了一个令人惊奇的现象,那 ...

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植物多倍体鉴定技术

相关专题 多倍体广泛分布于植物界,如普通小麦是异源六倍体,棉花是四倍体,栽培草莓是八倍体等,多倍体产生途径除自然发生外,化学药剂诱导是很有效的途径。不管以何种方式产生,检测、鉴定多倍体就显得很重要和迫切。鉴定多倍体,可采用间接和直接的方法。间接方法包括形态学和细胞学的观察,直接法是直接对试材检测染色体的数目。一般来讲,多倍体植物在形态学和细胞 ...

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人血涂片的制作

相关专题 血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。 涂片法制片是生物显微制片的基本方法之一。 步骤:可分5个步骤进行消毒→取血→推片→染色→观察消毒与取血消毒先按摩取血部位,使血流通畅;再用酒精消毒采血针和取血部位(如指尖)。取血待酒精干后, ...

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光学显微镜的使用与细胞化学成分的分析

相关专题 实验内容 一、显微镜的结构及使用方法 •1、光学显微镜的主要构造 机械部分 照明部分 光学部分 •2、光学显微镜的使用方法 对光 → 置片 → 低倍 → 高倍 → 复原 低倍镜使用 高倍镜使用 •3、使用光学显微镜的注意事项二、酸性蛋白和碱性蛋白 ...

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体内可见光成像技术用于干细胞研究

相关专题 王俊1 张怡2 赵春林1 1龙脉得生物技术有限公司 2中国协和医学院 北京清华大学 学研大厦A304. 邮编:100084导言干细胞在肿瘤治疗、组织工程和细胞治疗等方面拥有巨大的潜力。如果在活体动物体内,在各种组织和器官都保持完整的情况下能够观察干细胞的行为和生物学特性,则会大力促进基于干细胞的各种疾病治疗方法的研究工作。目前已对多 ...

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MDCK细胞培养

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm一、目的 MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员,必须按照本文件相关的操作规程进行操作。 二、适用范围 适用于疾控中心所有技术人员 。 三、 ...

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巨噬细胞吞噬现象的观察

相关专题 一、实验目的1. 观察巨噬细胞的吞噬活动。2. 掌握小鼠腹腔注射给药和脱颈椎处死方法。二、实验原理高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞),专司吞噬作用,为非持异免疫功能的重要组成部分。小鼠腹腔腹腔注射 淀粉肉汤液,可诱导巨噬细胞。三、实验用品1.器材显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸2 ...

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细胞培养室的建立与环境设计

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm细胞培养室是提供细胞生物学研究的基础实验室,有500m2的实验场地,拥有4个层流的细胞操作间、6个普通培养操作间,及配套实验室和洗涤消毒室。主要设备:超净工作台10台,forma细胞 ...

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酸性磷酸酶(ACP)的显示

相关专题 目的要求 1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布基本原理酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。在溶酶体膜稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示 ...

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血涂片的制备和细胞大小的测量

相关专题 目的要求1.掌握血涂片的制备方法;2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态;3.掌握显微测微尺的使用方法。实验原理涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。实验用品1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片 、双凹片( ...

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植物根尖染色体标本的制备

相关专题 目的要求实验原理制备植物细胞的染色体标本,在取材上必须选择细胞分裂较旺盛,而且取材较方便的组织作为实验材料。如植物的根尖。实验用品预处理:切取长约5mm的植物根尖,浸入0.1%秋水仙素中,室温下处理3~6小时将根尖放入1mol/L的盐酸中,60℃水浴,恒温条件下解离10~15min。解离后倒出HCl,水洗2次,每次3~5min。将材 ...

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