细胞培养名称:新生大鼠皮质星形胶质细胞培养 组织来源:种属:大鼠 年 龄:新生1天-2天 取材部位: 皮质 选用的酶:0.125%胰酶 消化时间:37度15min 注意事项:胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存,用时解冻,37预温1min,以保持胰酶好的活性,消化时每隔5min轻轻摇动消化组织。 细胞培养名称:成年大鼠室下区星形胶质细胞培养 组织来源:种属:大鼠 年 龄:成年2.5月零 取材部 ...
一、酶消化法。 1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。 2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温 ...
【摘 要】目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取1~5d Wistar乳鼠脑皮质经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,7~9d呈典型的铺路卵石样征象。结论:建立了一种简便易行的培养脑皮质微血管内皮细胞的方法。 【关键词】 细胞培养;微血管内皮细胞;Wistar大鼠 脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障的主要成 ...
摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养 待细胞铺满瓶底时 用01125%胰酶20102%EDTA 消化 离心收集内皮细胞 进行传代培养。原代、传代各取8 例 吸取培养液用酶联免疫吸附试验测试TPA 活性。 结果 经&ET ...
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 (4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率 ...
巨噬细胞培养 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。 培养巨噬 ...
丁香园网友xxxdada的观点为: 1、我取脑的时候是用双镊,先用一把夹住头部,另一把在人状缝下面撕开,要特别小心,别弄出血来,因为出血的话取出的脑组织含血块就会比较多,离心的时候可以看出来,不知各位同仁有没有更好的方法。 2、尽量去除脑膜和血管,PBS清洗干净,胰酶消化37度10-15分钟消化中止按每10ml胰酶加1ml血清。 3、玻璃培养瓶差速30-40min过滤75-100um滤网,种植,其 ...
丁香园网友clellwei的观点为: 原代椎间盘细胞培养其实并不太难,但培养时间相对较长,所以容易出问题。 1、选材很关键 选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些,可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时(一般选择手术摘除的椎间盘),患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大,间盘退变很严重,培养的难度相应增大。20-50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行 ...
第一章细胞培养的基本原理与技术 现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来 ...
前言动物细胞培养开始于本世纪初 1962 年 其规模开始扩大 发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法 利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等 已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50% 。 动物细胞大规模培养技术是生物技术制药中非常重要的环节。目前 动物细胞有悬浮培养和贴壁培养. ...
BacteriaBacteria (cocci) @ 320x magnification. In this example the cells are the larger refractile bodies while the bacteria appear as very small dark "dots" in the spaces between the cells. ...
一、培养方法 如下图所示即为大鼠原代足细胞 按顺序:1,2是培养7天传代前的图片,小球周围爬出很多细胞。3,4是传代第二天细胞情况,过筛后仍有小的组织虑过。5,6是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展,好多图片制作不理想,后续的细胞免疫荧光坚定在做,失败过两次,出结果后再发,不过老板说了就是足细胞!1 2345 过 ...
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。 我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代,16天后第二代,22天后第三代,并做a-actin免疫细胞化学鉴定。附图片。 ...
ACDP Advisory Committee on Dangerous Pathogens BSA Bovine Serum albumin BSE Bovine spongiform encephalopathy BVDV Bovine viral diarrhoea virus FBS Fetal bovine serum EC European Community ECACC ...
1.Basic Techniques - The “Do’s and Don'ts” of Cell Culture Given below are a few of the essential "do’s and don’ts" of cell culture. Some of these are mandatory ...
1.Cell Culture Scale-up Systems Most tissue culture is performed on a small scale where relatively small numbers of cells are required for experiments. At this scale cells are usually grown in T flask ...
1.Authentication Techniques Whatever the scope of work to be carried out it is important to know that the work is being conducted using the correct reagents. This is no less important for cell culture ...
Introduction Quality is important in all aspects of tissue culture since the quality of materials used i.e. media and other reagents) will affect the quality of the cultures and products derived from ...
It is bad practice to maintain a cell line in continuous or extended culture for the following reasons:~undefined Risk of microbial contamination ~undefinedLoss of characteristics of interest (i.e. surface antigen or ...
1.Cryopreservation of Cell Lines The aim of cryopreservation is to enable stocks of cells to be stored to prevent the need to have all cell lines in culture at all times. It is invaluable when dealing ...