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细胞功能测定

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细胞凋亡检测

相关专题 根据调亡的生化特征的检测方法 一、琼脂糖凝胶电泳 1)常规的琼脂糖凝胶电泳 方法一: 1.收集细胞(5×106)1000r/min,离心5min,去上清。 2.PBS洗一次,1000r/min,离心5min,去上清。 3.加细胞核裂解液500μl重悬细胞,50℃水浴,3~5h,不时振摇或37℃过夜。 4.加0.5ml平衡酚抽提,上下 ...

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人的外周血淋巴细胞培养实验

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm一、实验目的 掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。二、实验原理 人外周血液中的小淋巴细胞,几乎都处在G1期(G0期),一般情况下是不再分裂的,在培养液中加入植物凝血素(PA ...

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阻抗与射频技术联合分类法

相关专题   采用这种方法的主要是Sysmex生产NE和SE系列血液分析仪,如SE-9000。此类仪器白细胞分类通过四个不同检测系统完成。 1.嗜酸性细胞检测系统   血液进入仪器后,经旋转阀准确分血2·4μl 加入0·6ml嗜酸性细胞计数的溶血剂,混合,由于试剂特殊的PH,使得除嗜酸性细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整的嗜酸性粒细胞25 ...

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细胞化学染色分类技术

相关专题   染色技术是分类白细胞的经典依据,但瑞氏染色这类形态学复合染色不能被自动分析所模拟。一般光学技术只能测到光强等量的参数,而不能测得波长等属性的参数。因此,自动分类就要求用单染来甄别。  过氧化氢是生物氧化还原反应的最重要氧化剂,在吞噬过程中广泛应用。因此,可以根据细胞过氧化氢酶染色来推断白细胞的吞噬功能强弱,并结合细胞的大小,从而 ...

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细胞的冷冻保存与复苏技术

相关专题 细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养室的常规工 ...

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细胞骨架的激光共焦研究技术

相关专题 下载全文:细胞骨架的激光共焦研究技术.PDF ...

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细胞培养常用设备及实验技巧

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm常用设备 准备室的设备: 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。 配液室的设备: 扭力天平和电子天平( ...

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人类若干性状的遗传特性及其调查分析

相关专题 一 实验目的   1.了解人类一些常见遗传特性及其遗传方式;   2.学会系谱调查及分析的基本方法。 二 实验原理   人是最重要的遗传学研究对象之一,由于许多实验方法受到限制,更不能控制人的生活条件和环境,况且人类世代时间较长,后代个体数很少,以及许多性状遗传的机制也很复杂,人类遗传学的发展相对比较缓慢,对人类许多遗传性状的遗 ...

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细胞骨架的光学显微镜观察

相关专题 一、实验目的   掌握植物细胞骨架的光镜标本制作方法。  细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构,按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1% Triton X-100处理细胞,可使细胞膜溶解,而细胞骨架系 ...

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核酸(DNA和RNA)的细胞核定位观察

相关专题 一、实验目的  1 了解和学习两类核酸显示的原理及操作程序。  2 了解细胞中DNA和RNA的分布。二、反应原理1.Feulgen反应:  DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试 ...

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离心技术与叶绿体的分离

相关专题 一、实验目的   1 以分离叶绿体为例,掌握离心机的操作技术;  2 通过光镜鉴定叶绿体的纯度及了解叶绿体形状;二、离心技术概述  离心技术(centrifugal technique)是根据颗粒在作匀速圆周运动时都会受到一个向外的力而发展起来的一种分离技术。(一)基本原理 离心力和相对离心力  1. 离心力(centrifugal ...

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带有GFP的质膜蛋白分选观察

相关专题 一、实验目的   1.了解绿色荧光蛋白和共聚焦扫描显微镜在细胞分子生物学中的应用  2.学会使用质膜蛋白的分析软件。 二、带GFP的质膜蛋白分选概述1.质膜蛋白的跨膜信号  在粗面内质网上合成的蛋白质有两类:分泌蛋白和膜蛋白,分泌蛋白在内质网上合成之后通过多种信号切除后释放到内质网的腔中,进行下游途径的转运。膜蛋白较为复杂,它要靠疏 ...

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蟾蜍骨髓细胞染色体观察

相关专题 一 实验目的   1.了解脊椎动物骨髓细胞染色体制片的一般方法;   2.观察蟾蜍骨髓细胞染色体的数目和形态二 实验原理  染色体是基因的载体。真核细胞染色体数目和结构是重要的遗传指标之一,制备染色体标本无疑是细胞遗传学最基本的技术。优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。  染色体的制备在原则上可以从所有 ...

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质粒DNA的提取与纯化

相关专题 一 实验目的  1.掌握质粒提取的原理及方法。  2.掌握琼脂糖凝胶电泳的方法。二 实验原理  根据共价闭合环状的质粒DNA与线性染色体DNA片段之间在拓扑学上的差异发展起来的。在pH12-12.5时,线性DNA会完全变性,而共价闭合环状的DNA只是氢键断裂,酸中和后,共价闭合环状的DNA迅速准确地复性,而线性DNA聚合成网状结构, ...

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植物多倍体诱发实验

相关专题 一 实验目的  1.了解人工诱导多倍体的原理,初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的方法。  2.了解植物多倍体细胞染色体加倍的特点二 实验原理植物多倍体:  每个细胞中的染色体数具有3整套或更多套数的植物。随着染色体组倍数的增加,有可能使一些作物的经济性状发生有利的变化。因此,植物多倍体的研究和利用是育种工作中值得重视的途径之一。 秋水仙 ...

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体细胞Barr小体观察

相关专题 一 实验目的  1.学习人类X染色体的检测方法;  2.认识雌性哺乳动物X染色体失活假说和剂量补偿效应的机制。二 实验原理  在XY型性决定的生物个体中,雌性个体的细胞中有两条X染色体,而雄性个体的细胞中仅有一条X染色体。由于两种个体在X染色体的数量上是不相等的,因而雌、雄个体X染色体上的基因产物也可能是不相等的。针对这一现象,Mu ...

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诱变物质对植物有丝分裂的影响

相关专题 一 实验目的   1.了解微核测试的原理和毒理遗传学在实际生活与工作中的应用范围及意义  2.学习黑麦根尖的微核测试技术二 实验原理   微核简称(MCN),是真核生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。在细胞间期微核呈圆形或椭圆形,游离于主核之外、大小应在主核1/3以下。  微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒 ...

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蝗虫减数分裂过程观察

相关专题 一 实验目的   1.通过实验了解高等动物精子形成中的减数分裂过程,观察其染色体的动态变化;   2.学习并掌握制备蝗虫减数分裂玻片标本的方法。 二 实验原理   在高等生物的雌雄性细胞形成的过程中,由有性组织(如花药和胚珠、精巢和卵巢)中的某些细胞分化为孢母细胞(2n),以及精母与卵母细胞(2n)。进一步由这些细胞进行减数分裂,最 ...

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细胞培养注意事项

相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后, ...

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大批量生产干细胞培养基的具体细节

相关专题 细胞培养基的配制 杨等使用的bioreactor实际上是一种组织生长设备(tissue-growing device),能够用于培养成人干细胞,并且能够使研究人员对培养过程中的每个胚胎干细胞进行紧密跟踪。新型bioreactor有两个格室(chamber),一个格室内包含可以支持干细胞生长的高聚物螺纹,一个格室内含有液态培养基。这种 ...

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