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细胞百科

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细胞培养[cell culture]

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动 ...

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细胞培养常见问题与解答

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养常见问题与解答2.pdf 将本文分享到下面的网站: 更多 ...

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细胞培养实验用品

1. 种类1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌制品。1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask plates dishes roller bottle 等,依实验需要使用。1.3. plastic sterile pipet: 1 ml 2 ml5 ml 10 ml 25 ml1. ...

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细胞培养无菌操作基本技术

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm1)实验前无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌用70% 酒精擦拭无菌操作台面并开启无菌操作台风机运转10分钟后才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞以免造成细胞交叉污染.实验结束后将实验物品带出工作台.如需要继续进行下一个实验则用70 ...

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肌组织细胞培养

骨骼肌细胞培养1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,常用Hanks液配的0.01%明胶。肌细胞培养1.选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以 ...

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细胞培养环境

1 实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响要求工作环境清洁空气清新干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧常规操作和封闭培养于一室而洗刷消毒在另一室.2 常用设施及设备(1)超净工作台:也称净化工作台分为侧流式直流式和外流式三大类.(2)无菌操作间:一般由 ...

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细胞培养常见问题及其解决方法

1. 如何选用特殊细胞系培养基?培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2. 何时须更换培养基?视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。3. 可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞 ...

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细胞培养基种类与基本成分

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位.不同种类的细胞对氨基酸的要求各异但有几种氨基酸细胞自身不能合成必须依靠培养液提供这几种氨基酸称为必需氨基酸.其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸在缺少谷氨酰胺时细胞生长不良而死亡.因此各种培养液中都有较 ...

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血清热灭活―浪费时间?

血清热灭活―您是否在浪费时间?血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子,氨基酸等成分带来的负面影响,在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活,下面我们就对胎牛血清的热 ...

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动物细胞培养与观察

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养是将器官、组织或细胞从生物机体中取出,模拟该器官、组织或细胞在机体内的生理条件,在体外进行培养,使其能够继续生存、生长和繁殖。一些研究结果表明,许多种类的动物或植物的细胞都能在人工培养条件下生存、生长和繁殖。现代的动物细胞培养始于美国动物学 ...

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光学显微镜的使用与细胞化学成分的分析

实验内容一、显微镜的结构及使用方法•1、光学显微镜的主要构造机械部分照明部分光学部分•2、光学显微镜的使用方法对光 → 置片 → 低倍 → 高倍 → 复原低倍镜使用高倍镜使用•3、使用光学显微镜的注意事项二、酸性蛋白和碱性蛋白的显示 1#、2#血涂片→凉干→70%乙醇中固定5分钟→冲洗→9 ...

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DNA荧光法染色检测支原体试剂盒

一、原理:利用荧光染料(bisbenzimideHoechst 33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。 二、试剂盒组分: 1.Hoechst 33258工作液 50ml 2 ...

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细胞器的分离实验

细胞器的分离细胞由细胞膜、细胞核和细胞质组成,细胞质中含有若干细胞器和细胞骨架等,这些也称作亚细胞组分。对于细胞的结构和功能的研究,是细胞生物学的基本课题,其重要的研究手段之一是分离纯的亚细胞组分,观察它们的结构或进行生化分析。分离亚细胞组分的方法主要有差速离心和密度梯度离心。差速离心(differential centrifugation)在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小 ...

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人血涂片的制作

血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。 涂片法制片是生物显微制片的基本方法之一。 步骤:可分5个步骤进行消毒→取血→推片→染色→观察消毒与取血消毒先按摩取血部位,使血流通畅;再用酒精消毒采血针和取血部位(如指尖)。取血待酒精干后,刺破皮肤,使血自然流出,勿挤。取干净载片,让血滴在离载片一端中4~ ...

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微染色体-微管结合实验(Minichromosome-Microtubule Binding Assay)

MMBMINICHROMOSOME-MICROTUBULE BINDING ASSAYDetermine the OD600 and correlate the cell density from the chart. Set up four 100mL YPD cultures at the following densities: 0.7x105 1x105 and 3.0x105 cells ...

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体内可见光成像技术用于干细胞研究

王俊1 张怡2 赵春林1 1龙脉得生物技术有限公司 2中国协和医学院 北京清华大学 学研大厦A304. 邮编:100084导言干细胞在肿瘤治疗、组织工程和细胞治疗等方面拥有巨大的潜力。如果在活体动物体内,在各种组织和器官都保持完整的情况下能够观察干细胞的行为和生物学特性,则会大力促进基于干细胞的各种疾病治疗方法的研究工作。目前已对多种干细胞进行了大量的研究,动物模型研究方法也很多,但典型的方法还是 ...

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LAK(Lymphokine activated killer cell)细胞的培养

LAK(Lymphokine activated killer cell)细胞是用细胞因子(如IL-2、IL-12 等)活化的杀伤细胞。即采用自体或同种异体外周血淋巴细胞,在体外经细胞因子活化3~5 天,增强其广谱抗肿瘤作用的功能,并使数量大幅扩增,成为LAK 细胞,可用于肿瘤的治疗。基本原理应用人重组IL-2(hr12 等)于体外活化和扩增外周血淋巴细胞,使其成为经细胞因子活化的杀伤(LAK 细 ...

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Making Microtubule Seeds

Prechill glycerol MgCl2 and GTP on ice. Rapidly thaw frozen tubulin then immediately place on ice. Unpolymerized tubulin is labile!200 µL aliquot of tubulin (cycled)--in BRB80 stored in -70℃100 µL gly ...

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巨噬细胞吞噬现象的观察

一、实验目的1. 观察巨噬细胞的吞噬活动。2. 掌握小鼠腹腔注射给药和脱颈椎处死方法。二、实验原理高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞),专司吞噬作用,为非持异免疫功能的重要组成部分。小鼠腹腔腹腔注射 淀粉肉汤液,可诱导巨噬细胞。三、实验用品1.器材显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸2.试剂生理盐水、Alsever溶液、4%台盼蓝染液3.材料小白鼠、 ...

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TIL (肿瘤浸润淋巴细胞)细胞的培养

肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyteTIL)是从手术切除的肿瘤组织或转移的淋巴结中分离的淋巴细胞,经细胞因子(如IL-2)诱导活化,经大量增殖后回输给原病人。TIL 细胞是一种较LAK 细胞杀瘤效果好、特异性高,而扩增时对IL-2 的作用浓度要求更低的肿瘤杀伤细胞。试剂和材料● 手术切除的肿瘤组织● 淋巴细胞分离液(100%及用1640 配制75%浓度)● ...

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