一、常用设备 1. 准备室的设备 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。 2. 培养室的设备 液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边 ...
Paroxymal nocturnal hemoglobinuria or PNH which manifests as increased fragility of erythrocytes leading to chronic hemolytic anemia pancytopenia (loss of blood cells of all types) and venous thrombo ...
补体的生物学功能主要包括:MAC的生物效应;活化补体片段的生物效应 (一) MAC介导的生物学效应--- 细胞裂解作用 补体系统活化 膜攻击复合物 溶解靶细胞(如:奈氏细菌等G阴性菌,异型红细胞等) 实际意义: A. 抗感染(效应旁路或MBL /效应放大经典) B. 自身免疫病(自身抗体经典) (二) 补体活化片段介导的生物学作用 1. 调理作用 Ag(颗粒性)- ...
血小板在参与血栓形成和动脉粥样硬化中起重要作用。TXA2、5HT引起血管收缩:PDGF、β-TG、PF4刺激平滑肌细胞引起动脉硬化,GPIIb/IIla纤维蛋白原受体活化引起血小板聚集,与凝血系统活化形成的纤维蛋白构成血小板栓子。 血小板粘附、聚集、释放产物、花生烯酸代谢、促凝作用及受体表达参与上述过程。在体内,狭窄血管产生的高切应力,各种细胞释放的产物以及内皮损伤等因素均可构成激活 ...
膜的流动性是生物膜结构的基本特征之一,主要指膜脂肪酸链部分及膜蛋白的运动状态。膜脂类分子在相变温度以上条件下主要有侧向扩散、旋转、左右摇摆、伸缩振荡、翻转及异化运动等方式。膜蛋白的运动方式大体分为侧向及旋转运动,主要受脂质双分子层的影响。脂肪酸不饱和键含量和链的长度明显影响着膜脂流动性,不饱和键的存在会降低膜脂分子间排列的有序性,从而增加膜的流动性,短链能减低脂肪酸链尾部相互作用,在相变温度下, ...
一.试剂配制 无菌水ddw: 高温灭菌; 分装; 2XHBS: 280mM NaCl 10mM KCl 1.5 mM Na2HPO4 12 mM glucose 50 mM HEPES Adjust the pH every 0.05pH from 7.00 to 7.45 using 10N NaOH then add ddw. to the final volume. 过滤灭菌分装; 2M ...
原理: 细胞伤口愈合实验被研究者广泛应用和改进,用来研究各种实验条件比如基因敲除和化疗在细胞迁移和增殖中的作用。该实验操作简单,费用廉价,实验条件容易根据不同的目的改进。该方法的基本原理是,在单层培养细胞间制作划痕以产生愈伤区域,然后监控该伤口周围细胞的向划痕迁移的现象,即伤口愈合。改变细胞迁移和/或生长的因素可以增加或降低伤口愈合率。该方法可以定量,适用于自动化系统高通量筛选。 材料和仪器: ...
材料: 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头(灭菌) 无血清培养基 PBS 准备: 所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内) 流程: 1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。 2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。 3、第二天用 ...
由于传统的血球计数板已不能满足高速发展的细胞研究需要,市场上各种自动细胞计数的设备越来越多。常见的主要分为两 类:基于图像的细胞计数仪(Automated vision-based counter)和基于库尔特电阻抗原理的细胞计数仪。两者主要区别在于,前者扫描仪器视野内图像,依靠设定的上下限细胞大小来进行图像识别,而后者根据 细胞通过小孔引起电位变化来计算细胞个数(关于库尔特原理,详见此处),两 ...
本文由丁香园学术观察员Docofsoul转载并编译,点此查看详情 《每日科学》2011年6月2日报道——伦敦国王学院的研究者找到了一种清除白血病干细胞的新方法,由此可催生新的治疗手段,有望使白血病患者完全缓解。这项小鼠模型的早期研究表明:通过抑制体内发现的两种蛋白质可彻底摧毁白血病干细胞。 干细胞(图片来源:伦敦国王学院) 白血病干细胞是维持白血病的幕后推手 ...
本文由丁香园站友 dhp08转载,点此查看详情 美国每日科学网站5月15日报道:美国南加利福尼亚大学凯克医学院的科学家们破译了老鼠和兔子的毛发干细胞之间是如何交流并以相互协调的方式促进再生的。这是人类首次关注成千上万个毛囊中的干细胞群的群体行为,此前的研究只是关注单个毛囊中的干细胞。 这个团队与来自英国牛津大学的数学生物学家合作,对剃毛老鼠和兔子在数月里毛发生长模式的变化进行了分析。 ...
视频演示了由Shidham提出的用液态的含单个分散细胞和小细胞群的子宫颈阴道细胞学标本制作细胞蜡块的方法。
神经系统通过突触小泡释放神经递质完成在两个神经元之间信号传输的过程。为了直接观察单个突触前末梢神经递质的摄取和释放,我们设计了以荧光人造神经递质为底物的的突触小泡单胺转运实验。
根据结构的不同,细胞划分为两大类:原核细胞和真核细胞。原核细胞结构比较简单,由细胞壁、细胞膜、细胞质和核区组成;核区只是一团核物质,外面没有界膜,不是一个成形的细胞核,但有一个环状DNA分子,它与RNA、酶等组成遗传信息的转录与翻译系统;细胞质中也没有细胞器。 细菌和蓝藻是原核细胞。而除细菌和蓝藻之外的所有单细胞和多细胞的动植物,都由真核细胞组成。真核 ...
生物技术干细胞工程 干细胞工程是在细胞培养技术的基础上发展起来的一项新的细胞工程。它是利用干细胞的增殖特性、多分化潜能及其增殖分化的高度有序性,通过体外培养干细胞、诱导干细胞定向分化或利用转基因技术处理干细胞以改变其特性的方法,使干细胞为人类服务。按分化潜能的大小,干细胞基本上可分为三种类型:一类是全能干细胞,它具有形成完整个体的分化潜能。胚胎干细胞就属于此类,它具有与早期胚胎细胞相似的形 ...
免疫磁性微珠分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞【材料及试剂】(1) 磁性激活细胞分离器(MACS):MACS柱(C型,可结合2×108个细胞)生物素标记的抗CD4单抗和抗CD8单抗(2) 生物素标记的羊抗鼠IgG F(Fab)2(3) FITC标记的亲和素(4) 生物素标记的磁性微珠(5) MACS柱染色洗涤液、MACS柱洗脱液(含1%牛血清白蛋白的PBS) ...
磁化细胞分离器分离法(MACS)分离NK细胞 从外周血分离单个核细胞,以粘附法除去其中的单核细胞后,以尼龙棉柱法除去其中的B细胞,余下的T细胞和NK细胞以磁化细胞分离器(MACS)进行分离。有两种方法:阴性选择法,在反应中加入抗CD3抗体,使T细胞与之特异结合后形式磁性分离柱内,以除去标记的T细胞,洗下的未标记细胞;阳性选择法,在反应中加入抗CD16及抗CD56,使NK细胞与之特异结合形成 ...
不连续密度梯度分离法分离NK细胞 NK细胞即自然杀伤细胞,是一群具有自然杀伤能力的大颗粒淋巴细胞,无粘附作用。它们不需要抗原激活,也没有MHC限制性,即能直接杀伤肿瘤细胞。成熟的NK细胞离开骨髓进入外周免疫器官,主要分布在脾脏和外周血中,约占外周血的3%。【试剂及配制】(1)pH 7.3柠檬酸缓冲液柠檬酸 327mg柠檬酸钠 2.63g碳酸氢钠 222mg葡萄糖 2.55mg ...
Percoll密度梯度离心法分离嗜碱性粒细胞 正常人血液中,嗜碱性粒细胞是数量最少的一种白细胞(2.8×104/ml)因此也是最难分离、提纯的一种细胞。目前仍然用密度梯度离心法分离嗜碱性粒细胞。【试剂及配制】(1) 无Ca2+、Mg2+Hank’s液(2) Percoll混悬液:取购买的Percoll(Pharmacia)90mlHBSS 9mlHEPES ...
当纯净甲醛在水溶液中溶解时,会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一,在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质,因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时,能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时,形成一网状结构,把细胞的各个结构成分连接起来。 单独用多聚甲醛固定细胞不能使抗体进入细胞内,在检测细胞内抗原时,标本经多聚甲 ...