细胞培养

原来是担心细胞状态不好，所以是分别从两个地方要来的细胞，做这个细胞的分化做了小半年，一直在换各种诱导方法，怎么都诱导不起来，细胞只是一个劲儿疯长，怎么都不分化，诱导方法和细胞密度都做出个矩阵来，都找不到合适的条件。 后来一咬牙直接去购买了一株，做了两次就做出来了。 总体来说： 1. 定要用代数低的细胞，有条件就购买好了，几百一株，不贵； 2. 是诱导密度最好 ...

一、常见的污染如下： 1. 细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗 ...

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

简介 细胞培养的成功很大程度上取决于保护细胞免受细菌、真菌和病毒等微生物的污染。非无菌物品、培养基和试剂、带有微生物的空气颗粒、不干净的培养箱和污染的工作台面均是导致微生物污染的来源。 无菌技术的作用是在环境微生物与无菌的细胞培养物之间形成一道屏障，它通过一套操作流程来降低培养物被上述污染源污染的可能。无菌技术的组成要素包括：无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操 ...

除了大多数日常工作场所共有的一些安全风险例如电击和火灾之外，细胞培养实验室由于要操作和处理人或动物细胞和组织以及一些有毒、有腐蚀性或者有致突变性的溶剂和试剂，因而还具有一些特殊的危险。其中，最常见的一些危险包括：注射器针头或者其他污染锐器刺伤、液体泼溅到皮肤和粘膜上、经口吞入毒物以及吸入感染性气体挥发。任何生物安全程序的基本目的都是为了减少或避免实验室工作人员和外部环境与潜在危害性生物物质的接触 ...

什么是细胞培养？ 细胞培养是指从动物或植物中取出细胞，然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离，或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。 原代培养 原代培养是指将细胞从组织中分离后，使其在合适的条件下增殖直到占据所有可用基质(即：达到汇合状态) 的培养阶段。在此阶段，必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基，从而对细胞 ...

1. 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2. 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含 ...

1、如果细胞状态不好，可能是消化或者培养基的原因，细胞胞浆会出现空泡，一旦出现过多，细胞基本不能用。 2、心肌细胞不能传代。 3、心肌细胞有聚集生长的特性，培养时间长点，一般超过4天后，细胞会聚集成小岛状，以小岛为中心搏动，当然有小岛说明细胞密度较小。 4、心肌细胞的状态与细胞密度有很大关系，一般细胞密度越大，心肌细胞相对来说越容易长好，达到同步搏动的时间也快。 5、心肌细胞同步搏动不难 ...

众所周之，每次给细胞换液体的时候都需要把细胞拿出来，然而就这一拿，“学问”就在里面：我们要尽量缩短细胞在培养箱外面的时间，尽量增加细胞在最适环境中的时间。 换液流程： 1.将培养基放在37度水浴锅内，准备好废液缸、吸管、酒精棉球，干棉球，在超净台上，将照相机放在显微镜旁边，然后开超静台紫外，开培养室紫外，开培养室风机，空调。 2.30 min后 ...

养细胞是医学研究生的基本功。我养过骨髓MSC、心肌细胞、心肌成纤维细胞、AD293腺病毒包装细胞、PA317逆转录病毒包装细胞。养得最多的是MSC。有三个小经验和大家分享一下： 1. 不要烧瓶口 大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的 ...

一、常用设备 1. 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品柜（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 2. 培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实 ...

一、实验试剂 10% (v/v) Household Bleach Callus Induction Medium Gamborg's B5 Basal Medium 0.5 g/liter MES pH 5.7 0.05 mg/liter Kinetin 0.5 mg/liter 24-dichlorophenoxyacetic Acid (24-D) 0.8% (w/v) Agar ...

按现代的观念，凡是混入培养环境中对细胞生存产生有害的成分和造成细胞不纯的异物都应该视为污染。根据这一概念，组织培养污染物应包括生物（真菌、细菌、病毒和支原体）、化学物质（影响细胞生存、非细胞所需的化学成分）、细胞（非同种的其他细胞）。其中一微生物最为多见。另外，随着使用细胞种类增多，不同细胞交叉污染，尤其是Hela细胞的污染也时有发生，从而造成细胞不纯。 1. 污染途径 ...

一、 培养细胞的细胞生物学 1. 基本概念通常，体外培养的生物成分无外乎两种结构形式： 其一是小块组织或称为组织块（tissue block），一般称为外植块； 其二是将生物组织分散后制成的单个细胞，一般称为分离的细胞(isolated cell)或者分散的细胞(dissociated cell)。 分散的过程通常在培养液或平衡盐溶液中进行，分散的细胞被悬浮于培养液或平衡盐溶液中。 ...

1. 如何选用特殊细胞系培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 2. 何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 3. 可否使用 ...

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队历经3年的研究与开发，利用水稻种子表达出多功效的重组人碱性成纤维细胞生长因子。相关论文 “Expression of a Functional Recombinant Human Basic Fibroblast Growth Factor from Transgenic Rice Seeds”( ...

1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。 2、Minimum Essential Medium（MEM） 也 ...

微载体培养技术（micro-carrier culture technique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认最具发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，且容易放大。该技术已广泛用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。 一、 微载 ...

动物细胞培养技术在生物技术领域起着重要的作用。它在生物医药领域、细胞工程、酶工程等领域中都是不可缺少的工具。 培养基是人工配制的满足细胞生长和维持的营养基质。培养基的发展大致经过3个阶段：天然培养基阶段(直接采用某些组织凝块、生物性液体和组织提取液等作为细胞的培养基)，合成培养基阶段(如DMEM、RPMl 1640等)和无血清培养基阶段。合成培养基通常需在其中添加一些诸如血清(常用 ...