细胞周期/增殖/凋亡检测

玛利乐乐 最近做某种抑癌基因促进肿瘤细胞凋亡，做了western检测，caspase3，8，9，fas，BID，cytc，发现fas上调，caspase8，3下调，说明fas通路活化；BID下调，caspase9下调，我觉得应该是caspase8通过BID裂解激活线粒体通路，但是测cyt c却是下调，按理应该线粒体通路激活引起cytc释放，应该增多才对啊，这样解释不通，请高手指教是哪里的问题呢？可以不考虑cyt c吗？那怎么解释 ...

roy2929 小弟新手 实验等等都不怎么懂，希望高手们帮忙。做TUNEL检测凋亡，除了本身没有发生凋亡和实验操作原因，还有什么可能会没有信号？比如通过其他不能用TUNEL检测到的方式发生了凋亡？不胜感激qwer_214 TUNEL是一种很特异的检测凋亡的方式，它主要检测DNA特异性的断裂，恕我资历比较浅，我到目前还没有发现其他用TUNEL检测到的方式发生了凋亡。roy2929 qwer_214 wrote:TUNEL是一种很特 ...

myskite 实验证实，某个miRNA促进细胞凋亡（casp3升高，bcl2降低）。我看pubmed上这方面的文献，都是，miRNA抑制了凋亡通路的某个基因，导致促进或抑制凋亡。可是，我做的这个miRNA，经过预测，并不调控凋亡通路上的任何一个基因。我该怎么办呢？zhangshukui 参考下这篇文章MiR-25 regulates apoptosis by targeting Bim in human ovarian cancer。还有就是你选择的是m ...

295546 如题。。。我看有些人说是断裂成200bp的片段，是否有人做过断裂时的长度特性？断裂点的偏好性？我很迷茫，如果是双链断裂 结构是怎么样的？是粘末端吗？多少碱基的粘末端？如果是单链断裂，有什么特性？还是两者都有？频率多少？大家如果可以，发点文献给我看一下，谢谢！yzbsmsz http://hi.baidu.com/namevirus/blog/item/a1e07905d5195462030881f6.htmlhttp://w ...

馃芝 求高人指点一些关于细胞凋亡的文献，最好是研究进展方面的，谢谢belovedf 细胞凋亡，好广的范围，最近我也在关注这方面，因为我的导师的方向之一也是细胞凋亡。问到我具体的研究方向就把我问倒了。昨天听了丁树哲教授有关运动适应的信号传导研究进展，其中有涉及一些细胞凋亡信号途径http://news.dxy.cn/bbs/topic/18108752?tpg=1&age=0抗凋亡诱导抗肿瘤请问您是体外培养细胞，研究细胞凋亡，还 ...

cpuyao 请教大家一个问题，我在药物处理后测定细胞的周期，随着药物浓度的增加，G2/M期比例增加（明显，浓度依赖），S期几乎没有变化，而G1期比例减少。是不是说明细胞阻滞在G2/M期？但是G1期和S期的现象怎么解释呢？随后我们测了凋亡，证明药物可以促进细胞凋亡，这些需要怎么联系到一起呢，第一次做，有好多不明白的地方，希望研究周期和凋亡的战友们帮忙分析一下，有没有哪些相关的文献？谢谢大家~xiaohuilang 细胞周期被 ...

bin1986 最近在做凋亡，在用凯基的caspase-3分光光度法试剂盒检测细胞经过与药物孵育24小时后检测用酶标仪检测，OD值在0.1-0.3之间，有一定浓度依赖，高浓度下caspase-3的活化程度有差不多4问题在于，我用BCA蛋白定量得到的蛋白浓度时30多ug/ul，我加了有250ug，如果按照说明书的话，这个OD值应该在1左右，而我的最高才0.3.另外我的control孔（没加药）与我最低浓度的值差不多。问题 1. 我 ...

yuanyuan_626 想问一下我想研究一种细胞的过度凋亡是不是与AKT/PKB 下调有关，那我检测一下AKT 的 mRNA，及AKT ，P-AKT 的表达量，这样的思路有没有问题？我是一只小菜鸟，还没开始做实验，最近看这方面的文献看的脑袋混乱了旁观者清，请大家帮我分析一下有没有可行性小妹在此谢过了yuanyuan_626 这个想法行不通吗？求指教rarazhuzhu 谈谈我的看法楼主想要验证细胞凋亡途径中是否有Akt/PKB参与首先要确 ...

vera21173 我研究的是一个基因对肿瘤细胞增殖的影响，上调这个基因的表达可以促进细胞增殖（CCK-8和平板集落形成实验的结果一致），下调这个基因的表达可以抑制细胞增殖。但有平板集落形成实验有一个奇怪的现象，稳转这个基因的细胞集落形成数量明显比空载细胞多，但集落大小比空载细胞小很多，镜下观察发现空载细胞形成的集落中的细胞很分散，而稳转目的基因的细胞集落中细胞很紧密。请问这能说明什么问题？zhouyongchu ...

hedashan 实体瘤做细胞周期分析有意义吗？我想做中药抗肿瘤的体内实验，观察药物对细胞周期有无影响，疑问是取移植瘤的一小部分做细胞周期分析能代表整个瘤块的增殖状况吗？急，万分感谢！hedashan 补充一下，是小鼠Lewis肺癌移植瘤zhujoker 原代培养是可以的hedashan 谢谢！我是菜鸟级的，对分子生物学不了解，从通常的观点看，实体瘤中（小鼠Lewis肺癌移植瘤）细胞的增殖是非同步的（好像有的书中说恶性肿瘤细胞 ...

cdduanshui 请教各位大虾一个问题：胞质分裂失败的细胞能存活吗？有说能活的，也有说不能活的，因为很多肿瘤细胞都是多核的，通过抑制胞质分裂来抑制肿瘤生长可行吗？请大家不吝赐教，谢谢。lincky2011 关键是看你的细胞的性质而定的！cdduanshui 肿瘤细胞zhujoker 这的确取决于你的细胞系以及细胞的特性，不是所有的肿瘤细胞一概而论。但是作为肿瘤细胞，一般胞质分裂失败不会影响其生存，因为其异质性的特点很显著。 ...

huangdde 如血管内皮生长因子（VEGF）与其受体（VEGFR）结合后，会刺激细胞增殖，如下现象是否可以出现：某种物质与VEGFR结合后，该物质会通过VEGFR而抑制细胞增殖？谢谢。holywater 一般来说受体结合是比较特异的，但是可能和结构类似的东西结合而促进或者抑制受体的活性，这也是竞争性抑制剂的来由。不过抑制剂不是“配体”，所以我说楼主的定义可能有些错误。huangdde 谢谢。哪请问：同一种物质，是否可以与不同 ...

pangpangfish 小弟欲检测T细胞的端粒长度，以对比分选细胞寿命优势，鉴于经费很有限，请各位老师指导选择适宜的检测方法，主要是费用低，又比较容易实现的，先谢谢了。pangpangfish 补充一下，是小鼠的T细胞yxunm 楼主的问题解决了吗？能否告诉我有哪些备选？楼主最后选择了哪一种？P.S.实验室新手，菜鸟一只！有劳楼主！jackhui03 你好，我也想测端粒长度以及端粒酶活性，请问你找到方法了吗shylook jackh ...

neuroclong 谁能告诉我一下casepase-independent cell death有哪些，查了相关文献查不到，我写东西到最关键的地方，就是差找个了，急啊急，有哪个高人给我讲一下吧kern6549 个人意见，仅供参考：caspase-dependent cell death应该指的就是凋亡吧。那么caspase-independent cell death可能就是除了凋亡外的细胞死亡，如坏死，自噬等。neuroclong 当然是凋亡 ...

ontheway361 最近的实验想从细胞中提取RNA，然后进行逆转录PCR从而测定细胞中bcl-2的表达，进而探讨凋亡的机制。可是该过程中遇到一棘手问题：我对细胞进行干预后，按照trizol试剂盒提取RNA说明，加入trizol液之前要先吸去培养液；然而，此过程中肯定不可避免地将凋亡细胞吸掉了，那么请问各位前辈，这样做的话是否会影响后续结果，从而影响对RNA表达的误判呢？还有一点，请问bcl-2，caspase-3 ...

tianlang126 :(:(新手最近想做细胞自噬，想知道beclin1在自噬中起个什么样的作用？是不是表达beclin1就可以认为细胞发生了自噬？它和凋亡、坏死、炎症等有什么关系？它是通过什么信号通路起作用？希望各位大虾解解惑:8):8)李一晶晶 你好，目前我也在做， 请问你做pcr没有啊，187338186，我的QQguodanni tianlang126 wrote::(:(新手最近想做细胞自噬，想知道beclin1在自噬中起个什么 ...

刘淼清 在园中看到关于LY294002和Wortmannin区别。（建议用LY，主要原因有两个，一，Wortmannin相对来说要贵好多；二，更重要的，Wortmannin半衰期很短，如果没记错的话大概只有8－10小时，所以如果处理时间久的话，药物浓度下降很快。有篇文献研究了Wortmannin的半衰期，有兴趣可以去查查看，应该是2005年的文献。 ）这篇文献不知有哪位战友知道。第二 LY294002的半衰期是多少？？？yxj3 ...

mccanny 如题，谢谢mccanny 再次求助kern6549 说明细胞增殖增加。ze_quan kern6549 wrote:说明细胞增殖增加。晕，要结合具体细胞生长效应吧俺的也是s期细胞增多，但是抑制增值的，只能说阻滞在S期了吧，具体原因在找找信号通路吧迷者的悟 我的也是。。。不知道怎么回事。。药物处理后细胞S期增加明显。。。G1 G2期变化不明显。。不知道是何原因。。文献该药物可将癌细胞阻滞在G2期。。。希望高手能够解释一下。。作用时间问题 ...

zgdlxy 想问一下大家，有没有哪个蛋白在一个细胞系中起正调控作用，在另一种细胞中则起负调控作用？比如在正常细胞中诱导凋亡，而在癌细胞中抑制凋亡。chuckdouble 很多~~~~~~~ylhuang0502 chuckdouble wrote:很多~~~~~~~例如...??期待ing!chuckdouble ..............................ylhuang0502 LS的搜索结果显然不是LZ所言的某个蛋白在一个细胞系中起正调控作用，在另一种细 ...

yfsm 最近想买TUNNEL凋亡试剂盒，代理商分别给我推荐了Roche和Promega公司，以前没做过心理没辙，想请各位专家帮忙分析一下，非常感谢！xiaoluks 我想做TNNEL，罗氏的给你报价多少钱啊，楼主想买哪个货号的，如果好的话我也买一样的，呵呵，我也是没做过的，不过当时师姐有用DAB显色法做的，是用的罗氏的试剂盒，质量挺好的，不过我想用荧光的，楼主有什么意见？woxingwosu 我们用Roche，还可以。pro ...