细胞百科

摘要：据文献报道c2erbB22可以介导细胞凋亡 为检验这一结论是否具有普遍性 用52氟尿嘧啶(52Fu) 诱导小鼠成纤维细胞NC3H10 TC3H10及人乳腺癌细胞MCF27的凋亡. 用Northern印迹法检测c2erbB22的表达状况1结果显示: c2erbB22基因表达在52Fu 作用6 h 开始降低 12 h降低更为明显. 作用24～ 48 h 出现细胞存活率下降DNA 梯状断裂及细胞周 ...

新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京　100083) 细胞因子;凋亡;CKLF1 ; PDCD5 ; TFAR19 在人类基因组完成工作框架图以后人类功能基因组学成为最重要的任务之一。我们目前正在重点研究编码细胞因子和凋亡相关分子的人类功能基因。本综述介绍其中的2 个首先由我们实验室克隆的分子即趋化素样因子1 (CKLF1) 和程序化细胞死亡分子5 ( ...

陈钟，丁义涛，南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科 江苏省南京市 210008 张鹤云，南京大学生化系 江苏省南京市 210093陈钟，男，1963-07-04生，江苏省靖江市人，汉族.1983年南通医学院医疗系本科毕业，1988年南通医学院外科硕士研究生毕业，1999年南京大学医学院肝胆外科博士生，副教授，副主任医师，主要从事肝胆外科及生物人工肝研究.江苏省卫生厅重点发展项目基金资助 ...

1、目的 临床上为红细胞增多、贫血或贫血的鉴别诊断提供依据。 2、适用范围 　本法适用于人体血液中红细胞的测定。 3、职责 检测人员：负责按照本检测细则对样品进行检测。 复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核。 科室负责人：负责对科室综合管理和检测报告的签收。 4、主要仪器 　OLYMPUS显微镜 5、方法及操作过程　 5.1稀释液的配制：NaCL1.0g、Na2SO4·10 ...

内分泌干扰物诱导睾丸生精细胞凋亡的研究进展王　晟　综述; 秦达念　审校(汕头大学医学院生理学教研室 广东汕头515031)摘要: 睾丸生精细胞存在着自发性和化学物质诱发性凋亡。现代工业造成大量污染物涌入环境中 而这其中许多物质被证实具有生殖毒性能够影响机体的生殖和发育。这类污染物被归属为内分泌干扰物( EDCsPEDs) 。研究EDCs 所诱导的生精细胞凋亡将丰富和拓展其甄别的依据及其途径并对作用 ...

凋亡相关蛋白TFAR19 在TF21 细胞凋亡中出现细胞核转位陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京　100083) TFAR19 ; TF21 细胞;凋亡;核转位;核蛋白类 目的:探讨凋亡相关分子TFAR19 在TF21 细胞凋亡过程中的表达及定位。方法:以TFAR19 的单克隆抗体为工具采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段观察细胞凋亡 ...

一、 目的与要求1. 掌握用血球计数板进行细胞直接镜检计数的方法。2. 学习测量细胞大小的方法。二、 实验原理动物组织细胞的体外培养、血液中血细胞数量的变动、许多产品的细菌学检查、微生物培养等科研、生产和临床上常常需要检测细胞的数量。测定细胞数量的方法有很多种，其中，用血细胞计数板于显微镜下直接计数的方法样品用量少，操作简便、快速、直观，是一种较常用的细胞计数方法。血细胞计数板由一块长约7.5cm ...

一、原理 生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面，主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。 二、操作步骤 (一)拍摄前准备 1．光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。 2．柯勒氏照明 使观察的视野获碍均匀而又充分的照明；防止杂散光对照相系统产生影响；使被摄物体不受热，影象清 ...

基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于75%乙醇中的盖玻片； 含血清培养基（通常为 RMPI 1640含10% 小牛血清，100U/ ...

一、原理 扫描电镜用于观察标本的表面形态。用戊二醛和锇酸处理的染色体标本，经单宁酸(或硫卡巴肼)还原可获得较好的导电染色效果。在扫描电镜下可观察到染色体的三维结构，也可用于常规染色体核型、G带染色体核型、高分辨染色体核型的分析及染色体结构异常识别，以弥补光镜的许多不足。在扫描电镜下还可清楚地观察到肿瘤细胞癌基因扩增结构—双微体。因而此方法广泛用于细胞生物学和遗传学的许多研究。 二、染色 ...

基本原理： 在长期的细胞培养过程中可能会出现微生物污染或基因型改变等情况，会导致具有优良特性细胞系的丢失。为防止这些细胞的丢失，细胞可以经快速冷冻并几乎无限期保存在非常低的温度下，如液氮（-176℃）。试剂和设备：冷冻液: 90%灭活血清+10%DMSO（或甘油），用0.45μm微孔滤膜过滤除菌，4℃保存； 培养液； 台盼蓝溶液（0.4%溶解于PBS）； 70%乙醇； 组织培养瓶； 15-50 ...

1. 原理： 1.1. 计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 1.2. 血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber 中细刻9 个1 mm2 大正方形，其中4 个角落之正方形再细刻16 个小格，深度均为0.1 mm。当chamber 上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1 mm2 x 0.1 mm=1.0 x 10-4 ml。使用时，计数 ...

液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌E.COLI_DH5_JM109HB101等在LB平板上划线37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落可多个 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升锥形瓶的SOB培养基. 培养基量不可再多会影响效率.在18度 150-250RPM 培养19-50小时没有冷却摇床的可在室温 但不可高于37度.OD600约0.4-0.8时停止培养 放在冰水中冷却10分 ...

1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。 2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1m ...

1．1M Tris 溶液的配置 取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。 2．1M Tris－HCL Ph=8.0溶液的配置 取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0（需浓盐酸约8.5ml），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。 3. 0.5M EDTA溶液的配置 称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml N ...

高MOI（ Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值）感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP（Defective Interfering Particles，即只包装入部分基因组的病毒颗粒）的形成，因为关心的是细胞或者培养液中的蛋白；二是高MOI感染是最便于控制、重复性好的方法，以达到高的蛋白表达水平。 低MOI感染也可用于生产 ...

1．按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。2．吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。3．每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养4小时。4．每孔加90μl终止液，混匀后置酶联检测仪上测定光密度（OD）值，检测波长402nm。以OD值对样品稀释度作图，比较标准曲线和待测样品曲线即可求得待测样品中细胞因子的含量。 ...

【实验目的】 通过标本制备和观察了解生物体细胞的无丝分裂、有丝分裂形态特征及生殖细胞的减数分裂过程。 【实验用品】 一、材料和标本 蛙血涂片、马蛔虫子宫切片和洋葱根尖切片、固定的蝗虫精巢。 二、器材和仪器 显微镜、擦镜纸、解剖针、眼科镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、培养皿、冰箱。 三、试剂 Carnoy固定液、70％乙醇、醋酸洋红染液、45％醋酸、二甲苯。 【实 ...

一、原位缺口翻译检测裂解的DNA片段1．取106经促调亡物质处理的细胞，用1％ BSA-PBS洗涤细胞后加入0.1ml FITC标记的抗CD4或抗CD8单克隆抗体，4℃ 20分钟。用1％ BSA-PBS洗涤细胞。置冰上。2．加入0.1ml 1％多聚甲醛，置冰上5分钟，加入60％（v/v）甲醇溶液，轻轻悬浮细胞，4℃固定细胞15分钟。4℃离心500×g 10分钟，去上清液。3．加入0.1ml 0.1 ...

感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说，悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售，比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Systems等，用起来都不错，尽管由于细胞株和目的蛋白的不同，效果有所差异。 最好是将目的蛋白和细胞株用 ...