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noworrynoworry 请问各位前辈，Pyk2（Pyk2信号通路)有特异性抑制剂吗？哪里能买到？noworrynoworry 拜托各位，帮帮忙啊diwen FAK/ Pyk2 tyrosine kinase inhibitor (PF-562271)http://lifesciences.b-bridge.com/products/detail/1440/PF-562271_FAK;_RTKs_Kinase_Inhibitor不知这个公司有无国内 ...

xying316 站内的各位仁兄仁姐：请问有谁买过上海复蒙的细胞？质量如何，可以给点建议吗？非常感谢！zjubell 买细胞还是去上海中科院的细胞所吧。正规点。xying316 好的，谢谢zjubell本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

miaoduan 如期，我要做wnt通路，欲用licl抑制gsk3β，licl溶液应该拿什么溶剂配置啊（三蒸水？PBS？）谢谢zmz_1 三蒸水可以，不是很容易溶解，然后过滤，一般避光4度保存使用。kailiang 楼主做得怎么样了？我也要做wnt方面的东西，想请教你的LiCl是怎么配的，设定药物浓度梯度的时候是怎么设的，还有楼主做什么细胞系。谢谢！观清 请问，我要做激活WNT经典信号通路，可以用licl抑制gsk3β来激活吗？本文 ...

粘豆包 想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？diving 看到有文章在细胞水平用低氧复氧 感觉是缺血再灌注模型的体现外科长征 我目前正在做johnyeungkc 细胞水平的I/R，我们实验室是通过缺氧/复氧来建立的，装置也是自己用乐扣的盒子自制的，chuckdouble 粘豆包 wrote:想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？调整3 ...

翩pian1 现在想用毒胡萝卜素诱导肝L02细胞内质网应激，但是没看到合适的文献怎样诱导，怎样评估，有没有高手，指点一下啊，感激不尽……yuanyu 我也在做这方面的研究，希望多多交流，互相提高。我的E-mail:fdliang0104@163.combatiwangna Tg不是内质网应激的阳性药吗？直接加进去好了，时间不要太长。因为它会降低GAPDH的表达hongfunv1984 我也是做这方面的，我做的是毒胡萝卜素的类似物， ...

tank1978 请问有人知道什么叫immunoslot blot（ISB）技术吗？ freecell ISB就是狭缝杂交，就是把反应物加到一个长方形的孔内，然后进行混合及显色。通常96孔板上的孔，都是圆的，或者你点个样在滤纸上，叫做点杂交，即dot blot；这种长方形的反应孔内进行的杂交，就叫slot blot。tank1978 学习了。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

lamper 请问大家有会用GenePix 4100A Microarray Scanner这个仪器（http://www.moleculardevices.com/Products/Instruments/Microarray-Scanners/GenePix-4100A.html）的么？因为要做抗体芯片要用到扫描这一步骤，我想请教些问题。很急用，要毕业了，不抓紧毕不了业了。感谢好心人帮忙！请懂这个一起和相关软件的兄弟姐妹联系我，Q ...

星雪qq 大家好，我目前需要做转染细胞的实验，我的目的是构建重组蛋白，重组基因已克隆至表达载体pCEP4,目前需要提取质粒做转染，知道要用HEK293细胞，但是查到293细胞有多种，293，293A，293T，不知道到底用哪一种，大家帮忙出出主意吧，谢谢freecell ATCC上HEK-293，只有一种吧。woxingwosu HEK293T和HEK293A 均为HEK293细胞的派生。HEK: Human Embryonic Kidne ...

hsclgw 用人重组胰岛素来造HepG2细胞的胰岛素抵抗模型好做吗？做完以后仅仅测量用葡萄糖氧化酶法来测量葡萄糖消耗量，就可以判断模型成功了吗?有没有相关的方法比较全的文献借鉴一下？或者用葡萄糖、游离脂肪酸来诱导胰岛素抵抗的文献哪位大侠有吗？看了国内外参差不齐的文献，还是有点晕~先感谢了！！zhuimenzzhiyn 我目前也在做这方面课题，希望可以交流下，我的qq是：330820896，谢谢！小土豆丁 我也要构建胰岛素 ...

美丽小鸟 我现在用肝窦内皮细胞做冷缺血再灌注方面的实验，即模拟肝移植过程对肝窦内皮的损伤。现在建模过程：把肝窦内皮细胞种于96孔板（10%DMEM高糖培养基），待36小时细胞完全贴壁后，把96孔板置于4摄氏度有机玻璃箱中通氮缺氧。问题：此过程只模拟了缺氧、温度（4度），但培养基没有更换。真实肝移植过程是用UW液浸泡器官，而不是10%DMEM培养基。所以我的实验细胞低温缺氧24小时后仍未出现明显细胞死亡，而在肝移植器官冷 ...

伽利略 线粒体中的内参？？？我在网上找到的这个介绍，但是没有更多内容，这个是不是通常被用来作为线粒体中的内参啊http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/439800_Rev1008.pdf谁了解，麻烦说说沈玉琳 线粒体的内参很多啊，我见过的比如complexIV，ABAD啊但是Complex V α subunit好像比较少吧具体能不能建议再看看文献伽利略 谢谢。。。。。。。。。。。本文由丁香园论 ...

linaque 信号通路RhoA/ROCK中，ROCK特异性抑制剂我们一般采用Y-27632、fasudil等，若想研究ROCK活性上调，是否有ROCK特异性的激动剂呢?我查了很多文献都没查到。求助，谢谢！linaque 没人知道吗？急，谢谢！阿兰梦 'Lipid messengers such as arachidonic acid (AA) or sphingosine phosphorylcholine (SPC) are able to efficiently stimul ...

luke_zou full-length 16S rRNA gene sequence与partial sequence有什么区别？zhujoker 就是16s的全场序列以及部分序列luke_zou 请问是否取决于primer？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

llj1985 我构建了一个转录因子表达载体，用了pcDNA3.1(+)基础载体，转染进入293T后免疫荧光检测，发现只在胞质中有表达，不知道为什么，请达人指点！谢谢了devil19840 pcDNA3.1(+)上没有任何标签，你的荧光是什么荧光呢？GFP？如何连接上去的？如果是融合表达很多时候会有GFP的单体泄露表达，而GFP单体大部分就位于胞浆中。所以不如用WB检测一下你的蛋白是否有表达，表达状态如何，最好能用GFP抗体检 ...

zllxash 请问各位研究内质网应激的战友;1、在给予细胞的应激刺激后如何检测细胞的内质网应激程度，有没有一个定量的检测标准呢？2、如何判断内质网应激引起的未折叠蛋白的三条通路激活的判断方法？通过看文献发现有的查的是受体蛋白，有的查的是下游分子，有什么区别？十分感谢！juliyxu 你好，请你帮帮我，关于膀胱癌细胞UMUC3！谢谢您了！请您看到后能否尽快回复我！谢谢了！真的急需帮忙！我给您发站内信息了，急死了！我是华东理 ...

termite42 近期做实验需要用到某一基因敲出或者过度表达的实验小鼠，不知道哪里能够购买到这种小鼠？谢谢各位指教～hebrewwolf 1.首先，问问南京模式动物所，如果那边有的话，很快就能搞定，代价一千块左右；2.其次，上JAX看看，从那边买的话，在有可供应小鼠的情况下，三到四个月可到手上，但代价可能需要3万人名币左右；3.还有，就是找具有这种小鼠的作者要，耗时和代价和从JAX买差不多。4.最后，最不济的方法就是需要自己 ...

feroger 看了很多文献上测p-Rb，用的是actin做的内参，没用总的Rb，这是为什么呢kern6549 怎么能用总的Rb作为内参，看来你没有弄明白什么是内参！feroger 测磷酸化不是要和总的对照吗？像测p-AKT还要同时测总AKT，为什么很多文献上测p-Rb，而不测总的Rb呢？kern6549 为什么一定要和总的对照呢？测磷酸化的和总的意义是不一样的，你想得到哪一种信息就测相对应的一个。测磷酸化的是关心的是活化的有 ...

luke_zou 应用什么软件能将多seq文件转换成fasta文件freecell http://www.insilicase.co.uk/Desktop/SeqToMultiFasta.aspxchenhaombb 直接把txt文件改了文件类型。luke_zou 多谢freecell！）tstsw chenhaombb wrote:直接把txt文件改了文件类型。我一般也是这么改的！daiti 这个软件帮我大忙了！本文由丁香园论坛提供，想了解 ...

西地兰的启迪 PPT的链接http://www.biomart.cn/experiment/430/586/587/30549.htm第十二张中，图片中有很多苹果、梨、柠檬，有些我认识是转录因子，那么这个图是要反映什么意思呢？想截个图在下面的，怎奈学校的网到了晚上真是破啊。。。。期待高手指教，谢谢噢~~~西地兰的启迪 图就是这个样子滴，还是早上的网络好，请大家帮忙看看哦～yuxiongying 说明上下游都受到多种转录因子的调控西地兰的 ...

wzmchxz 求助各位战友：factor-related apoptosis inducing ligand指的是什么，它和TNF-α的关系？感谢您的帮助。kern6549 你这个不完整吧，应该是tumor necrosis factor(TNF)-related apoptosis inducing ligand。这个分子简称TRAIL，与相应受体结合后能够诱导细胞凋亡。目前，诱导细胞凋亡的配体主要有TNF、FasL和TRAIL 3种。wzmchxz 感谢 ...