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细胞周期/增殖/凋亡检测

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细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1、光学显微镜和倒置显微镜 ① 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 ② 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 ...

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miR-95通过抑制Sundefined1基因促进结肠癌细胞增殖

复旦大学附属肿瘤医院黄朝晖博士在导师杜祥教授和上海市肿瘤研究所癌基因和相关基因国家重点实验室何祥火研究员指导下利用基因芯片高通量筛选的方法,找到了影响结肠癌增殖速度的microRNA-miR-95,并鉴定了miR-95的下游靶基因Sundefined1。该研究成果发表在2011年3月的Cancer Research(影响因子8.234)上。基因芯片技术服务由上海伯豪生物技术有限公司/生物芯片上海国家工程研究中 ...

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清华大学在干细胞世系分化研究中取得重要进展

清华大学航天航空学院生物力学所教师杜婧、杨春、冯西桥等人在细胞外基质弹性诱导干细胞世系分化的研究取得重要进展。相关的研究论文“Integrin activation and internalization on soft ECM as a mechanism of& ...

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测定芽殖酵母复制寿命

芽殖酵母被广泛应用于老龄化生物研究中,由于缺少易定量的与年龄相关的表型,酵母老化检测几乎只能通过测量不同环境下细胞的生命周期。

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通过酵母老化细胞的副产物定量酵母时序寿命

酿酒酵母衰老研究中通常使用两种寿命定义:复制寿命和时序寿命。复制寿命是指单个酿酒酵母细胞在死亡之前分裂产生的后代细胞数目;时序寿命是指酵母细胞在未分裂和稳定期的存活时间。本文阐述定量酵母时序寿命的高通量法。

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癌细胞特征:不死性、迁移性和失去接触抑制

癌细胞的特征不死性迁移性和失去接触抑制 癌细胞有3个基本特征:不死性、迁移性和失去接触抑制。当然,癌细胞还有许多不同于其他正常细胞的生理、生化和形态特征。 (一)癌细胞的形态特征 癌细胞大小、形态不一,通常比它的源细胞体积要大,核质比显著高于正常细胞可达1:1,正常的分化细胞核质之比仅为1:4--6。并可出现巨核、双核或多核现象。核内染色体呈非整倍态(aneuploidy) ...

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细胞凋亡:像秋天落叶一样凋落的死亡方式

细胞凋亡(cellapoptmis)是借用古希腊语,表示细胞像秋天的树叶一样凋落的死亡方式。凋亡细胞的主要特征是: ①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体。 ②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有摸封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症。 ...

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胚胎干细胞:胚胎发育早期囊胚中未分化的细胞

当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团(inner cell mas)的细胞即为胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)。人类胚胎干细胞是在人胚胎发育早期――囊胚(受精后约5--7天)中未分化的细胞。囊胚含有约140个细胞,外表是一层扁平细胞,称滋养层,可发育成胚胎的支持组织如胎盘等。中心的腔称囊胚腔,腔内一侧的细胞群,称内细胞 ...

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细胞凋亡的简介和检测

细胞凋亡的简介和检测 细胞凋亡(apopotosis)是指细胞在一定生理和病理条件下,遵循自身程序,由基因调控的主动性死亡过程。细胞凋亡具有重要的生理和病理意义,它是多细胞生物发育和组织平衡的主要机制,并且与肿瘤、神经推行等发病机理有关。许多病理生理因素如自由基、辐射、DNA损伤、剥夺生长因子以及死亡受体和配体作用等都能引起细胞凋亡。常用方法: 1.细胞膜磷脂酰丝氨酸检测法 ...

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细胞膜的凋亡检测的原理

细胞膜的凋亡检测的原理Annexin V-FITC&PI凋亡检测试剂盒 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。在细胞发生凋亡时, ...

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Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡

Hoechst-PI染色法检测细胞凋亡 亚“G1”峰方法简便,但只是代表G0/G1期发生凋亡的细胞,S期和G2期细胞凋亡发生于G1峰后,无法观察。此外,由于全部细胞均经固定,因此不能区别死细胞和活细胞。Hoechst-PI染色则可弥补上述不足。Hoechst 33258 可被活细胞摄取,与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。因此在细胞二维直方图上根据红蓝两种荧 ...

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凋亡细胞对胰蛋白酶和核糖核酸酶敏感性分析法

凋亡细胞对胰蛋白酶和核糖核酸酶敏感性分析法如将活细胞与一定浓度的胰蛋白酶和核糖核酸酶温育,短时间内对细胞的形态、功能和活力几乎没有影响, 但坏死细胞以及细胞浆膜受到损伤的晚期凋亡细胞则可被这两种酶降解,使用流式细胞仪分析,可通过提高光散射、核酸或蛋白质荧光信号的阈值排除晚期凋亡细胞和坏死细胞,测定早期凋亡细胞。【材料与试剂】(1) 含Ca2+和Mg2+的Hanks平衡盐溶液(HB ...

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新型微传感器揭示细胞增殖机制及物理特性

近日由伊利诺大学的电子和计算机工程学以及生物工程学教授Rashid Bashir领导的科研小组利用一种新型的微传感器揭示了细胞质量与细胞增殖率之间的关系,研究结果在线发表在《美国科学院院刊》(PNAS)杂志上。

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HMGB1对肝星状细胞细胞外基质合成的影响

目前认为,HSC的激活是肝纤维化发生发展的关键环节 ,HSC激活的始动因素是肝损伤和炎症反应,而HSC激活的过程包括早期启动激活和后期“持久化”激活,激活的“持久化”是维持HSC激活状态及产生ECM的必要条件。

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恢复生殖细胞或有助于改善女性的生殖力

一种哄骗女性的正常休眠的生殖细胞进入活跃状态的方法可能让科学家帮助衰老的女性或者在接受癌症治疗之前冷冻了卵巢的女性生育子女。

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SH2B对生长、代谢和寿命调控的功能进化

《细胞-代谢》(Cell Metabolism)杂志近日发表了中科院上海生科院营养科学研究所刘勇研究组和中科院海外糖尿病研究团队成员-美国密歇根大学芮良优教授的最新合作研究成果,揭示了信号接头蛋白SH2B1对生长发育、糖脂代谢和寿命的调控作用和机制,提示从低等动物果蝇到哺乳动物小鼠的进化中SH2B在特定调节功能上具有保守性。

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细胞凋亡实验步骤及注意事项

凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合,是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡具有可鉴别的形态学和生物化学特征。

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凋亡和细胞周期调控相关基因的应用

使用RealTime ready Focus基因检测预制板进行凋亡和细胞周期调控相关基因对于siRNA的应答鉴定。

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细胞增殖检测新技术——EdU 取代BrdU

直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物——BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期,和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中,再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合,就能够检测到DNA复制活跃的细胞。

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过氧化物酶标记测定法检测细胞凋亡

脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。

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